| 东方田鼠部分BAC文库的微卫星筛选 |
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| 引用本文： | 汤敏,倪丽菊,高骏,肖君华,胡建华,高诚.东方田鼠部分BAC文库的微卫星筛选[J].实验动物与比较医学,2012(3):50-55. |
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| 作者姓名： | 汤敏 倪丽菊 高骏 肖君华 胡建华 高诚 |
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| 作者单位： | 东华大学,上海201620;上海市实验动物质量监督检验站,上海201203;上海实验动物研究中心,上海201203;上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海201106;东华大学,上海201620;上海市实验动物质量监督检验站,上海201203;上海实验动物研究中心,上海201203;上海市实验动物质量监督检验站,上海201203;上海实验动物研究中心,上海201203 |
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| 摘 要： | 目的从东方田鼠的部分BAC文库中筛选微卫星。 方法应用非放射性的菌落杂交方法和磁珠富集法从东方田鼠的BAC文库中筛选高质量的微卫星标记。结果以地高辛标记的寡聚核苷酸(CA)20 为探针,通过菌落杂交法从136个东方田鼠BAC克隆中筛选出杂交信号最强的20个阳性克隆。再将这20个阳性克隆分别通过链霉亲和素磁珠法构建亚克隆文库,从中选取400个经PCR鉴定为阳性的亚克隆进一步测序分析,共得到220个微卫星序列,阳性率55%。选取重复次数高,侧翼序列完整的微卫星序列设计74对引物,共有35对引物能扩增出清晰的条带,其中16对引物具有多态性。结论成功且高效地从阳性BAC克隆中筛选出微卫星序列,这些微卫星和阳性BAC克隆可用于后续的定位研究。
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| 关 键 词： | 东方田鼠 BAC文库 微卫星 菌落杂交 链霉亲和素磁珠 |
Screening of microsatellite DNA sequence from the BAC library of Microtus fortis |
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| TANG Min,NI Li-ju,GAO Jun,Xiao Jun-hu,HU Jian-hua and GAO Cheng.Screening of microsatellite DNA sequence from the BAC library of Microtus fortis[J].Laboratory Animal and Comparative Medicine,2012(3):50-55. |
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| Authors: | TANG Min NI Li-ju GAO Jun Xiao Jun-hu HU Jian-hua and GAO Cheng |
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| Institution: | Donghua University,Shanghai 201620, China;Shanghai Quality Monitoring Center for Laboratory Animals,Shanghai 201203 ;Shanghai Laboratory Animal Research Center, Shanghai 201203;the Animal Husbandry and Veterinary Institute of Shanghai Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 201106;Donghua University,Shanghai 201620, China;Shanghai Quality Monitoring Center for Laboratory Animals,Shanghai 201203 ;Shanghai Laboratory Animal Research Center, Shanghai 201203;Shanghai Quality Monitoring Center for Laboratory Animals,Shanghai 201203 ;Shanghai Laboratory Animal Research Center, Shanghai 201203 |
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