结核分枝杆菌ClpP1重组蛋白的特性探讨及初步应用

目的用纯化结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)ClpP1重组蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价,间接ELISA法分析重组蛋白的抗原性,以初步评价其应用价值。方法通过SDS-PAGE确定ClpP1重组蛋白的主要表达形式,利用纯化包涵体方式对重组蛋白进行纯化;将纯化蛋白免疫新西兰白兔制备ClpP1多克隆抗体并检测其效价;再分别以纯化蛋白为抗原,制备抗体为一抗,间接ELISA法检测临床诊断结核病患者血清中抗M.tb抗体和M.tb抗原。结果 SDSPAGE显示ClpP1重组蛋白主要以包涵体表达形式存在,将纯化蛋白免疫新西兰白兔4次,取血测抗体效价为1∶64 000;Western blot结果显示制备抗体可较好的与ClpP1蛋白特异性结合;间接ELISA法结果表明,以重组蛋白为抗原测患者血清中抗M.tb抗体和以制备抗体为一抗测血清中的M.tb抗原的2实验组分别与对照组相比均具有显著性差异。结论制备了具有免疫原性的M.tb ClpP1重组蛋白及效价较高的多克隆抗体,并得出ClpP1多克隆抗体具有较好的免疫反应性,为进一步研究ClpP1重组蛋白的特性及其应用奠定了基础。     

ClpP粘膜免疫预防小鼠发生肺炎链球菌性肺炎和败血症

目的:肺炎链球菌毒力蛋白ClpP鼻腔粘膜免疫BALB/c小鼠,探讨其作为肺炎链球菌候选蛋白疫苗的价值.方法:利用制备的ClpP多克隆抗体,分析ClpP 在肺炎链球菌表面表达情况;ClpP蛋白粘膜免疫小鼠,TIGR4型肺炎链球菌分别经腹腔和鼻腔攻击,分析肺炎链球菌小鼠肺内定植情况并监测小鼠生存时间.结果:流式细胞技术证实了TIGR4肺炎链球菌表面表达ClpP毒力蛋白,粘膜免疫ClpP可以特异产生系统性和粘膜性的ClpP抗体,并可减少TIGR4肺炎链球菌在小鼠肺内的定植,延长小鼠生存时间.结论:ClpP粘膜免疫可预防小鼠发生肺炎链球菌性肺炎和败血症,进一步证实ClpP蛋白可作为肺炎链球菌的候选蛋白疫苗.     

健康中老年人血尿酸与血脂关系的研究

目的 :探讨中老年健康体检人群中血尿酸与血脂各成份之间的关系。方法 :分别测定肾功能与血脂各成份等生化指标 ,用统计学方法分析它们之间的关系。结果 :血尿酸与总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、载脂蛋白B(apoB)之间存在显著的正相关 ,而与高密度脂蛋白胆固醇 (HDL C)、载脂蛋白A1(apoA1)存在显著的负相关 ;高低血尿酸两组间的TC ,TG ,HDL C ,apoA1,apoB之间存在显著性差异 ,两组的血脂异常率分别为 33.5 %和 6 5 .1% ,存在显著性差异 ;高低TC两组间的血尿酸均值分别为 0 .392和 0 .35 6mmol/L ,血尿酸异常率分别为 36 .1%和 2 4 .3% ;高低TG两组的血尿酸均值分别为 0 .4 1和 0 .34mmol/L ,血尿酸异常率分别为 4 5 .8%和 16 .1% ,均存在显著性差异。结论 :在中老年人群中 ,血尿酸和血脂之间存在一定的关联 ,血尿酸和疾病之间的关系有待于进一步研究。     

聚焦超声对卡介苗急性损伤效应的实验研究

目的 观察不同剂量聚焦超声对卡介苗的急性损伤效应.方法 将卡介苗菌落用生理盐水制备成悬液,分3组,每组5支试管各装3 ml悬液,分别用696 W/cm2、398 W/cm2、0W/cm2的超声辐照.超声辐照后即刻测量悬液的温度,并将悬液进行抗酸染色及透射电镜观察.结果 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组经超声辐照后悬液的温度分别为(72.17±9.94)℃、(52.5±10.37)℃和22℃.抗酸染色后光镜下见Ⅰ组卡介苗大部分碎裂成短棒状、散在分布.Ⅱ组少部分碎裂成短棒状、有少量聚集;Ⅲ组较大的细菌聚集成团块.透射电镜下见Ⅰ组卡介苗呈不可逆死亡;Ⅱ组包膜较为完整、细胞质部分凝结成块;Ⅲ组未见异常.结论 聚焦超声可致卡介苗不可逆损伤,其损伤程度与超声辐照的剂量有关.     

