D3卵裂期胚胎玻璃化冷冻技术在IVF实验室中的应用

目的探讨玻璃化冷冻技术在人类卵裂期胚胎冻存中的应用价值。方法回顾性分析本中心261个冷冻胚胎复苏周期,比较2种冷冻方法的胚胎存活率、完好率、妊娠率和种植率等数据。结果玻璃化冷冻组的存活率(97.11%)、完好率(89.02%)和种植率(23.12%)显著高于程序化组(91.31%、63.73%、16.31%)(P<0.05),而妊娠率和平均年龄、平均移植胚胎数、平均内膜厚度两组间无统计学差异(40.26%vs40.22%、31.3±5.3vs32.2±5.5、2.25±0.55vs2.27±0.70、8.9±1.1vs9.1±1.6)(P>0.05)。结论玻璃化冷冻是卵裂期胚胎保存的优选方法。     

不同禁欲时间采集精液对IVF-ET实验室指标及临床结局的影响

目的:探讨不同禁欲时间采集精液对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)实验室指标及临床结局的影响。方法:选取2011年6月~2013年7月在该院生殖中心行IVF-ET治疗符合纳入标准的160例患者(160个周期)为研究对象,根据男方禁欲时间不同随机分为:2~3天组、4~5天组、6~7天组及大于7天组4组,每组40例(40个周期)。比较4组患者洗精前后精液质量、MⅡ卵受精率、正常受精率、正常卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率、着床率及早期流产率是否有差异。结果:1随禁欲时间延长4组患者的精液量、精子密度上升(P<0.05);精子活率、前向运动精子率及正常形态率逐渐下降(P<0.05)。而精液经优选技术处理后,以上各指标均有明显改善,处理前后比较差异有统计学意义(P<0.05)。2 4组患者的MⅡ卵受精率、正常受精率、正常卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率、着床率及早期流产率方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:IVF-ET中精液质量正常的患者不同禁欲时间采集的精液对实验室指标及临床结局无明显影响。     

PRPS2在不同生精功能障碍睾丸组织中的表达以及对生精细胞凋亡和增殖的影响

目的探讨磷酸核糖焦磷酸合成酶2(RRPS2)在生精功能不同的睾丸组织中的表达情况以及可能的生物学机制。方法收集2015年7至2017年6月期间在我院病理科存档的石蜡包埋睾丸组织标本63例,其中45例标本来自无精子症或严重少精子症患者,18例组织标本取自生精功能正常者,采用免疫组化法检测生精功能不同的睾丸组织中PRPS2表达情况。采用流式细胞术和MTT方法分析PRPS2基因沉默或过表达对GC1精原细胞、GC2精母细胞和TM4支持细胞凋亡和增殖活性的影响。采用qRT-PCR和Western blot法检测PRPS2对E2F1转录因子表达的影响。结果重度生精功能不良的睾丸组织(35.71%)以及唯支持细胞综合征睾丸组织(21.43%)中PRPS2高表达,显著低于生精功能正常的睾丸组织(72.22%)(P0.05);GC1细胞株中PRPS2表达量显著高于GC2和TM4细胞株(P0.05);shPRPS2基因沉默后,GC1细胞、GC2细胞和TM4细胞凋亡率较空白对照组显著增加,而增殖活性显著降低(P0.05)。PRPS2基因表达上调后,细胞凋亡率较空白对照组和shPRPS2细胞组显著降低,增殖活性显著升高(P0.05);shPRPS2基因沉默后,E2F1mRNA和蛋白表达量较空白对照组显著降低(P0.05)。而PRPS2基因表达上调后,E2F1mRNA和蛋白表达量较空白对照组和shPRPS2细胞组显著上调(P0.05)。结论 PRPS2参与生精细胞凋亡和增殖过程,其可能的作用机制与下调E2F1转录因子的表达有关。     

利用胚胎发育潜能评估IVF实验室培养系统的稳定性

体外受精-胚胎培养实验室(IVF实验室)培养系统包括温度、湿度、CO2浓度、以及培养胚胎的各种试剂、耗材,其稳定性直接关系到辅助生殖的结局,因此对IVF实验室的培养系统定期进行定期检测是辅助生殖技术中的重要组成部分[1].目前检测培养系统的方法有小鼠胚胎实验、人精子存活实验和内毒素实验等[2].本研究通过分析不同批号耗材的胚胎发育情况评估耗材的稳定性,并进一步反应IVF实验室培养系统的稳定性.报告如下.     

