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1.
2.
目的:探讨Smoothened(Smo)基因在小鼠胚胎颌面部正常发育中的表达。方法: 应用免疫组织化学ABC法和图像分析系统研究Smo基因在小鼠胚胎11.5、13.5及17.5d颌面部的表达情况。结果:Smo基因在胚胎11.5、13.5及17.5d的颌面上下颌突均有表达,且较对照组有显著性差异(P<0.05),但在上下颌突之间表达没有显著性差异,在上皮和结缔组织之间表达基本无差异。结论: Smo基因在小鼠胚胎颌面部正常发育有明显表达,提示Smo基因可能参与颌面部生长发育。 相似文献
3.
目的从人组织cDNA文库克隆胆管癌相关基因FXYD6并进行功能区定位分析。方法利用人胎肝、脑及脾cDNA文库,通过Goldkey软件进行引物设计,从组织cDNA文库获得FXYD6全长和转录编码区序列,对其进行克隆与纯化;对FXYD6基因重组克隆进行测序鉴定;并应用GenBank核酸数据库及Goldkey软件对其功能区进行定位分析。结果在胎肝和脑cDNA文库中,扩增出FXYD6特异条带,但在脾cDNA文库未见扩增产物。将PCR扩增产物与pGEM-T载体连接,进行转化后确认回收组、阳性对照组均可见单菌落生长。选取阳性克隆进行菌落收获和质粒提取,并行测序分析,该序列包含已测序FXYD6基因大片段和可能的编码区序列。通过序列分析,得到最可能编码区序列为+1相位编码区序列,进一步分析得到该基因产物作为膜蛋白的可能功能区分布。结论 FXYD6基因克隆、纯化及功能区定位的成功为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 相似文献
4.
5.
目的明确小鼠Cpne5基因在mRNA水平的组织表达分布及其在胚胎的表达定位。方法提取新生、成年小鼠主要脏器的总RNA,利用RT-PCR法检测Cpne5 mRNA的表达量;合成针对Cpne5 mRNA的杂交探针,取不同胎龄胎鼠进行整体原位杂交。结果 Cpne5 mRNA在成年小鼠10种脏器组织均有不同程度的表达,以大脑,小脑,睾丸和肺脏表达量较高;而肝脏和肌肉未表达。新生小鼠9种脏器中,Cpne5表达量最高的是脑组织,眼和肾次之,肺和肝脏表达量很少。制备并评估Cpne5原杂探针的产量,SP6转录的反义探针浓度为100ng/μL,T7转录的正义探针浓度为10ng/μL,原位杂交结果显示Cpne5 mRNA主要表达于胎鼠的端脑、间脑、中脑及菱脑原节。结论在新生和成年小鼠的脑组织中Cpne5基因mRNA高水平表达,并在胎鼠发育过程中定位于胎脑。 相似文献
6.
目的探讨Cpne5蛋白在SH-SY5Y细胞凋亡中表达量的变化。方法显微镜观察细胞形态及流式细胞术检测凋亡率,鉴定A23187诱导SH-SY5Y细胞凋亡及血清剥夺诱导凋亡的模型;免疫印迹法检测两种凋亡过程中Cpne5蛋白表达量的变化。结果 10μmol/L A23187诱导SH-SY5Y细胞24h,细胞出现皱缩、凋亡率增加。A23187诱导0.5h,Cpne5蛋白表达量即出现明显的上升,持续至12h;在24h时Cpne5蛋白表达量回落至诱导前水平。血清剥夺72h的SH-SY5Y细胞24份,凋亡率为23.2±2.1%,与对照组1.1±0.1%比,差异有统计学意义(P〈0.01)。免疫印迹结果表明,SH-SY5Y细胞分别经血清剥夺1h、6h、12h、24h、72h对Cpne5蛋白表达量无明显变化。结论 A23187诱导SH-SY5Y细胞凋亡早期Cpne5蛋白表达量有显著变化;提示Cpne5基因可能参与凋亡调控的钙信号通路。 相似文献
7.
小鼠胚胎整体原位杂交实用技术的建立 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 优化小鼠胚胎整体原位杂交及数据分析方法。方法 小鼠胚胎用4%多聚甲醛4%固定过夜,10mg/L蛋白酶K(PK)室温消化30min,预杂交2h后,加入探针63℃反应16~18h,用盐溶液高温洗涤多次,RNA酶37℃消化1h,封闭4h后加入地高辛抗体4℃过夜。抗体反应后反复洗涤并在水平摇床上振摇,NBT和BCIP显色系统避光显色。提取图像灰度值,扣除背景、对照等假阳性信号。结果 KIAA1708探针在脑、脊髓等8个区域有杂交信号,对图像数据分析结果表明,只有1个区域的信号在95%可信限范围内,为阳性信号。结论 通过控制蛋白酶K消化时间、探针和地高辛抗体浓度,以及洗涤、显色过程,得到了低本底、着色清晰的杂交结果,结合图像的数据分析步骤,消除假阳性结果。建立了一套实用的小鼠胚胎整体原位杂交方法。 相似文献
8.
表皮生长因子受体在肿瘤发生和转移中的作用 总被引:11,自引:0,他引:11
范文红 《国外医学(肿瘤学分册)》1997,24(1):9-11
表皮生长因子受体(EGFR)存在于除造血系统外的几乎所有组织中,是单链跨糖蛋白,由胞外区,跨膜区和胞内区组成。具有酪氨酸蛋白的激酶活性,且EGF及其它配基结合后,传递信号至细胞核内,调节基因的表达,而且EGFR与细胞转化有密切关系,在多种癌前病变和肿瘤中都有EGF受体的表达,本文其结构,信号转导及其在肿瘤发生和转移中的作用作一概述。 相似文献
9.
应用核酸杂交技术(dot-blot)分析了癌基因。-myc、 N-ras和抑癌基因 p53在骨髓增生异常综合征(MDS)和急非淋白血病(ANLL)中的扩增情况。结果发现,有 3 例(33%)的 MDS存在 p53抑癌基因的 2倍扩增,本实验中 p53抑癌基因的扩增发生在 MDS的较晚期阶段; 1例 ANLL中存在癌基因 c-myc和抑癌基因 p53的共扩增,且发现扩增与 MDS的分型及 ANLL的临床病情有一定的相关性。 相似文献
10.
<正> 1985年6月至1995年9月笔者采用冬病夏治——穴位贴敷中药的方法(以下简称贴敷)治疗慢性支气管炎518例,疗效显著。该方法简便,经济,无痛苦,无副作用,患者乐意接受,值得临床推广,现报告如下: 相似文献