血管紧张素转化酶2对高脂饲养的ApoE－/－小鼠保护内皮、改善胰岛素抵抗及抑制肝脏纤维化的实验观察

目的研究携带血管紧张素转换酶2(ACE2)基因的重组腺病毒载体(Ad-ACE2)转染对高脂饲养的载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠保护内皮、改善胰岛素抵抗及抑制肝脏纤维化的影响。方法用高脂高能量饲料喂养ApoE~(-/-)小鼠,模拟代谢综合征。30只ApoE~(-/-)小鼠随机分为对照组(Con组)、ACE2基因对照组(EGFP组)和ACE2基因治疗组(ACE2组),每组10只,均给予高脂饮食。3组分别通过尾静脉注射生理盐水、Ad-EGFP和Ad-ACE2干预。12周末行葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验。小鼠麻醉后,心尖取血,测定血脂水平。取肝脏组织进行HE染色、油红O染色。免疫组织化学染色观察肝组织ACE2、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、白细胞介素6(IL-6)表达。结果用Ad-ACE2转染的ACE2组显著提高了ApoE~(-/-)小鼠肝脏中ACE2的表达(P0.05),ACE2组内皮依赖性功能明显优于Con组和EGFP组(P0.05),胰岛素敏感性强于Con组和EGFP组(P0.05),而血脂水平无明显改变。ACE2组肝脏组织中COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、IL-6表达均低于Con组和EGFP组(P0.05)。结论 ACE2过表达能够保护内皮,改善胰岛素抵抗,抑制肝脏纤维化,从而保护肝脏功能。     

单硝酸异山梨酯对动脉粥样硬化兔血管内皮细胞功能的影响及机制探讨

目的 研究单硝酸异山梨酯对动脉粥样硬化兔血管内皮细胞功能的影响及机制. 方法 将30只新西兰大白兔随机分为对照组、高脂组、单硝酸异山梨酯组,每组10只.高脂组给予高胆固醇饲料(1.5%胆固醇+5%猪油的颗粒饲料)喂养,单硝酸异山梨酯组给予高胆固醇饲料+单硝酸异山梨酯0.5 g·kg-1·d-1.8周后,3%戊巴比妥(1 mL·kg-1)耳缘静脉注射麻醉,取兔腹主动脉做病理切片,行常规HE染色观察腹主动脉斑块的大小,行免疫组化染色检测植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1),P-选择素(P-selectin),并且应用全自动生化分析仪及血生化测定试剂盒,测定动脉硬化兔血清总胆固醇(TC)及三酰甘油(TG)的水平.结果 单硝酸异山梨酯组腹主动脉斑块的LOX-1和P-selectin的表达水平明显低于高脂组(P<0.05),但是血清TC、TG与高脂组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 单硝酸异山梨酯具有延缓动脉粥样硬化进展的作用,其机制可能与下调LOX-1、P-selectin等黏附分子,减轻斑块炎性细胞浸润进而改善血管内皮细胞功能有关.     

DIZE对糖尿病心肌病大鼠心功能的保护作用

目的:观察研究血管紧张素转换酶2(ACE2)激动剂重氮氨苯脒乙酰甘氨酸盐(DIZE)对糖尿病心肌病(DCM)大鼠心功能的保护作用。方法:30只健康雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、DCM组和DIZE处理组(DIZE组),每组10只。DCM组与DIZE组一次性腹腔注射链脲佐菌素65 mg/kg,建立糖尿病模型,12周后经超声检查选出符合糖尿病心肌病的大鼠模型,分别给予DIZE 15 mg·kg~(-1)·d~(-1)或等体积生理盐水,皮下泵入给药4周处理。第16周末行超声检测心功能后麻醉处死大鼠。通过HE染色和Masson染色观察大鼠心肌组织形态学变化,Wsetern blot、ELISA和免疫组化等方法观察ACE2、血管紧张素(Ang)Ⅱ、Ang-(1-7)、白细胞介素(IL)-1、IL-6和结缔组织生长因子(CTGF)等指标的变化。结果:DIZE显著提高了糖尿病大鼠心肌中ACE2的表达,DIZE组较DCM组心肌组织中胶原含量明显降低,IL-1和IL-6蛋白表达水平明显下降,心功能得到明显改善(P0.05)。结论:ACE2内源性激动剂DIZE显著提高了ACE2的水平,降低了炎症水平,从而对DCM大鼠心功能起到保护作用。     

