硫化氢对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的:探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)和Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)的影响.方法:选择硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体,将32只♀SD大鼠分为3组:正常组(N组)8只、肝纤维化组(hepatic fibrosis,HF组)13只、NaHS干预组(S组)11只,采用四氯化碳复合因素法复制肝纤维化模型,S组自造模第6周始给予NaHS56μmol/(kg·d)腹腔注射12d,N组和HF组给予同等剂量的生理盐水腹腔注射.干预结束后,宰杀大鼠留取肝脏行肝组织病理切片HE染色评价肝纤维化分期,行Masson染色观察胶原纤维沉积情况,应用RT-PCR法检测肝脏中COL-Ⅰ、COL-ⅢmRNA表达,采用SP免疫组织化学法检测肝脏COL-Ⅰ、COL-Ⅲ表达.结果:HF组与N组相比,COL-Ⅰ、COL-Ⅲ及其mRNA表达升高(均P=0.000),与肝纤维化分期结果一致(P=0.000);S组与HF组相比,COL-Ⅰ和COL-Ⅲ表达降低(均P=0.000);COL-ⅠmRNA表达降低(P=0.009),同时COL-ⅢmRNA表达亦降低(P=0.003),肝纤维化分期下降(P=0.047).结论:H2S具有降低肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的作用,能够延缓肝纤维化的发生发展.     

秋水仙碱对血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ型胶原蛋白表达的影响

目的　阐明秋水仙碱治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏胶原蛋白表达的影响。方法　应用免疫组化技术 ,观察血吸虫病肝纤维化小鼠在秋水仙碱治疗前后肝脏Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ型胶原蛋白的分布及含量 (半定量 )变化。结果　秋水仙碱治疗组小鼠与对照组相比 ,肝内Ⅰ型胶原蛋白无显著变化 ,而肝内Ⅲ型和Ⅵ型胶原蛋白的免疫组化染色均明显减弱 ;对胶原含量半定量分级亦显示两组Ⅰ型胶原含量无差异 (χ2 =2 .43,P >0 .0 5 ) ,而Ⅲ型和Ⅵ型胶原蛋白在治疗组的含量则显著下降 (X2 分别为6 .0 7,8.17,P <0 .0 5 )。结论　秋水仙碱治疗可显著降低血吸虫感染小鼠肝内Ⅲ型和Ⅵ型胶原蛋白含量 ,从而发挥其抗肝纤维化作用。     

血管紧张素转换酶2基因转染对内皮细胞的保护作用

目的：探讨血管紧张素转换酶2（ACE2）基因转染对内皮细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)表达的影响及意义。方法：实验包括体外实验与体内实验。体外实验,首先进行人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的培养,然后应用蛋白质印迹法检测ACE2转染对血管紧张素II刺激HUVEC产生的LOX-1蛋白表达的影响。体内实验,首先建立载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化模型。然后将20只ApoE-/-小鼠随机分为ACE2组及增强型绿色荧光蛋白组（EGFP组）,每组10只。ACE2组经尾静脉注射ACE2的复制缺陷重组腺病毒（Ad-ACE2）(2.5×109 pfu/ml),EGFP组注射等量EGFP的复制缺陷重组腺病毒(Ad-EGFP)。注射一个月后处死动物,做腹主动脉的油红O及LOX-1表达的检测。结果：体内实验与体外实验均证实ACE2基因转染抑制了内皮细胞LOX-1的表达,体内实验中ACE2组斑块内脂质含量明显低于EGFP组水平。结论：ACE2通过抑制LOX-1的表达进而抑制了动脉粥样硬化斑块的进展。     

