急性白血病患者p15与p16基因甲基化检测及mRNA表达水平的定量分析

近年研究发现肿瘤细胞中存在DNA甲基化分布异常。即在肿瘤细胞中同时还存在基因组某些区域，特别是在一些抑癌基因的启动子区域高甲基化现象。抑癌基因启动子及转录起始区高甲基化可能也是导致抑癌基因失活和细胞恶性转化的机制之一。抑癌基因p15(CDK2B)和p16(CDK2A)均位于人类9号染色体短臂(9p21)，编码两种细胞周期依赖性激酶(CDK)抑制性蛋白，参与细胞增殖与分化的调节。为探讨p15与p16在白血病细胞的甲基化状态及与表达水平的关系，我们应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术检测40例初诊急性白血病(AL)患p15和p16甲基化状态，同时用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-QPCR)技术检测p15和p16基因mRNA表达水平。     

肾淋巴管结扎对单肾切除大鼠的肾损害作用

目的： 探讨肾淋巴循环障碍及单侧肾脏切除对大鼠肾脏功能结构的损害。方法： 雄性Wistar大鼠,随机分为3组：双肾淋巴管结扎组（2KL）,左肾淋巴管结扎伴右肾切除组（1KL）,假手术组（sham）。分别在术后1、2、4、8周每组各处死6只。测定24 h尿蛋白和血尿肌酐。用PAS和Masson染色观察肾组织病理改变。用RT-PCR检测TGF-β1、Smad2/3、I型胶原（col I）mRNA的表达量;用免疫组化和Western blotting方法检测组织col I、TGF-β1、Smad2/3和磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）的蛋白表达量及主要表达部位。结果： 2KL和 1KL大鼠出现明显的蛋白尿和肾功能衰竭,1KL大鼠的肾脏损害尤其明显,随着时间推移逐渐加重,并出现明显的组织病理改变。2KL和 1KL大鼠肾组织中col I、TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3的蛋白和（或）基因表达水平也明显增高（P<0.01）,且主要表达在肾小管上皮细胞及肾间质。1KL大鼠的表达也明显高于2KL大鼠。结论： 肾淋巴循环障碍可导致大鼠肾脏功能及小管间质的损害,并随时间而加重。当淋巴循环障碍伴对侧肾切除时,损害明显加重。     

CD3+CD16+CD56+自然杀伤T淋巴细胞与移植肾免疫状态的关系

目的     探讨肾移植患者CD3+CD16+CD56+自然杀伤T细胞(NKT)在外周血中的表达与移植肾免疫状态的关系,以及钙调磷酸酶抑制剂(CNI)不同的血药浓度下NKT细胞的水平。 方法    将92例肾移植患者根据CNI血药浓度水平及有无排斥反应分为3组：正常血药浓度的无排斥组（A组,58例）、低血药浓度的无排斥组（B组,8例）、排斥组(C组,26例),10例正常人群作为对照组(D组),采用流式细胞术检测各组外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD16+CD56+自然杀伤（NK）和CD3+CD16+CD56+NKT细胞及人白细胞抗原（HLA）抗体的水平。结果    A、B、C、D组CD3+CD16+CD56+NKT细胞的百分数分别是（4.29±2.57）%、（4.31±2.08）%、（1.23±1.06）%、（3.98±2.26）%。A、B组与D组比较,NKT细胞百分数、NK细胞百分数及CD4+/CD8+无差异,HLA抗体阳性比率无显著升高;C组NKT细胞的百分数与正常对照组相比降低(P＜0.05),NK细胞、CD4+/CD8+均显著高于D组(P＜0.05),HLA抗体阳性比率显著升高。结论    肾移植后排斥反应时NKT细胞低表达,出现HLA抗体;无排斥反应时NKT细胞表达正常,不受低血药浓度的影响。CD3+CD16+CD56+NKT细胞在抑制移植肾免疫激活中起着重要作用。     

红细胞免疫与肾脏疾病

自1981年Siegel提出红细胞免疫系统新概念以来，红细胞的免疫功能及其在诸多临床疾病中的作用越来越引起广泛关注，其中肾脏疾病与红细胞免疫之间的相互关系尤为密切，近年来国内外文献中已有较多报道。现综述如下。     

结缔组织生长因子与肾脏纤维化的关系

肾脏纤维化是各种慢性肾脏疾病发展为终末期肾病(ESRD)的共同途径。目前尚缺乏有效的治疗手段。结缔组织生长因子(CTGF)是最近发现的即刻早期基因CCN家族成员之一。近期大量的动物及人体实验研究证实，CTGF可能作为转化生长因子β(TGF—β)促纤维化活性的下游信号因子，刺激细胞增殖和细胞外基质(ECM)形成，在肾脏纤维化中具有重要作用。现将CTGF与肾脏纤维化关系的研究进展情况简述如下。     

