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目的用纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)ClpP1重组蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价,间接ELISA法分析重组蛋白的抗原性,以初步评价其应用价值。方法通过SDS-PAGE确定ClpP1重组蛋白的主要表达形式,利用纯化包涵体方式对重组蛋白进行纯化;将纯化蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价;再分别以纯化蛋白为抗原,制备抗体为一抗,间接ELISA法检测临床诊断结核病患者血清中抗M.tb抗体和M.tb抗原。结果 SDSPAGE显示ClpP1重组蛋白主要以包涵体表达形式存在,将纯化蛋白免疫新西兰白兔4次,取血测抗体效价为1∶64 000;Western blot结果显示制备抗体可较好的与ClpP1蛋白特异性结合;间接ELISA法结果表明,以重组蛋白为抗原测患者血清中抗M.tb抗体和以制备抗体为一抗测血清中的M.tb抗原的2实验组分别与对照组相比均具有显著性差异。结论制备了具有免疫原性的M.tb ClpP1重组蛋白及效价较高的多克隆抗体,并得出ClpP1多克隆抗体具有较好的免疫反应性,为进一步研究ClpP1重组蛋白的特性及其应用奠定了基础。 相似文献
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目的:通过毕赤酵母(Pichia pastoris)表达制备重组人凝血酶原2(prothrombin-2),并利用锯鳞蝰(Echis carinatus)凝血酶原激活剂ecarin将其活化为凝血酶,分析凝血酶的活性。方法根据GenBank公布的人凝血酶原2和ecarin的cDNA序列,设计并优化合成凝血酶原2和ecarin基因。将凝血酶原2基因构建至表达载体pPICZαA中,转化并筛选重组凝血酶原2的糖基工程酵母菌,诱导工程酵母分泌表达凝血酶原2,培养上清中的目的蛋白经两步阳离子层析纯化制备,并利用酶切N-糖链和肽指纹图谱分析鉴定目的蛋白。将ecarin基因构建到表达载体pcDNA3.1(+),瞬转HEK 293T细胞,收集培养上清。将HEK 293T工程细胞培养上清与纯化的凝血酶原2反应,利用凝血酶发色底物S-2238,测反应产物的酶促活性;利用血浆纤维蛋白原测反应产物的血凝时间、分析血凝活性。结果酵母表达凝血酶原2的培养上清经纯化获得37×103的目的蛋白,去除N-糖链的蛋白相对分子质量降为35×103,与凝血酶原2理论分子量一致。经肽指纹图谱鉴定,纯化得到的蛋白为凝血酶原2。制备的凝血酶原2经HEK 293T细胞表达ecarin的培养上清处理后,可催化S-2238解离产生黄色的对硝基苯胺(pNA),且pNA产生的光密度值随着处理的凝血酶原2的增加而升高;经ecarin处理的凝血酶原2能促进血浆凝结,与凝血酶试剂的血凝时间接近,且血凝时间随着处理的凝血酶原2的量减少而延长。结论利用毕赤酵母制备了重组人凝血酶原2,被ecarin活化为具有活性的凝血酶,有望替代从血浆中提取的凝血酶原,用于战伤救治和临床研究。 相似文献
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目的了解成都市未婚非医学类女大学生避孕现状,为改进女大学生生殖健康状态、普及安全避孕提供科学依据。方法采用横断面调查的方法对成都市2225名非医学类未婚女大学生进行问卷调查,并对结果进行统计分析。结果在避孕知识认知情况方面,能够认知科学避孕方式的占比33.0%,高年级或重点高校大学生认知率高于低年级或普通高校大学生,差异有统计学意义(P<0.05)。婚前性行为的认知及避孕相关态度和行为方面,高年级学生对于主动了解避孕知识的兴趣、婚前性行为接受度、性行为发生率及意外怀孕率都显著高于低年级学生,普通高校的性行为发生率显著高于重点高校,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成都市女大学生安全避孕及生殖健康状态不太乐观,学校、家庭及社会应该加强对大学生避孕知识的教育,普及生殖及避孕知识,降低意外怀孕率。 相似文献
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目的 分析结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)检测恶性肿瘤并发结核病患者的应用价值。方法 选取西安市胸科医院2016年1—12月期间收治确诊的恶性肿瘤并发结核病的患者102例、恶性肿瘤患者64例、单纯结核病患者80例。抽取研究对象外周血并分离出外周血单个核细胞(PBMC),分析T-SPOT.TB检测不同人群的结果。同时分析T-SPOT.TB检测恶性肿瘤并发结核病患者的敏感度和特异度,及其与抗酸染色和(或)病理检查结果的一致性。