虫草多糖脂质体对实验性大鼠肝纤维化Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因表达的影响

目的:探讨虫草多糖脂质体(CPL)对CC14大鼠肝纤维化的预防作用及可能机制。方法:采用虫草多糖脂质体(CPL)预防CC14大鼠肝纤维化,运用免疫组和Northern杂交化检测肝组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白及Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因的表达。结果:CPL预防组肝脏中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白较模型对照组明显减少(P值分别<0.01);CPL预防组大鼠肝脏组织Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达量明显下降,与模型组大鼠比较差异有显著性(P值分别<0.05)。结论:虫草多糖脂质体可以预防大鼠肝纤维化,其抗纤维化作用是通过在转录水平抑制肝脏胶原合成而实现的。     

血管紧张素转化酶2基因转染对实验性动脉硬化兔斑块炎症的影响

目的 探讨血管紧张素转化酶2(ACE2)基因转染是否能通过使血管紧张素(Ans)Ⅱ转化为Ang1-7而抑制动脉硬化斑块的炎症反应.方法 克隆小鼠ACE2基因,并构建复制缺陷重组腺病毒质粒Ad-ACE2;用球囊损伤内皮细胞及高脂饲养建立兔动脉硬化模型,喂养3个月,将38只新西兰大白兔随机分为Ad-ACE2及Ad-EGFP两组,每组19只.Ad-ACE2组注射ACE2的腺病毒(2.5×109pfu/m1)入兔的腹主动脉中,Ad-EGFP组注射Ad-EGFP,注射1个月后处死动物,取腹主动脉,检测巨噬细胞和单核细胞趋化因子(MCP-1)蛋白的表达;同时应用实时定量PCR检测MCP-1基因的表达.结果 Ad-ACE2组的动脉硬化斑块中的巨噬细胞阳性表达率(13.6%±4.2%)明显低于Ad-EGFP组(23.6%±6.9%,P<0.01);而基因转染后MCP-1蛋白的表达(13.2%±0.4%)明显低于Ad-EGFP组(25.0%±7.4%,P<0.01).结论 ACE2基因转染抑制了MCP-1的蛋白表达及巨噬细胞浸润程度,提示ACE2基因具有抑制动脉粥样硬化斑块炎症的作用.     

姜黄素类似物H8通过ERK信号通路改善糖尿病小鼠肾脏纤维化的研究

目的探讨姜黄素类似物H8改善糖尿病小鼠模型肾纤维化的作用和机制。方法选取9周龄糖尿病db/db小鼠和db/m小鼠,分为正常对照组(db/m,Con)、糖尿病组(db/db)、H8治疗组(db/db+H8),每组8只。各组自给药开始计时,第8周末处死,采集血液和肾脏组织,检测H8对血清尿素(UR)、Scr、SUA特征指标的影响;HE染色、Masson染色观察肾脏病理形态变化;RT-PCR检测小鼠肾组织中胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、波形蛋白(Vimentin)mRNA的表达;Western blot检测ColⅠ、Vimentin、p-ERK、ERK的蛋白表达。结果 db/db+H8组血清UR、Scr、SUA降低(P0.05);HE、Masson染色显示,H8能改善db/db小鼠肾脏组织炎症侵袭、胶原蛋白累积与肾纤维化;与db/db组比较,db/db+H8组的RT-PCR显示ColⅠ、Vimentin mRNA水平下降(P0.05),Western bolt结果显示,ColⅠ、Vimentin、p-ERK蛋白表达水平也降低(P0.05或P0.01)。结论 H8能改善db/db小鼠肾脏纤维化,可能与抑制ERK信号通路有关。     

复方普洱茶饮料对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块的干预作用及血清TXA2/PGI2比值和DNA甲基化水平的影响