关注ACE2的心血管保护作用

血管紧张素转换酶2(ACE2)是肾素-血管紧张素系统(RAS)的新成员,目前认为其与动脉粥样硬化、动脉瘤、冠心病心肌梗死、糖尿病心肌病(DCM)及阿霉素心肌病(ACM)的过程密切相关。ACE2具有抑制血管重构及心肌重构的作用,在以上疾病的预防及治疗中具有重要意义。     

非肽类Ang(1-7)受体激动剂AVE0991对大鼠糖尿病肾病的保护作用

目的 探究非肽类Ang(1-7)受体激动剂AVE0991对链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠糖尿病肾病(DN)的保护作用。 方法 30只Wistar大鼠随机分为3组:正常对照组(NC组)、糖尿病肾病组(DN组)、AVE0991处理组(AVE组),每组10只。DN组与AVE组腹腔注射STZ(65 mg/kg),STZ注射8周后,给予AVE组AVE0991灌胃处理,NC组及DN组取等量生理盐水灌胃,连续灌胃4周。12周末收集标本,检测各项生理生化指标;高碘酸-希夫(PAS)及免疫组化观察各组肾脏病理变化;实时荧光定量PCR及酶联免疫吸附实验(ELISA)法分别检测白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA及蛋白水平变化。 结果 与NC组相比,DN组与AVE组大鼠血肌酐、24 h尿蛋白定量、肾质量体质量比明显升高,肾小球硬化指数、胶原Ⅰ(CollagenⅠ)表达量、炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA及蛋白水平明显上升。AVE组与DN组相比,大鼠血肌酐、24 h尿蛋白定量、肾小球硬化指数、CollagenⅠ表达量及肾组织炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.01)。 结论 AVE0991可以降低大鼠DN的纤维化及炎症水平。     

补肾和脉方治疗动脉粥样硬化炎症的效果及机制探讨

目的 研究补肾和脉方（HMF）对载脂蛋白 E 基因敲除（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化（AS）的治疗效果及可能机制。方法 将 24 只 ApoE-/-小鼠随机分为高脂组、 HMF 组和阿托伐他汀组, 每组 8 只。高脂组给予高脂饲料（0.25%胆固醇和 15%可可脂） 喂养, HMF 组给予高脂饲料+HMF[1.37 g/(kg·d)]喂养, 阿托伐他汀组给予高脂饲料+阿托伐他汀[5 mg/(kg·d)]喂养。8 周后, 戊巴比妥钠（0.8%, 0.05 mL/10 g）腹腔注射麻醉, 取小鼠胸主动脉切片, 行常规 HE 染色观察胸主动脉斑块大小; 行免疫组化染色检测巨噬细胞 CD68、 肿瘤坏死因子 （TNF） -α、 白细胞介素 （IL） -1β 和 IL-8 的表达水平。并采用日本全自动生化分析仪测量小鼠总胆固醇 （TC） 和总三酰甘油 （TG） 水平。结果 HMF 组胸主动脉斑块大小, 胸主动脉斑块内 CD68、 TNF-α、 IL-1β和 IL-8 的表达水平, TC、 TG 水平均明显低于高脂组, 高于阿托伐他汀组 （均 P＜0.05）。结论 HMF 具有抗动脉硬化作用, 可抑制 AS 进展, 其机制可能与降低血脂, 减轻斑块炎症细胞浸润, 减少炎症因子分泌有关。     

