人羊膜上皮细胞移植改善AD样病变模型大鼠学习记忆能力

目的:观察人羊膜上皮细胞(h AECs)对阿尔茨海默病(AD)样病变大鼠模型的治疗效应。方法:采用胰蛋白酶消化法分离h AECs,流式细胞术分析表型。48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、培养基组和h AECs移植组,每组12只。采用双侧脑室注入脂多糖(LPS)复制AD样病变大鼠模型。AD样病变大鼠海马区移植5×105个h AECs。细胞移植后2周,Morris水迷宫试验观察行为学变化,HE和硫磺素S染色观察海马病理变化,免疫组化染色检测β-淀粉样蛋白42(Aβ42)、Tau蛋白和乙酰胆碱(ACh)的变化,流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群的变化,流式微球阵列捕获技术(cytometric bead array,CBA)检测血清细胞因子含量,免疫荧光染色检测海马区人细胞核抗原阳性细胞及其神经元特异性核蛋白(Neu N)的表达。结果:与模型组和培养基组比较,h AECs移植组大鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.01),跨域平台次数明显增加(P0.05);海马神经元病损减轻,Aβ沉积减轻(P0.05),磷酸化Tau蛋白水平下降(P0.05),ACh增加(P0.05);外周血Th1和Th17细胞百分比下降(P0.05),而Th2和Treg细胞升高(P0.05);IL-2和IFN-γ水平下调(P0.05),而IL-4上调(P0.05);移植区可见h AECs,并表达Neu N。结论:h AECs可明显改善AD样病变模型大鼠空间辨别性学习记忆能力,减轻海马病理损伤,其免疫调节效应可能发挥重要作用。     

AZFc区gr/gr与男性少精和无精症关系的系统回顾与meta分析

目的 定量系统评价Y染色体AZFc区gr/gr微缺失与少精和无精症的关系。方法 联合应用NCBI PubMed、中国知网(CNKI)、万方等数据库,检索gr/gr及DAZ微缺失与男性少精和无精症的病例-对照研究,截止时间2018年5月31日。应用Stata12.0软件,计算合并风险比值比(odds ratio,OR)及其置信区间(confidence interval,95%CI),评估AZFc区微缺失与少精和无精症的关联。结果 研究共纳入19篇合格文献,包含研究对象8464例,其中病例组5155例、对照3309例。Stata合并分析结果显示,gr/gr微缺失与男性少精子症(oligozoospermia,OZ)显著关联,病例组缺失率显著高于对照组,OR及其95%CI为1.61(1.06~2.44);未发现gr/gr缺失与无精症(azoospermia,AZ)的发生存在显著关联,OR及其95%CI为1.23(0.85~1.79)。结论 AZFc区gr/gr微缺失可能是男性少精症发生的独立遗传因素。     

PRPS2在不同生精功能障碍睾丸组织中的表达以及对生精细胞凋亡和增殖的影响

目的探讨磷酸核糖焦磷酸合成酶2(RRPS2)在生精功能不同的睾丸组织中的表达情况以及可能的生物学机制。方法收集2015年7至2017年6月期间在我院病理科存档的石蜡包埋睾丸组织标本63例,其中45例标本来自无精子症或严重少精子症患者,18例组织标本取自生精功能正常者,采用免疫组化法检测生精功能不同的睾丸组织中PRPS2表达情况。采用流式细胞术和MTT方法分析PRPS2基因沉默或过表达对GC1精原细胞、GC2精母细胞和TM4支持细胞凋亡和增殖活性的影响。采用qRT-PCR和Western blot法检测PRPS2对E2F1转录因子表达的影响。结果重度生精功能不良的睾丸组织(35.71%)以及唯支持细胞综合征睾丸组织(21.43%)中PRPS2高表达,显著低于生精功能正常的睾丸组织(72.22%)(P0.05);GC1细胞株中PRPS2表达量显著高于GC2和TM4细胞株(P0.05);shPRPS2基因沉默后,GC1细胞、GC2细胞和TM4细胞凋亡率较空白对照组显著增加,而增殖活性显著降低(P0.05)。PRPS2基因表达上调后,细胞凋亡率较空白对照组和shPRPS2细胞组显著降低,增殖活性显著升高(P0.05);shPRPS2基因沉默后,E2F1mRNA和蛋白表达量较空白对照组显著降低(P0.05)。而PRPS2基因表达上调后,E2F1mRNA和蛋白表达量较空白对照组和shPRPS2细胞组显著上调(P0.05)。结论 PRPS2参与生精细胞凋亡和增殖过程,其可能的作用机制与下调E2F1转录因子的表达有关。     

D3卵裂期优质胚胎与非优质胚胎培养形成囊胚率及临床应用价值

目的探讨D3卵裂期非优质胚胎与优质胚胎继续培养形成囊胚率及临床应用价值。方法收集本中心486个体外受精-胚胎移植(IVF-ET)和卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(ICSI-ET)治疗周期中受精后第3天(D3)移植、冷冻保存后剩余的404枚优质胚胎,528枚非优质胚胎继续囊胚培养,比较两种胚胎的囊胚形成率。玻璃化冷冻已形成的囊胚,如果患者新鲜周期移植妊娠失败,则在下一周期把囊胚解冻移植,比较两种冻融囊胚的种植率和临床妊娠率。结果 D3卵裂期优质胚胎囊胚形成率为88.37%,非优质胚胎囊胚形成率为42.42%(P0.01);其中优质胚胎的78枚囊胚在下一周期解冻移植,其种植率为42.37%,妊娠率为63.53%;非优质胚胎的64枚囊胚在下一周期解冻移植,其种植率为39.65%,妊娠率为58.78%,两组比较差异没有统计学意义(P0.05)。结论⑴D3优质胚胎继续囊胚培养形成率明显高于非优质胚胎。⑵卵裂期优质胚胎培养形成的囊胚与非优质胚胎形成的囊胚冻融后移植的种植率及临床妊娠率没有明显差异。