目的探讨复方普洱茶饮料对高脂喂养的Apo E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(As)斑块的干预作用及血清血栓素(TX)A2/前列环素(PG)I2比值和DNA甲基化水平的影响。方法将30只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠高脂饲料喂养6 w后随机分为模型组、立普妥(阳性对照组)和茶饮料组(n=10),给予药物干预6 w,另设正常组同品系小鼠(C57BL/6J家系)6只。检测其血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、胰岛素、TXA2、PGI2、DNA甲基化转移酶(DNMT)水平和DNA甲基化水平。HE染色和VG染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块面积、斑块内细胞外脂质成分和胶原成分。结果与模型组相比,茶饮料组和立普妥组小鼠血清TC和TG水平明显降低,HDL-C水平明显升高(均P0.01),校正后主动脉As斑块面积、斑块内细胞外脂质成分显著降低(P0.05);小鼠血清DNA甲基化、DNMT及胰岛素水平、小鼠血清TXA2水平显著降低而血清PGI2水平显著升高(均P0.01)。结论复方普洱茶饮料可以降低血清TXA2/PGI2比值和DNA甲基化水平,从而达到抗ApoE~(-/-)小鼠主动脉As斑块的作用。     

白细胞介素35对ApoE－/－小鼠炎症及动脉粥样硬化的影响

目的研究白细胞介素35(IL-35)对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化进程及其相关炎症因子IL-10、转化生长因子β(TGF-β)及IL-17的影响,探讨IL-35对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的可能作用机制。方法 24只ApoE~(-/-)8周龄实验小鼠,普通饲料饲养1周后随机平均分为正常对照组、动脉粥样硬化组及IL-35干预组[每只小鼠腹腔内注射IL-35 1.2 mg/(kg·d)],正常对照组继续给予普通饲料,其他各组均以高脂饲养建立动脉粥样硬化模型,造模给药16周后采集血标本及胸主动脉,HE染色观察各组小鼠主动脉斑块形成并测定血管内膜中膜厚度,免疫组织化学染色法测定各组小鼠主动脉血管壁IL-10、TGF-β及IL-17的表达,ELISA检测各组小鼠血清中IL-10、TGF-β及IL-17的水平。结果与正常对照组相比,动脉粥样硬化组斑块形成明显,内膜中膜厚度显著增加(P0.01),IL-10在血管壁表达显著增加(P0.05),而TGF-β在血管壁表达无统计学差异(P0.05),IL-10和TGF-β在血清中水平显著降低(P0.05),IL-17在血管壁表达和血清中水平显著升高(P0.05);与动脉粥样硬化组比较,IL-35干预组斑块明显改善,内膜中膜厚度显著减低(P0.01),IL-10和TGF-β在血管壁表达和血清中水平显著升高(P0.05),IL-17在血管壁表达和血清中水平显著降低(P0.05)。结论 IL-35具有延缓动脉粥样硬化进程的作用,这可能与其抑制促炎因子IL-17、上调抗炎因子IL-10和TGF-β水平有关。     

RNAi介导的脂联素基因沉默对ApoE基因敲除小鼠糖脂代谢的影响

探讨脂联素基因表达缺陷对ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠糖脂代谢的影响.注射短发卡RNA(shRNA)腺病毒后高脂喂养的ApoE~(-/-)小鼠(ADI组)血浆脂联素水平明显低于普食喂养(NF)、单纯高脂喂养(HF)和空载腺病毒高脂对照组(GF,均P<0.01).3组高脂喂养的APOE~(-/-)小鼠体重、空腹血糖、血浆游离脂肪酸、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和血浆胰岛素水平明显高于NF组(均P<0.01),而ADI组与HF和GF组相比,游离脂肪酸、总胆同醇、甘油三酯、LDL-C、HDL-C和血浆胰岛素水平增高更为明显(P<0.01或P<0.05),提示长期高脂饲养和脂联素基因表达缺陷使ApoE~(-/-)小鼠具备较为典型的糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗的病理生理表现.     