ACE2内源性激动剂DIZE对糖尿病肾病大鼠的保护作用

目的:观察血管紧张素转换酶2(ACE2)内源性激动剂乙酰甘氨酸重氮氨苯脒(DIZE)对糖尿病肾病(DN)大鼠的保护作用。方法:30只Wistar大鼠随机分为正常对照组(NC组)、DN组和DIZE处理组(DIZE组)。DN组与DIZE组一次性腹腔注射链脲佐菌素(65 mg/kg)建立糖尿病模型,12周后糖尿病肾病大鼠模型建立后给予DIZE 15 mg·kg~(-1)·d~(-1)或等量生理盐水皮下注射4周处理。16周末称量体重和肾重,计算肾质量体质量比(KW/BW),收集血、尿标本,检测血糖(GLU)、24 h尿蛋白(24UP)及血清肌酐(SCr)等指标。通过PAS染色观察各组肾脏病理变化;ELISA法检测大鼠AngⅡ、Ang-(1-7)、TGF-β1及VCAM-1水平的变化;通过免疫组化观察collagenⅠ和FN蛋白表达的变化;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测大鼠肾组织collagenⅠ和FN mRNA含量的变化;Western blot观察各组大鼠ACE2蛋白表达的变化。结果:DIZE显著提高了糖尿病大鼠ACE2的表达(P0.05),降低了糖尿病大鼠血浆AngⅡ含量(P0.05),提高了Ang-(1-7)的水平(P0.05)。与NC组大鼠相比,DN组与DIZE组大鼠的24UP、SCr和KW/BW明显升高(P0.05),collagenⅠ和FN mRNA水平及蛋白表达量增加,肾脏组织TGF-β1及VCAM-1明显上升(P0.05)。DIZE组与DN组大鼠相比,24UP和SCr水平降低(P0.05),GLU和KW/BW无明显差异,collagenⅠ和FN mRNA含量及蛋白表达量减少,肾脏组织TGF-β1及VCAM-1水平降低(P0.05)。结论:ACE2内源性激动剂DIZE显著提高了ACE2的活性,增加了Ang-(1-7)的含量,从而降低了肾脏纤维化及炎症水平,并对糖尿病肾病大鼠起到保护性作用。     

心可舒与氟伐他汀抑制兔动脉粥样硬化黏附分子的表达及炎性反应

目的观察心可舒及氟伐他汀对兔动脉粥样硬化(AS)斑块血管细胞黏附分子(VCAM-1)的影响及其机制。方法将雄性新西兰大白兔随机分为对照组、高脂AS模型组、氟伐他汀组及心可舒组,每组9只。通过HE染色评估粥样斑块的程度。应用免疫组化检测巨噬细胞、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,蛋白免疫印迹法分析斑块VCAM-1的表达水平,并检测氧自由基SOD及MDA的含量。结果心可舒及氟伐他汀组VCAM-1的表达明显低于高脂组的水平(P0.01),巨噬细胞、MMP-9及α-SMA的水平亦明显低于高脂组(P0.01),SOD的含量明显升高(P0.01)。结论心可舒及氟伐他汀通过抗氧自由基及抗炎作用保护兔血管内皮及抗动脉粥样硬化。     

青蒿素对糖尿病心肌病大鼠心功能及纤维化的影响

目的观察青蒿素对糖尿病心肌病大鼠心功能及纤维化的影响。方法 Wistar大鼠随机取正常组8只,其余大鼠以一次性腹腔注射链脲佐菌素造糖尿病模型。16周后,经超声检测糖尿病心肌病造模成功大鼠,再随机分为糖尿病心肌病组、青蒿素治疗组,每组8只。各组分别采取相应干预措施。采用HE染色观察心脏的病理改变,用Masson三色染色法观察胶原纤维表达并测定其表达量,应用超声心动图评测Wistar大鼠的心脏功能。结果与正常组比较,糖尿病心肌病组胶原纤维的表达明显升高(P0.01),E/A、LVEF、FS明显下降(P0.01),心脏收缩舒张功能明显降低。与糖尿病心肌病组比较,青蒿素治疗组大鼠胶原纤维的表达明显降低(P0.01),E/A、LVEF、FS明显上升(P0.01),心脏收缩舒张功能明显改善。结论青蒿素可通过减轻心脏的纤维化来提高大鼠的心功能。