D3卵裂期优质胚胎与非优质胚胎培养形成囊胚率及临床应用价值

目的探讨D3卵裂期非优质胚胎与优质胚胎继续培养形成囊胚率及临床应用价值。方法收集本中心486个体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)治疗周期中受精后第3天(D3)移植、冷冻保存后剩余的404枚优质胚胎,528枚非优质胚胎继续囊胚培养,比较两种胚胎的囊胚形成率。玻璃化冷冻已形成的囊胚,如果患者新鲜周期移植妊娠失败,则在下一周期把囊胚解冻移植,比较两种冻融囊胚的种植率和临床妊娠率。结果 D3卵裂期优质胚胎囊胚形成率为88.37%,非优质胚胎囊胚形成率为42.42%(P0.01);其中优质胚胎的78枚囊胚在下一周期解冻移植,其种植率为42.37%,妊娠率为63.53%;非优质胚胎的64枚囊胚在下一周期解冻移植,其种植率为39.65%,妊娠率为58.78%,两组比较差异没有统计学意义(P0.05)。结论⑴D3优质胚胎继续囊胚培养形成率明显高于非优质胚胎。⑵卵裂期优质胚胎培养形成的囊胚与非优质胚胎形成的囊胚冻融后移植的种植率及临床妊娠率没有明显差异。     

少弱精症患者不同禁欲时间采集精液对体外受精-胚胎移植治疗结局及受精方式的影响

目的:探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗中,少弱精症患者不同禁欲时间采集精液对实验室指标、临床结局及受精方式的影响。方法:选取2011年7月~2013年9月在遵义医学院第一附属医院生殖中心行IVF-ET治疗,符合纳入标准的120例患者(120个周期)为研究对象。根据男方禁欲时间不同随机分为2~3天组、4~7天组、>7天组,每组40例(40个周期)。比较3组间洗精前后精液质量、实验室指标(MⅡ卵受精率、正常受精率、正常卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率)、临床结局(临床妊娠率、着床率、早期流产率)及二次取精率、受精方式更改率的差异。结果:洗精前,随禁欲时间延长,3组患者精液的量、密度、活动精子总数增加(P<0.05),前向运动精子率、正常形态率下降(P<0.05)。经优选技术处理后,以上各项指标均有明显改善,处理前后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。3组MⅡ卵受精率、正常受精率、正常卵裂率、可用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率、着床率、早期流产率方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。3组的二次取精率、受精方式更改率随禁欲时间延长而减少,2~3天组与>7天组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在IVFET治疗中,少、弱精症患者不同禁欲时间采集精液对实验室指标及临床结局无明显影响,适当延长禁欲时间可减少二次取精率和受精方式更改率。     

银杏内酯B抗小鼠早孕作用的实验研究

目的:观察银杏内酯B的抗早孕作用.方法:取昆明种未经产雌性孕鼠20只,随机分为A、B两组,每组10只.于妊娠第7～10天,连续每天向A组小鼠腹腔内注射银杏内酯0.07 ml(实验组),向B组小鼠注射相同剂量的生理盐水(对照组).于妊娠第19天用脱颈椎法处死小鼠后,立即剖检受试小鼠,统计胚胎数目,并采集孕鼠子宫、卵巢、心、肝、肾组织进行病理学观察.结果:与对照组比较,腹腔注射银杏内酯组,胚胎数目明显减少或胚胎停止发育(P＜0.001)；蜕膜出现水肿或有炎性细胞浸润,卵巢、心、肝、肾脏组织未见明显组织学病变.结论:①银杏内酯能产生明显抗早期胚胎发育作用；②该研究所采用银杏内酯剂量对心、肝、肾、卵巢组织无明显毒性作用.     

圆头精子卵细胞胞质内单精子注射冻融胚胎移植妊娠1例报告

圆头精子症(globozoospermia)是一种严重的先天性精子发生异常,主要表现为精液中精子的头部呈圆形,顶体异常.由于顶体内含有精子与卵子受精所需要的酶类,因此顶体异常的圆头精子无论在体内和体外都不易与卵子受精,患者因此表现为不育[1].由于该类病例罕见,现将本院生殖中心收治的1例报告如下.     

重度畸形精子症患者精核蛋白表达的研究

目的研究重度畸形精子症患者精核蛋白(TNBP)含量及表达差异,为临床治疗提供理论基础。方法2013年2月至2014年5月提取23例重度畸形精子症患者(重度畸精组)和37例健康男性(对照组)的精液TNBP,在聚丙酰胺凝胶中电泳,经微显像测密仪扫描以测定各蛋白条带的相对含量。结果重度畸精组总组蛋白/总碱性蛋白(TH/TP)、1型精核蛋白/2型精核蛋白(TNBP1/TNBP2)、TP/TNBP2值显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);而TNBP1/TP值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);精子密度显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);精液活率、前向运动率与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 TNBP的相对含量中TNBP1/TNBP2和TP/TNBP2比值异常是导致重度畸精症的原因之一。