创面负压治疗对糖尿病足创面肉芽组织胶原蛋白沉积的影响

目的探讨创面负压治疗(NPWT)对糖尿病足(DF)肉芽组织胶原蛋白沉积的影响。方法选取2014年1月至2016年6月在解放军白求恩国际和平医院内分泌科住院的DF患者40例,随机分为NPWT组和对照组(Con),每组各20例。NPWT组给予NPWT治疗,Con组给予常规换药治疗。两组分别于治疗前及治疗第14天取创面肉芽组织,行免疫组织化学染色,Western blot和RT-PCR分析Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达情况。结果免疫组织化学分析显示,两组治疗后Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白平均面密度值较治疗前升高,NPWT组升高的程度高于Con组[(0.12±0.03)vs(0.34±0.04),(0.06±0.03)vs(0.19±0.03),P0.01]。Western blot分析显示,两组治疗后Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白相对蛋白表达值较治疗前均升高,但NPWT组升高的程度高于Con组[(0.10±.042)vs(0.25±0.08),(0.11±0.03)vs(0.19±0.07),P0.01]。RT-PCR分析显示,两组治疗后Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白mRNA相对表达值较治疗前均升高,但NPWT组升高程度高于Con组[(0.94±0.29)vs(3.24±0.54),(1.13±0.45)vs(3.13±1.20),P0.01]。结论 NPWT可促明显进创面肉芽组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达上调,从而促进创面的愈合。     

大蒜素对高脂饮食ApoE－/－小鼠动脉粥样硬化形成的影响

目的观察大蒜素对高脂饮食诱导的ApoE~(-/-)小鼠巨噬细胞泡沫化及动脉粥样硬化形成的影响,并从清道夫受体调控的角度探讨其相关的作用机制。方法 6周雄性ApoE~(-/-)小鼠随机分为4组:正常饮食组、高脂饮食组、高脂饮食+低剂量大蒜素组、高脂饮食+高剂量大蒜素组。采用血脂检测试剂盒测定小鼠血脂水平;使用油红O染色法观察小鼠主动脉根部斑块形成面积和腹腔巨噬细胞泡沫化情况;Western blot法检测腹腔巨噬细胞中清道夫受体SR-A和CD36表达以及JNK和p38激酶磷酸化水平。结果大蒜素可呈剂量依赖性降低高脂饮食小鼠总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇的水平(P0.05),并显著减少主动脉根部斑块面积以及腹腔巨噬细胞泡沫化的形成(P0.05)。Western blot结果显示大蒜素不仅抑制高脂饮食所诱导的腹腔巨噬细胞中SR-A和CD36表达的增加(P0.05),还能够显著减少JNK和p38激酶磷酸化水平。结论大蒜素减少SR-A和CD36表达,并抑制JNK和p38激酶激活,从而发挥抗泡沫化和动脉粥样硬化的作用。     

宁心解毒汤、血塞通、瑞舒伐他汀对ApoE－/－小鼠炎症因子和As斑块的影响

目的通过建立ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(As)模型,探讨宁心解毒汤、血塞通、瑞舒伐他汀对小鼠血脂、炎性因子和斑块结构的影响。方法高脂喂养80只8周龄ApoE~(-/-)小鼠4周后,随机分为宁心解毒汤组、血塞通组、瑞舒伐他汀组和对照组。药物灌胃8周后处死。处死前测量体重、尾动脉血压,小鼠尾静脉取血,检测小鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。分离主动脉,观察主动脉粥样硬化斑块特征。结果对照组ApoE~(-/-)小鼠血总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇较其他3组差异有显著性,且瑞舒伐他汀组与宁心解毒汤组、血塞通组差异也有显著性(P0.05)。对照组ApoE~(-/-)小鼠体重、血压较其他3组差异无显著性(P0.05)。对照组ApoE~(-/-)小鼠IL-6、IL-1β、TNF-α的血清浓度,明显高于较其他3组(P0.05);而宁心解毒汤组、血塞通组、瑞舒伐他汀组3组间差异无显著性(P0.05)。对照组动脉斑块分布弥漫,而其他3组的整个动脉也有斑块,明显轻于对照组(P0.05)。结论ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食能够理想构建动脉粥样硬化动物模型。宁心解毒汤、血塞通、瑞舒伐他汀可以通过调脂、减低炎性因子的表达来发挥抗As作用。瑞舒伐他汀控制斑块发展的效果更好,考虑与其调脂相关。     