脂质代谢紊乱对慢性肾衰患者肾功能的影响

高脂血症对肾脏功能影响的报道较少。我们观察了 78例慢性肾衰 (CRF)患者的血脂代谢状态 ,并探讨其与肾功能的关系 ,现将结果报告如下。资料与方法 :78例 CRF患者 (CRF组 )均符合慢性肾功能衰竭的诊断标准 ,其中男 5 6例、女 2 2例 ,平均年龄 4 9.99± 8.0 0岁。均排除糖尿病肾病、原发性高脂血症、代谢综合征及合并严重肝脏疾病、除外行血液透析、腹膜透析或肾移植者。检测前停用降脂药物 3个月 ,选用钙离子拮抗剂或血管紧张素转换酶抑制剂控制血压 ,并给予低蛋白饮食、纠酸、补钙等辅助治疗。对照组为 72例健康体检正常者 ,男 5 2例、…     

重组人红细胞生成素对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖和TGF-βmRNA的影响

目的探讨重组人红细胞生成素(rHuEPO)对高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞(MCs)增殖和表达TGF-βmRNA的影响。方法以大鼠M Cs为研究对象,分为正常对照组(NC组,葡萄糖浓度为5 mmol/L),高糖组(HG组,葡萄糖浓度为10、20、30、40、50 mmol/L),其中30 mmol/L的高糖组分别以不同浓度rHuEPO(1、10、50、100、1 000 U/mL)分别干预24、48、72 h,Cell Counting Kit-8(CCK-8)比色法检测细胞增殖情况。用RealtimePCR法测定干预24、48、72 h时细胞TGF-βmRNA表达水平。结果在30 mmol/L以下时,葡萄糖能明显刺激M Cs的增殖,以30 mmol/L培养72 h反应最佳,rHuEPO在低于100 U/mL时能促进高糖诱导的M Cs增殖。rHuEPO在1 000 U/mL时,细胞毒性明显,大部分细胞死亡。结论高糖在一定时间和浓度内有刺激大鼠M Cs增殖的效应,rHuEPO在一定浓度和时间内能刺激高糖培养的MCs增殖,抑制高糖培养的MCs表达TGF-βmRNA。     

霉酚酸酯对高糖所致大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

霉酚酸酯（MMF）是一种新型的免疫抑制剂。本研究旨在探讨MMF对不同浓度葡萄糖所致的系膜细胞增殖及细胞外基质增多是否有抑制作用。     

氨基胍对糖尿病大鼠肾脏非酶糖基化的抑制作用

目的 研究糖尿病大鼠肾脏高级糖基化终未产物(AGEs)的致病机制，探讨氨基胍对糖尿病大鼠肾脏的干预作用。方法将72只雄性Wistar大鼠随机分为A、B、C、D、E、F六组，用链脲佐菌素制做糖尿病大鼠模型，给予糖尿病大鼠氨基胍治疗24周，分别测定治疗8周、12周、24周时，糖尿病大鼠的血肌酐、血尿素氮、内生肌酐清除率、肾小球AGEs(GTE-AGEs)、肾小球基底膜厚度(GBMT)、肾小球系膜体积和24h尿蛋白定量，与其它各组治疗结果进行比较。结果治疗8周、12周、24周后，测得糖尿病大鼠血肌酐、血尿素氮、肾重／体重比值，肾小球AG-ES(GTE-AGEs)、肾小球基底膜厚度(GBMT)、肾小球系膜体积和24h尿蛋白定量均增高。氨基胍治疗组血肌酐、血尿素氮下降。结论AGEs在糖尿病肾病的发生发展中具有重要作用。氨基胍可通过抑制AGEs在糖尿病大鼠。肾脏的蓄积，降低尿蛋白排泄，抑制系膜增生及其它间接作用，发挥其对糖尿病肾病的防治作用，其抑制AGEs的作用大小与药物持续时间长短有关，与治疗时机无关。     

肾脏的细胞疗法

国外在肾脏血液滤过装置的基础上，又模拟肾脏的代谢、内分泌、免疫功能，成功地设计了肾小管辅助设施(RAD)，主要包括常规的透析膜和容纳有肾近曲小管细胞在内的生物反应器。大量的动物试验证实此装置中这些活细胞具有部分代谢、免疫功能，并且在两种脓毒症动物模型中显示出增高的存活率。目前已完成对人类急性肾衰的临床Ⅰ期实验。