VEGF反义寡核苷酸对胆囊癌细胞VEGF,Flt-1及KDRmRNA表达和VEGF蛋白分泌的影响

目的:体外研究Oligofectamine介导的VEGF反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)转染对人胆囊癌GBC-SD细胞VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达和VEGF蛋白分泌的影响.方法:运用Oligofectamine介导的VEGF反义寡核苷酸(ASODN)和错义寡核苷酸(Scrambled Oligodeoxynucleotide,SODN)转染人胆囊癌细胞GBC-SD,半定量RT-PCR检测转染后各组细胞不同时间的VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达变化,ELISA测定转染后各组细胞培养上清液VEGF蛋白浓度.结果:半定量RT-PCR发现ASODN组及ASODN Oligofectamine组24,48,72,96 h VEGF(ASODN组VEGF165:0.686±0.033,0.569±0.049,0.489±0.036,0.716±0.017;ASODN组VEGF121:0.462±0.046,0.338±0.034,0.219±0.022,0.471±0.038;ASODN Oligofectamine组VEGF165:0.601±0.021,0.465±0.042,0.416±0.023,0.662±0.035:ASODN Oligofectamine组VEGF121:0.408±0.014,0.286±0.019,0.157±0.021,0.418±0.037)、Flt-1(ASODN组:0.694±0.019,0.562±0.045,0.435±0.042,0.724±0.026;ASODN Oligofectamine组:0.609±0.018,0.442±0.049,0.314±0.015,0.614±0.029)及KDR(ASODN组:0.667±0.063,0.490±0.033,0.301±0.029,0.665±0.068;ASODN Oligofectamine组:0.523±0.048,0.432±0.027,0.218±0.036,0.524±0.037) mRNA的表达显著低于Control组(P<0.05),且ASODN Oligofectamine的抑制作用比ASODN强(P>0.05).ELISA测定结果显示ASODN组(281.26±18.62,526.44±34.95,791.13±20.99)及ASODN Oligofectamine组(250.7±14.57,506.09±19.14,711.79±19.91)24,48,72 h VEGF蛋白的分泌浓度均显著低于Control组(394.23±16.26,711.6±26.21,933.85±28.65)(P<0.05),且ASODN Oligofectamine的抑制作用比ASODN强(P>0.05).结论:Oligofectamine介导的VEGF ASODN能抑制GBC-SD细胞VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达和VEGF蛋白分泌.     

Survivin基因在哈萨克族食管癌中表达的研究

目的 通过观察凋亡相关基因Survivin在哈萨克族食管癌癌组织及其癌旁组织中的表达来探讨Survivin哈萨克族食管癌发生中的作用.方法采用RT-PCR方法检测Survivin 基因mRNA在20例哈萨克族食管癌组织及其癌旁组织标本中的表达,选取mRNA水平差异组织标本采用Western-bolt方法检测其在蛋白水平的表达情况.结果 Survivin基因mRNA在20例癌组织中有10例表达,阳性率为50%,癌旁组织中仅有4例表达,癌组织与其对应的癌旁组织相比,Survivin基因的表达量均明显高于癌旁组织.Survivin蛋白的表达在癌组织与癌旁组织中无明显差异.结论提示Survivin基因的异常表达主要在转录水平,其对哈萨克族食管癌发生发展过程中的作用有待于进一步研究.     

基质金属蛋白酶-7在哈萨克族食管癌中的表达及其意义

目的 观察哈萨克族食管癌及癌旁组织中基质金属蛋白酶-7的表达,探讨其在哈萨克族食管癌发生、发展,浸润转移中的作用.方法 采用RT-PCR方法检测MMP-7 基因mRNA在20例哈萨克族食管癌组织及其癌旁组织标本中的表达,选取mRNA水平差异组织标本采用Western-bolt方法检测其在蛋白水平的表达情况.结果 20例癌组织中有11例表达阳性,占55%,20例癌旁组织中有8例表达,占40%,其中癌组织表达量明显高于癌旁组织的有8例,占40%;MMP-7蛋白在癌组织中表达高于其相应癌旁组织.结论 MMP-7在哈萨克族食管癌的发生发展中起到一定的作用.     

VEGF-C及其受体Flt-4在肺鳞状细胞癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的 探讨VEGF-C及其受体Flt-4在肺鳞状细胞癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测89例肺鳞状细胞癌原发灶组织、癌旁组织中VEGF-C、Flt-4的表达,并分析其与临床病理特征的关系.结果 (1)VEGF-C和Flt-4在癌组织中和转移的淋巴结转移组中高表达(P<0.05);(2)在...     

新疆哈萨克族食管癌中Survivin的表达及其与Caspase-9和Caspase-3基因的相关性

目的 探讨新疆哈萨克族食管癌中Survivin基因表达及其与半胱氨酸蛋白Caspase-9、Caspase-3基因的关系.方法 首先从52例哈萨克族食管癌标本中筛选出34例Survivin mRNA差异表达的标本(癌组织中的表达量高于远端无癌组织),采用RT-PCR、Western blotting方法检测半胱氨酸蛋白Caspase-9、Caspase-3 mRNA和蛋白的表达.结果 1.Survivin在新疆哈萨克族食管癌组织高表达,差异具有统计学意义(P＜0.05);2.在Survivin差异表达的34例标本中,61.8％的肿瘤组织半胱氨酸蛋白Caspase-9低表达,并且Survivin mRNA与Caspase-9 mRNA的表达呈负相关(r=-0.244,P＜0.05);3.哈萨克族食管癌组织中,Caspase-9的蛋白活化降低(P＜0.05).结论 Survivin表达上调在新疆哈萨克族食管癌的发生、发展过程中发挥重要作用,Survivin可能通过直接抑制Caspase-9的转录以及抑制其活化水平发挥调控细胞凋亡的作用.     