长、短效抗胆碱能药物对轻中度稳定期COPD患者的疗效比较

目的:比较异丙托溴铵气雾剂、噻托溴铵干粉剂治疗轻、中度稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的疗效。方法:采用随机、单盲、平行对照试验设计,将42例稳定期COPD患者,随机分为噻托溴铵组(每次18μg,qd,吸入)和异丙托溴铵组(每次40μg,qid,吸入),2组疗程均为12周。结果:治疗6周末,2组间肺功能比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗12周末,噻托溴铵组第1秒用力肺活量(FEV1)、吸气峰流速(PEF)明显改善,与异丙托溴铵组比较,差异有统计学意义(P<0.05);噻托溴铵组症状评分、机体状况评分及精神状态评分均较异丙托溴铵组显著下降(P<0.05)。结论:噻托溴铵较异丙托溴铵更能改善轻、中度稳定期COPD患者的肺功能,并提高患者的生活质量。     

超声对绵羊红细胞渗透脆性实验的影响

绵羊红细胞受不同剂量超声辐照，根据剂量一效应曲线求出不致细胞急性损伤之超卢剂量．观察受此种剂量辐照之红细胞与对照组红细胞渗透脆性实验差异。结果发现：25．6W／cm2×1I2和32·4W／cm2×5s为不致红细胞破坏之最大剂量，经此二种刺量处理之红细胞渗透脆性增加（P／0．01），25．6W／cm2×10s组细胞膜脆件增加大于32．4W／cm2×5s组（P＜O．005）。提示亚致死置超卢辐照可致细胞膜通透性增加。     

496例糖耐量减退患者血糖与血脂水平的变化

目的:了解糖耐量减退(IGT)患者血糖与血脂水平的变化.方法:按照1997年美国糖尿病学会(ADA)建议的新标准筛选IGT患者496例(即IGT组),糖耐量正常人群1514例(即对照组),并对两者的空腹血浆葡萄糖(FBG)、血清总胆固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及TC/HDL-C进行测定和比较分析.结果:IGT患者组的FBG、TG、TC/HDL-C显著高于对照组(P＜0.01),TC、LDL-C也明显高于对照组(P＜0.05),而HDL-C明显低于对照组(P＜0.01).结论:测定和分析结果表明IGT患者的血糖水平和血脂水平较对照组有明显变化.     

OGTT在FBG正常时诊断IGT和DM的作用

目的:探讨空腹血糖(FBG)正常时糖尿病(DM)和糖耐量减低(IGT)的发生规律.方法:研究对象为排除了已确诊的糖尿病、急性疾病、外伤手术、急、慢性肝病、妊娠妇女及其它患有影响糖代谢疾病患者的健康体检者.根据其OGTT试验服糖后2h血糖(2hPG)结果,将研究对象分为三组:DM组、IGT组、正常组.结果:在FBG正常(4.0～6.0mmol/L)时,有91例DM,占DM组(292例)的31.2%,占FBG正常例数(3071例)的2.96%;有466例IGT,占IGT组(514例)的90.7%,,占FBG正常例数的15.2%.结论:高血压、超重、年龄大于40的患者即使FBG≤6.0mmol/L,也应以餐后2h血糖(2bPG)或OGTT试验来筛选是否患有糖尿病或糖耐量减低.     

肺结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞增多并抑制抗结核免疫

目的 研究肺结核患者外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞是否增多,这些调节T细胞是否抑制结核的特异细胞免疫反应.方法 使用细胞分离、流式细胞分析及细胞增殖及增殖抑制等实验方法,对20例肺结核患者及17例健康人群外周血中CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞的数量及免疫学特征作研究.结果 肺结核患者外周血中CD4+CD25+ FoxP3+调节T细胞数占CD4+细胞总数的比例显著高于健康人群(P＜0.01).在体外,肺结核患者外周血单个核细胞在BCG及ESAT-6的刺激下增殖能力比健康对照人群明显增强(P＜0.01),产生的γ-干扰素比健康人群也明显增强(P＜0.05);清除调节T细胞后的肺结核患者外周血单个核细胞对BCG刺激下产生γ-干扰素及白介素-10比没有清除时显著增强(P＜0.05);从肺结核患者外周血分离CD4+ CD25+调节T细胞和CD4+ CD25 -细胞,CD4+ CD25 -细胞对BCG及ESAT-6刺激产生γ-干扰素和白介素-10的能力因CD4+ CD25+调节T细胞加入后而显著减弱(P＜0.05).结论 肺结核患者CD4+ CD25+ FoxP3+调节T细胞增多,通过抑制结核患者细胞免疫反应,参与肺结核的发病.