原发性胆汁性肝硬化患者自身抗体检测的临床意义

目的了解抗线粒体M2亚型抗体（AMA-M2）阳性原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者自身抗体的种类和临床意义。方法92例AMA—M2阳性PBC患者，应用间接免疫荧光法，采用肝脏马赛克，包括猴肝和心肌、大鼠肝、胃、肾脏和人类上皮培养细胞（Hep2）为组织基质检测血清中的自身抗体；并用免疫印迹法检测AMA亚型（M2、M4和M9）、可提取的核抗原（ENA）抗体[核糖核蛋白／史密斯抗体（nRNP／Sm）、史密斯抗体（Sm）、干燥综合征抗原A抗体（SS-A）、干燥综合征抗原B抗体（SS-B）、硬皮病70抗体（Scl-70）、Jo-1抗体（Jo-1）、着丝点B蛋白抗体（CENPB）、双链DNA抗体（dsDNA）、组蛋白抗体（histones）和抗核糖核酸P蛋白抗体（rib-Pprotein）]和肝病相关自身抗体。结果92例PBC患者中有73例（79．35％）血清中存在抗核抗体（ANA）；其荧光模式分别为核膜型42例（45．65％），着丝点型18例（19．57％），核浆颗粒16例（17．39％）和核点型12例（13．02％）；ENA检测结果：CENPB阳性18例，SSIA阳性6例，SS-A＋SS-B阳性3例，组蛋白抗体和nRNP／Sm阳性各1例；AMA分型检测中单-AMA-M2阳性62例（67．39％），AMA-M2＋M4阳性26例（28．26％），AMA—M2＋M4＋M9阳性3例；还发现AMA-M2伴M4阳性的患者全部为疾病进展到肝硬化的阶段。结论大多数PBC患者血清中存在ANA，其荧光模式主要为核膜、着丝点、核浆颗粒和核点型；AMA-M2和M4亚型抗体为诊断PBC的重要血清免疫学标志，并且AMA—M4与疾病进程密切相关。     

终末期肝病肾脏损坏的临床与病理关系

目的:探讨终末期肝病患者肾脏损坏的临床与肾脏病理学改变之间的联系.方法:回顾性分析45例在北京地坛医院住院期间死于终末期肝病患者的临床与尸解资料,研究肾脏损坏临床与肾脏病理学改变之间的联系.结果:45例患者均无明确的泌尿系统疾病和高血压、糖尿病等全身性疾病病史,其中30例(66.7%)有肾功能不全表现,几乎所有患者均有不同程度的腹水(44/45,98%),其中合并有腹腔感染的患者发生肾功能不全的风险明显增高(X2=8.332,P=0.004,OR=7.2,95%CI:1.75-29.6),而消化道出血、肝性脑病与肾功能不全的发生无相关性.临床无论是否有肾功能不全表现,绝大多数患者(41/45,91.1%)均有不同程度的肾脏病理学改变,其中表现为肾功能衰竭的有31例(68.9%),慢性肾小球肾炎的有7例(15.6%),化脓性肾炎的有2例(4.4%),无明显病理学改变5例(11.1%).结论:终末期肝病患者发生肾衰竭后,病情危重、进展快,可能同时合并有肾前性及肾性病因及诱因,且病理学多有器质性改变.     

生物安全保护Ⅲ级SARS尸体解剖实验室的建立和使用

目的:在北京地坛医院建立具有生物安全保护Ⅲ级(BSL-3)尸体解剖实验室,进行SARS尸体病理解剖、标本采集和发病机制研究,以确保工作人员的安全、确保周围环境的安全、标本的传送的安全.材料和方法:BSL-3尸体解剖室实行区域隔离,将实验室分为污染区、缓冲区、半污染区和清洁区.通过对送风和排风的严格控制,清洁区为正常大气压区,半污染区为负压区(约-10pa),污染区为更小的负压区(约-30pa).实验室内气流按照气压梯度自清洁区向污染区定向流动,送入实验室内是经高效过滤的新风,排出实验室的空气经过高效过滤器净化处理.缓冲区1位于污染区与半污染区之间,为解剖后工作人员的外防护服的多方位药液消毒、自消毒风淋再消毒区域.缓冲区2位于污染区与太平问之间,也是污染物品外通道.半污染区设有自消毒风淋系统,随时杀灭可能进入半污染区的微量病毒.全部进入污染区的工作人员都穿戴防毒面具和无渗漏防化服.进入半污染区的工作人员必须戴防毒面具,穿隔离服.结果:①将模拟SARS的污染物大量弥散于污染区,在污染区内穿戴防毒面具和无渗漏防化服的工作人员经过缓冲区1的多方位药液消毒、自消毒风淋再消毒后,并进入半污染区和清洁区,在半污染区和清洁区检测不到污染物.②经高效过滤后,实验室内排出周围环境的空气洁净度为7级(≥0.5μm的尘粒数为＞35200粒/m3,≤352000粒/m3;≥3μm的尘粒数为＞300粒/m3,≤3000粒/m3).③在SARS肆虐期间,共完成了15例临床疑似SARS和SARS死亡病例的病理解剖工作,其中7例为病理确定诊断的SARS死亡病例.参加SARS死亡病例的病理解剖的工作人员共23人,2003年5月到7月连续工作2个月余,无1人发生交叉感染.结论:规范化的BSL-3尸体解剖实验室的建立和管理,可以在确保工作人员的安全、确保周围环境的安全、确保标本的传送的安全的前提下,对SARS死亡病例的尸体的系统、全面的病理学检查、标本采集,将为SARS的病原学、发病机制,病理学,诊断、治疗和预防研究提供保障.     