白细胞介素-22对高脂饮食诱导的ApoE~(-/-)小鼠主动脉内质网应激的影响

目的观察IL-22对高脂饮食诱导的载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠主动脉内质网应激的影响。方法 24只健康雄性ApoE~(-/-)小鼠(8周龄)被随机分为对照(Control)组、高脂(HF)组、HF+IL-22组,每组8只。Control组给予普通饲料,另外2组给予高脂饲料喂养12周。HF+IL-22组同时腹腔注射用PBS(含5%海藻糖)稀释的重组小鼠白细胞介素(rmIL-22)溶液0.1 mL/d,浓度200 ng/mL,其余小鼠腹腔注射等量的PBS溶液(含5%海藻糖)。实验12周后,检测各组小鼠血脂水平、主动脉内质网应激相关蛋白[葡萄糖调节蛋白(GRP) 78、GRP94、C/EBP同源蛋白(CHOP)]mRNA及GRP78蛋白的表达水平。结果与Control组相比,HF组TC、HDL-C、TG和LDL-C水平显著升高(P0.05),GRP78、GRP94和CHOP的mRNA表达量亦显著升高(P0.05),GRP78蛋白表达量也显著升高(P0.01); HF+IL-22组较HF组TC和LDL-C水平显著降低(P0.05),GRP78、GRP94的mRNA表达量显著降低(P0.001),GRP78蛋白表达量也显著降低(P0.05),且HF+IL-22组较Control组LDL-C、TC、TG、HDL-C水平增高,GPP78、CHOP mRNA、GRP78蛋白表达增高,GRP94 mRNA水平降低(P0.05)。结论 IL-22能够改善高脂饮食诱导的ApoE~(-/-)小鼠主动脉内质网应激。     

双甲五灵冲剂抑制免疫性肝纤维化大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及基因表达的实验研究

目的探讨中药双甲五灵冲剂对免疫诱导型肝纤维化大鼠肝组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及基因表达的影响.方法80只雌性Wistar大鼠尾静脉注射人血白蛋白,建立免疫损伤性肝纤维化大鼠模型后分为6组:B预防组造模同时开始喂食双甲五灵冲剂;C治疗1组:在造模结束的同时开始喂食双甲五灵冲剂;D治疗2组:在造模结束3mo后开始喂食双甲五灵冲剂;E秋水仙碱组:在造模结束的同时开始喂食秋水仙碱;F鳖甲软肝片组:在造模结束的同时开始喂食鳖甲软肝片;G模型组:以观察肝纤维化自然恢复情况;另设A组为正常对照组.采用HE染色及Von-Gieson胶原纤维特殊染色以观察观察肝组织结构改变及肝纤维化程度,并采用肝组织原位杂交技术及免疫组织化学染色观察大鼠肝脏组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及基因的表达强度.结果免疫诱导型肝纤维化大鼠,在造模结束后肝组织学改变呈进行性加重,以造模结束后3 mo为著,其Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及基因呈强阳性表达,而经双甲五灵冲剂治疗后的大鼠与模型组大鼠相比,肝组织结构明显好转,纤维组织明显减少,Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及基因表达明显降低(P＜0.05),并且其效果为预防组效果最好,治疗1组较治疗2组效果好,三组均明显优于秋水仙碱组.结论中药双甲五灵冲剂可以逆转肝纤维化,其抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白及基因的表达是逆转肝纤维化的机制之一.     