哈萨克族食管癌患者中Lrig1通过MEK-ERK信号通路调控NF-κB及MMP-2表达

  目的  探讨Lrig1、NF-κB及MMP-2在哈萨克族食管癌患者中的表达与PI3K-AKT、MEK-ERK信号通路及与临床病理指标之间的关系。  方法  采用RT-PCR方法检测48例哈萨克族食管癌患者组织中Lrig1、NF-κB、MMP-2表达, 探讨NF-κB、MMP-2的表达与Lrig1的关系。纳入PI3K及MEK信号通路的关键基因PI3K、AKT1、MEK1、MEK2、MEK5、ERK1、ERK2, 研究Lrig1调控NF-κB、MMP-2基因表达的通路。  结果  转录水平mRNA检测显示在肿瘤组织及远端正常组织中NF-κB（P < 0.001, P= 0.014）、MMP-2（P=0.003, P=0.045）的表达与Lrig1 mRNA表达相关; 蛋白水平Western blot检测显示Lrig1与NF-κB、MMP-2可能呈负相关。在肿瘤组织中MEK5（P < 0.001）及ERK2（P=0.009）的表达与Lrig1相关; PI3K在正常组织中（P < 0.001）的表达与Lrig1相关。Lrig1、MMP-2及NF-κB协同表达率为52.1%（25/48）, 其协同表达与淋巴结转移相关（P=0.020）。  结论  NF-κB、MMP-2与Lrig1协同表达促进食管癌患者的淋巴结转移, Lrig1可能是通过MEK-ERK信号通路调控相关基因表达。      

转GM-CFS基因瘤苗治疗非小细胞肺癌实验研究

目的构建Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型,探讨转粒细胞/巨噬细胞-集落刺激因子基因瘤苗抑制Lewis肺癌的作用。方法 50只荷瘤小鼠随机分为5组,A组为生理盐水组,B组为顺铂组,C组为恩度组,D组为恩度与顺铂联用组,E组为瘤苗组,每组10只。观察各组小鼠的生存质量情况,描绘肿瘤生长曲线,称小鼠体质量及肿瘤质量,计算抑瘤率。结果治疗后第23天B,C,D,E组肿瘤体积、肿瘤质量均小于A组(P<0.05),D,E组小于B,C组(P<0.05),D组与E组比较,差异无统计学意义(P>0.05);B,D,E组抑瘤率分别为32.19%,55.08%,54.30%,均高于C组(21.96%)(P<0.05);A,C,E组小鼠体质量差异无统计学意义(P>0.05),A,C,E组大于B,D组(P<0.05),B组小于D组(P<0.05)。结论转粒细胞/巨噬细胞-集落刺激因子基因瘤苗对Lewis肺癌的抑瘤作用优于单用顺铂治疗,且不减轻小鼠体质量。     

改良式左胸腹联合左颈二切口在食管癌根治术中的应用(附21例临床分析)

目的探讨改良式左胸腹联合左颈二切口在食管下段癌根治术中的应用. 方法对2002年2月至2003年6月采用了改良式左胸腹联合左颈二切口根治术的21例食管下段癌患者的手术时间、手术并发症、上腹部淋巴结清扫范围进行回顾性分析. 结果改良式左胸腹联合左颈二切口根治术能有效的简化了手术操作步骤,减少了手术创伤及并发症,扩大了腹内淋巴结清扫范围. 结论改良式左胸腹联合左颈二切口根治术是食管下段癌患者的较理想的术式.     

凋亡蛋白因子c-IAP2在新疆哈萨克族食管癌中的表达及临床意义

目的探讨新疆哈萨克族食管癌组织中凋亡蛋白因子c-IAP2 mRNA的表达及其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测30例哈萨克族食管癌患者中c-IAP2 mRNA的表达。结果 30例哈萨克族食管癌患者癌组织与正常组织（手术切缘无癌组织）中c-IAP2 mRNA表达阳性率分别为93.33%（28/30）与70.0%（21/30）。半定量光密度扫描后c-IAP2 mRNA表达量在哈萨克族食管鳞癌患者癌组织及正常组织中差异有统计学意义（P〈0.05）,但c-IAP2的表达与分化程度、病理分期及有无淋巴结转移均无相关性。结论 c-IAP2 mRNA在哈萨克族食管癌患者癌组织中的表达高于正常组织,表明c-IAP2通过抑制细胞凋亡,可能促进了哈萨克族食管癌的发生。     

MMP-9mRNA在食管鳞状细胞癌中的表达

目的探讨MMP-9mRNA在食管鳞状细胞癌及癌旁正常组织中的表达是否存在差异。方法应用RT-PCR(逆转录-聚合酶链式反应法)检测MMP-9mRNA在100例食管鳞状细胞癌组织及癌旁组织中的表达。结果 MMP-9mRNA在癌组织中的表达率为48.0%(48/100),MMP-9mRNA在癌旁组织中的表达率为16.0%(16/100),统计学分析差异有统计学意义(χ2=23.529,P=0.000);MMP-9mRNA的表达与肿瘤浸润深度有关(χ2=4.488,P=0.034),与肿瘤淋巴结转移无关(χ2=0.617,P=0.432),与患者性别无关(χ2=2.519,P=0.113),与患者年龄无关(χ2=3.107,P=0.078),与肿瘤分化程度无关(χ2=2.091,P=0.148)。结论 MMP-9可能在食管鳞状细胞癌的肿瘤产生及肿瘤进展方面起了促进作用,但在食管鳞状细胞癌淋巴结转移转移方面可能不发挥关键作用。