原位PCR方法检测国人艾滋病肾组织HIV DNA

目的：探讨HIV与艾滋病肾脏的关系。方法：应用原位PCR方法检测9例国人艾滋病尸体解剖肾组织标本。结果：9例标本HIV均阳性，棕黄色阳性物位于肾小管上皮细胞胞核和胞浆。结论：肾脏可被HIV直接感染。     

整合素α6β4和实验性变态反应性神经炎

目的 :研究整合素α6和 β4在实验性变态反应性神经炎 (experimentalallergicneuritis,EAN)中的表达变化 ,探讨其表达变化与病变过程中髓鞘损伤和修复的关系。方法 :建立Lewis大鼠EAN动物模型 ,分别在急性期和恢复期的模型鼠坐骨神经 ,用免疫组化的方法观察α6、β4及层黏连蛋白的蛋白表达状况 ;用原位杂交的方法检测α6 β4的mRNA的表达状况。 结果 :免疫组化结果表明 ,β4在急性期表达减少 (P <0 .0 5 ) ,恢复期表达无明显变化(P =0 6 84 0 )。α6和层黏连蛋白在病变急性期和恢复期与对照组比较变化均不明显 (α6P =0 .0 75 1 ,层黏连蛋白P=0 .2 0 4 7) ,原位杂交也得出相似结论 (急性期 β4P <0 .0 5 ,恢复期β4P =0 .82 3;α6P =0 .81 )。 结论 :炎症损伤影响了施万细胞 (Schwanncell,SC)整合素的表达 ,其表达模式与周围神经的胚胎发育过程中α6 ,β1及β4的表达变化相似 ,推测 β4与髓鞘再形成的关系更加密切。α6和 β4表达变化与髓鞘的损伤和修复过程密切相关。     

肝组织固有荧光分布特征研究

研究旨在观察:在不同波长激发光激发下,肝组织固有荧光分布特征;在不同波长紫外光激发下,纤维化程度不同的患者血清紫外吸收光谱的差异。明确肝组织固有荧光分布特征、血清光谱特征与肝纤维化程度之间的关系。 一、资料与方法     

严重急性呼吸综合征冠状病毒在肺组织内各种类型细胞中的表达

目的:了解肺组织内被严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome -associated coronavirus, SARS-CoV)感染的靶细胞类型, 并对SARS诱发的肺损伤发病机制进行探讨.方法: 运用SARS-CoV基因组序列合成的地高辛标记cDNA探针,对北京市7例及安徽省1例确诊的SARS死亡病例的肺组织进行原位杂交检测,在原位杂交基础上,进一步运用免疫组织化学方法显示SARS-CoV感染的靶细胞类型,如Cytokeratin(CK)标记上皮细胞,CD34标记血管内皮细胞,CD68标记巨噬细胞,Vimentin标记纤维母细胞, CD3标记全T细胞. 结果:原位杂交检测显示,8例患者肺组织中都表达SARS-CoV RNA,阳性信号位于靶细胞胞浆内,呈紫蓝色(NBT-BCIP).原位杂交和免疫组化结果显示:支气管上皮细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞、纤维母细胞及T淋巴细胞在所有SARS病例中都受到了病毒感染.原位杂交阳性(紫蓝色,NBT-BCIP)和免疫组化阳性(红棕色,AEC)信号同时表达于靶细胞胞浆中而呈紫红色.结论:通过对SARS患者肺组织原位杂交和免疫组织化学双重标记研究表明,肺组织内支气管上皮细胞、Ⅱ型肺泡上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞及纤维母细胞等多种细胞成分广泛受到了SARS-CoV攻击,肺组织内多种细胞成分弥漫性受损以及所释放的炎性介质在肺损伤的发病过程中起着重要作用.     

SARS患者免疫系统病理改变的研究

目的探讨SARS患者免疫系统的病理改变,确认异型增生细胞的来源.方法采用常规组织病理、免疫组织化学和原位杂交的方法对两例SARS患者的尸检组织淋巴结,脾脏和小肠阑尾的淋巴组织进行研究.结果淋巴结,脾脏结构破坏,淋巴细胞明显减少,淋巴小结结构消失.小血管增生明显.脾脏白髓萎缩,淋巴细胞减少,红髓明显扩张充血.结外淋巴组织萎缩.所有的淋巴组织中见到异型增生的淋巴细胞,此种细胞免疫表型以T细胞为主,且呈现PCNA阳性.结论SARS患者的免疫系统受到了明显的损害,全部免疫细胞减少,以T细胞为主.在淋巴组织中出现的异型增生的细胞,其病理意义有待于进一步探讨.     

肝组织内乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的免疫组织化学研究——Ⅰ.双桥PAP法检测HBsAg的探讨

一、改进PAP可溶性复合物的制备方法。采用小量多次注射HRP等方法,增强免疫反应。效果尚满意。 二、改进双桥PAP法的操作流程。采用高度稀释抗血清和延长反应时间,可使背景色浅而阳性物色深清晰。 三、通过对100例各种类型病毒性肝炎HBsAg的检测,证明双桥PAP法似为检测细胞膜HBsAg的较佳方法。