结果 T-SPOT.TB检测恶性肿瘤并发结核病组阳性率为85.29%(87/102),检测恶性肿瘤组的阳性率为26.56%(17/64),差异有统计学意义(χ 2=57.97,P<0.01);检测单纯结核病组的阳性率为91.25%(73/80),与恶性肿瘤并发结核病组比较,差异无统计学意义(χ 2=1.50,P=0.221);进一步比较A、B抗原反应点数,恶性肿瘤并发结核病组与单纯结核病组患者A抗原阳性斑点数的中位数(四分位数:Q1,Q3)分别为56.50(30.25,83.25)个和45.50(32.00,75.00)个;B抗原阳性斑点数的中位数(四分位数:Q1,Q3)分别为63.50(43.25,98.00)个和55.00(24.00,101.50)个,两组比较差异均未见统计学意义(Z值分别为-0.66和-0.30,P值分别为 0.539和0.796)。T-SPOT.TB 检测恶性肿瘤并发结核病患者的敏感度和特异度分别为85.29%(87/102)和73.44%(47/64);与抗酸染色和(或)病理检查比较,T-SPOT.TB检测的Kappa值为0.61。 结论 T-SPOT.TB检测对恶性肿瘤并发结核病患者有较好的检测效能,可用于辅助诊断。 相似文献
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目的 研究TIA患者DWI阳性病灶的意义,对发病后首次DWI检查阳性的TIA患者复查MRI或CT,比较病灶恢复与未恢复患者DWI阳性病灶的表观弥散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)、相对表观弥散系数(relative apparent diffusion coefficient,rADC),作为鉴别TIA和脑梗死的依据.方法 选择2009年8月到2011年6月包头市中心医院神经内科住院的TIA患者57例,发病24h内行MRI检查,根据检查结果将患者分为DWI阳性组和DWI阴性组;对于DWI阳性患者,7d内复查MRI或CT,将其分为TIA组和脑梗死组,分别比较两组的发病特点及DWI表现,并测量ADC值、rADC值,分析其意义.结果 TIA组ADC值(630.4 ±25.9)×10-3 mm2/s,脑梗死组ADC值(495.2±60.O)×10-3 mm2/s(t=6.669,P=0.000),TIA组rADC值82.1%±5.6%,脑梗死组rADC值62.6%±7.4%(t=7.013,P=0.000),两组间比较差异有统计学意义.结论 TIA组患者DWI病灶ADC值适度下降,而脑梗死组ADC值明显下降,发病早期可以通过比较ADC、rADC值鉴别TIA和脑梗死. 相似文献
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目的评价以中医为主的综合健康管理模式在干预原发性高血压的应用效果。方法将120例原发性高血压患者随机分为对照组和观察组各60例,对照组予降压药治疗及常规健康管理,观察组在对照组基础上进行中医综合干预,干预前后分别用健康促进生活方式量表(HPLP)、中医症状分级量化积分表和世界卫生组织生活质量评定表(WHO-QOL)进行测评,比较两组患者在健康生活方式、血压控制、临床症状、生活质量方面的变化情况。结果两组患者血压、HPLP评分、中医症状分级量化积分和WHO-QOL总分与干预前比较,差异有统计学意义(P0.05);且干预后观察组与对照组比较,亦均存在显著性差异(P0.05)。结论基于中医特色的综合健康管理模式可显著提高患者对高血压防治的主动性和依从性,有助于血压的长期管控,在辅助降压、减轻高血压患者的临床症状以及提高生活质量方面更具优势。 相似文献
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目的:观察补肾益气通络化浊方治疗糖尿病肾病早期的临床疗效。方法:将糖尿病肾病早期患者120例,随机分为对照组和治疗组各60例。对照组予常规西医疗法治疗,治疗组在对照组基础上予补肾益气通络化浊方治疗,2组均治疗1年。比较2组临床疗效、治疗前后中医证候积分、空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、尿白蛋白排泄率(UAER)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1β、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)及终点事件发生率。结果:治疗后,总有效率对照组为65.0%,治疗组为90.0%,2组比较,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,2组FBG、TC、TG、LDL-C、24h尿蛋白定量、尿微量白蛋白、BUN、SCr、UAER、IL-6、IL-1β、hs-CRP水平均较治疗前降低(P0.05),治疗组上述指标较对照组降低更明显(P0.05);2组HDL-C水平均较治疗前升高(P0.05),治疗组HDL-C水平较对照组升高更明显(P0.05)。治疗后,终点事件发生率对照组为63.3%,治疗组为18.3%,2组比较,差异有统计学意义(P0.05)结论:补肾益气通络化浊方治疗糖尿病肾病早期,能降低血糖和血脂水平,减少蛋白尿,改善肾功能,延缓疾病进展。 相似文献