脂联素对刀豆球蛋白A诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的探讨脂联素(ADPN)是否对肝脏的免疫性损伤具有保护作用以及可能的作用机制。方法将小鼠ADPN基因高效表达载体导入小鼠体内,获得高血清ADPN模型小鼠(表达载体组),与导入空载体的对照小鼠(空载体组)同时静脉内注射刀豆球蛋白A(Con A),以诱导肝脏的免疫性损伤,测定不同时间点血清ALT浓度,并进行肝组织病理学检查(HE染色),观察两组小鼠肝脏损伤程度是否有差异。比较两组间血清TNFα浓度的不同,探讨可能的作用机制。结果表达载体组小鼠注射Con A后血清ALT水平的升高明显低于空载体组,差异有统计学意义(P<0.01),组织学检查也显示表达载体组小鼠的肝损伤明显低于空载体组。经统计分析表明,ALT水平与血清ADPN水平成负相关(r=-0.5034,P=0.0121)。表达组小鼠血清TNFα水平明显低于空载体组(P<0.01)。结论脂联素对Con A诱导的肝脏免疫性损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制TNFα的产生进而阻断肝细胞遭受免疫性攻击有关。     

姜黄素通过影响巨噬细胞的极性延缓动脉粥样硬化进展

目的研究姜黄素对ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化进展及斑块中巨噬细胞极性的影响。方法用高脂高胆固醇饮食饲养ApoE~(-/-)小鼠建立动脉粥样硬化模型,设立姜黄素治疗组、阿托伐他汀治疗组和高脂组;通过免疫组织化学(HE染色、油红O染色、Masson染色、苏木精染色)及免疫荧光染色检测主动脉斑块形态及不同亚型巨噬细胞的含量。通过实时荧光定量PCR检测主动脉组织中炎症因子的表达。结果姜黄素干预能减轻ApoE~(-/-)小鼠主动脉粥样硬化病变,并降低动脉粥样硬化斑块的易损指数。姜黄素降低动脉粥样硬化斑块内M1/M2巨噬细胞的比值,减少M1型巨噬细胞分泌的促炎因子白细胞介素1β(IL-1β)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,促进M2型细胞因子IL-10、Ym1和Fizz1的表达。结论姜黄素可通过影响斑块中巨噬细胞的极性、抑制相关的炎症反应,从而延缓ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的进展。     

秋水仙碱对血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏I、Ⅲ、Ⅵ型胶原蛋白表达的影响

目的阐明秋水仙碱治疗对血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏胶原蛋白表达的影响。方法应用免疫组化技术,观察血吸虫病肝纤维化小鼠在秋水仙碱治疗前后肝脏Ⅰ、Ⅲ、Ⅵ型胶原蛋白的分布及含量(半定量)变化。结果秋水仙碱治疗组小鼠与对照组相比,肝内Ⅰ型胶原蛋白无显著变化,而肝内Ⅲ型和Ⅵ型胶原蛋白的免疫组化染色均明显减弱;对胶原含量半定量分级亦显示两组Ⅰ型胶原含量无差异(χ     

慢性间歇低氧对小鼠心肌低氧诱导因子-2α和β3肾上腺素能受体表达及心功能的影响

目的:观察慢性间歇低氧(CIH)下,ApoE~(-/-)小鼠心肌组织中低氧诱导因子2α(HIF-2α)与β3肾上腺素能受体(β3 AR)的表达及小鼠心功能的变化,探讨CIH影响心功能的机制。方法:将24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为对照组(n=8)、高脂组(n=8)和高脂+低氧组(n=8),以高脂饲料喂养小鼠构建肥胖模型,用电脑程序控制低氧舱内氧气浓度在5%～21%内循环以给予小鼠CIH刺激,利用多普勒超声评估小鼠左心室结构与功能,免疫组织化学法检测心肌HIF-2α的表达,免疫印迹法检测心肌β3 AR的表达量。结果:与对照组和高脂组相比,高脂+低氧组小鼠左心室内径、左心室后壁厚度均明显增加(均P0.05),LVEF和短轴缩短分数均明显减少(均P0.05);高脂+低氧组小鼠心肌组织中HIF-2α表达上调(P0.05);高脂+低氧组小鼠心肌组织β3 AR数量增加(P0.05)。结论:CIH通过上调心肌组织中HIF-2α和β3 AR的表达,诱导左心室扩张、心功能减低,HIF-2α和β3 AR有望成为预防肥胖合并睡眠呼吸暂停患者发生心力衰竭的重要靶点。     

TGF-β_1中和抗体对TNBS慢性结肠炎动物模型纤维化的影响

目的观察转化生长因子-(transforming growth factor β_1,T G F-β_1)中和抗体对2,4,6-三硝基苯磺酸(trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS)慢性结肠炎动物模型中小鼠肠道纤维化的影响.方法将48只Balb/c小鼠分为正常对照组、TNBS模型组、治疗对照组和TGF-β_1抗体组,TNBS 6 wk灌肠造模,TGF-β_1抗体组于每次TNBS灌肠后24 h给予TGF-β_1抗体灌肠治疗,光镜下观察结肠组织学变化,RT-PCR检测各组小鼠肠道中Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原蛋白及TGF-bmRNA水平,免疫组织化学、Western blot检测各组小鼠结肠中TGF-β_1水平并分析结果 .结果 (1)HE染色和VG胶原蛋白染色发现,TGF-β_1抗体组小鼠未见大量胶原蛋白聚集,固有肌层明显增厚,较TNBS模型组、治疗对照组改善;(2)TGF-β_1抗体组结肠Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ型胶原蛋白及TGF-bmRNA较TNBS模型组及治疗对照组均降低(P0.05);(3)免疫组织化学、Western blot发现TGF-β_1抗体组较TNBS模型组及治疗对照组结肠内TGF-β_1均降低(P0.05).结论 TGF-β_1中和抗体拮抗TGF-β_1,下调小鼠结肠组织中胶原蛋白的表达,抑制TNBS慢性结肠炎动物模型纤维化.     

多不饱和脂肪酸不同构成及配比对ApoE－/－小鼠动脉粥样硬化的影响

目的观察多不饱和脂肪酸不同构成及其配比对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(As)的预防作用,为合理使用脂肪酸预防As提供科学依据。方法设置对照组、模型组、3组实验油组,按饱和脂肪酸(SFA)∶单不饱和脂肪酸(MUFA)∶多不饱和脂肪酸(PUFA)=0.25∶1∶1比例配制3种实验油定制饲料。设计实验油1和油2中ω-6/ω-3 PUFA比例为2.5∶1,实验油3中ω-6/ω-3 PUFA比例为10∶1。其中实验油1中ω-3 PUFA来源为α-亚麻酸(ALA),实验油2及实验油3中ω-3 PUFA来源为二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)和α-亚麻酸(ALA)。记录小鼠体质量变化,主动脉大体油红O染色及主动脉窦HE染色观察主动脉内膜斑块形成情况;肝脏油红O染色观察肝脏脂质蓄积情况;酶法检测肝脏甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)水平;酶法检测血清TG、TC、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平。结果与模型组比较,3组实验油均能减少主动脉As斑块形成(P0.05),降低肝脏TG、TC(P0.05),降低血清TG、TC、 LDLC(P0.05),改善肝脏脂质蓄积。与实验油1组及实验油3组比较,实验油2组更能有效抑制主动脉As斑块形成(P0.05),显著降低肝脏TG、TC(P0.05),降低血清TG、TC、LDLC,升高血清HDLC(P0.05),改善肝脏脂质蓄积。结论减少SFA摄入,增加MUFA和PUFA摄入具有抗动脉粥样硬化的作用,EPA、DHA和ALA共同作为ω-3 PUFA的供体比ALA单独提供ω-3 PUFA抗动脉粥样硬化效果更好,低比例ω-6/ω-3PUFA比高比例ω-6/ω-3PUFA抗动脉粥样硬化效果更好。