丙型肝炎病毒E1E2蛋白原核表达载体的构建及表达产物的鉴定

目的 :构建丙型肝炎病毒 (HCV)包膜糖蛋白 (E1E2 )基因的原核表达载体 ,为研究HCVE1E2蛋白属性及基因免疫奠定基础。方法 :设计HCVE1E2区基因上、下游引物 ,分别引入BglⅡ及EcoRI酶切位点 ,以含有HCVH株基因序列的质粒pBRTM/HCV1- 30 11为模板 ,通过PCR扩增获得HCVE1E2区基因片段 ,将其克隆入原核表达载体pRSETA ,然后通过酶切和序列测定对其进行鉴定 ;将此表达载体转化入表达菌BL2 1(DE3)pLySs诱导表达 ,并采用SDS -PAGE对表达产物进行鉴定。结果 :经酶切及序列测定分析表明 ,成功地构建了重组原核表达载体pRSETA -HCVE1E2 ;SDS -PAGE显示目的蛋白大量表达 ,且呈非溶状态。结论 :HCVE1E2融合蛋白可以在大肠杆菌中大量表达 ,为HCVE1E2蛋白的制备及基因疫苗的研制奠定了基础。     

创口净抗菌作用的研究

为了解创口净的抗菌作用及其机理,对创口净作了抗菌效价测定和常见病原菌的抑菌试验,并与常用消毒剂作比较分析。结果表明,创口净能有效地杀灭多种病原菌,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.04μg/ml,绿脓杆菌为12.5μg/ml,大肠杆菌和少量常见病原菌均在1.6μg/ml左右。且在用药后2.5min就能杀灭绝大多数细菌,比75％乙醇、0.1％新洁尔灭和0.05％洗必泰更为优越。耐药诱导试验和临床试用证明,一般病原菌对创口净不易产生耐药性。电镜观察发现,创口净能破坏细菌菌膜,使其通透性增加,从而杀灭细菌,这可能是创口净抗菌作用的机理之一。因此,创口净可作为一种高效、快速的广谱抗菌剂,用于各种创伤感染的预防和治疗。     

人胎儿脾胸腺细胞培养上清sIL－2R的分析

应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法分析了不同胎龄脾、胸腺细胞培养上清和血清ｓＩＬ－２Ｒ的变化。结果显示：（１）胎儿脾、胸腺细胞体外在ｒＩＬ－２和抗ＣＤ３刺激下，上清中可产生高水平的ｓＩＬ－２Ｒ。并且随培养时间的延长显著增高（Ｐ＜０．０１）；（２）胎儿脾细胞培养上清ＳＩＬ－２Ｒ明显高于胸腺（Ｐ＜０．０１）；（３）胎儿血清ｓＩＬ－２Ｒ显著高于成人，并随胎龄的增大逐步下降．胎龄与ｓＩＬ－２Ｒ水平呈负相关。结果提示：ｓＩＬ－２Ｒ不仅是胎儿淋巴细胞活化的标志，还可能在淋巴细胞分化、成熟过程中发挥免疫调节作用。胎儿血清ｓＩＬ－２Ｒ增高并随胎龄成熟而下降，推测可能参与胚胎期免疫耐受。     

抗Thy-1单克隆抗体抗排斥反应机理的研究

本文从体内外研究了抗Thy-1McAb抗排斥的机理发现:(1)该抗体体外在补体参与下能够杀伤小鼠胸腺细胞,不依赖补体能够抑制ConA诱导的T细胞增殖:(2)体内注射可以抑制小鼠脾细胞对ConA和PHA-P诱导的T细胞增殖,但不影响LPS对B细胞的     

丙型肝炎病毒E2包膜糖蛋白的研究进展

HCV E2包膜糖蛋白是HCV的结构蛋白之一,具有重要的受体结合位点和抗原表位,在病毒感染和宿主免疫过程中起着十分重要的作用,也是目前疫苗研究的热点.其分子和功能特性的研究对HCV作用机制及预防和治疗的研究有重要意义.近年来,该领域的研究取得一定进展.本文综述了E2蛋白在病毒的入胞作用,在机体的免疫应答及其在疫苗研制方面的作用.     

细菌脂多糖诱导小鼠DC2.4细胞TLR7蛋白的表达

目的:探讨细菌脂多糖(LPS)对小鼠树突状细胞(DC)系DC2.4 TLR7蛋白表达的诱导作用.方法:用RPMIl640完全培养液培养DC2.4细胞,光学显微镜观察LPS刺激前后的细胞形态特征,RT-PCR和Western blot分别测定TLR7 mRNA和蛋白表达.结果:LPS刺激前后,细胞中均有TLR7 mRNA转录.LPS刺激前,细胞较小而透亮,树突较少,无,TLR7蛋白表达;LPS刺激后,细胞体积增大,树突增粗增多,刺激后12 h、24 h、48 h,TLR7蛋白均有表达,且在3个时间点的表达量基本一致.结论:LPS可诱导DC2.4中TLR7蛋白的表达.     

抗T细胞McAb延长皮肤移植存活的研究进展

皮肤移植是救治大面积深度烧伤的关键措施之一。但终因机体的排斥反应,移植皮片不能长期存活。主要组织相容性抗原(MHC)是诱导同种排斥反应的主要因素,T淋巴细胞是介导排斥反应的主要免疫活性细胞。目前,抑制皮肤移植排斥反应的方法根据机理可分为:(1)体外处理移植皮片,降低其免疫原性,如紫外线照射,FA或CSA预处理皮片,表皮细胞培养等;(2)抑制受体免疫功能,延迟排斥反应,如全身应用免疫抑制剂,淋巴结照射等;(3)联合应用。常用的全身免疫抑制剂,如糖皮质激素,抗胸腺细胞血清(ATS)或抗淋巴细胞血清(ALS)都因特异性差,副作用大,限制了在烧伤临床皮肤移植中的应用单克隆抗体(McAb)作为一种新型免疫抑制剂,引起了极大的关注。目前的研究发现具有抗移植排斥反应的McAb有以下     

TH1/TH2在慢性丙型肝炎发病机制中的作用

目的 研究Th1/Th2变化在慢性丙型肝炎发病机制中的作用。方法 采用双抗体酶联分析法检测了20例正常人,35例慢性丙型肝炎,30例慢性乙型肝炎患血清中的IFN－γ,IL-2,IL－4和IL－6的水平。结果 慢性丙型肝炎组Th2类细胞因子（IL－4,IL－6）水平明显高于正常对照组（P＜0．05）,Th1类细胞因子水平IL－2也增高（P＜0．05）,然而,Th1类细胞因子IFN－γ水平有增加趋势,但无统计学差异（P＞0．05）。Th2类细胞因子水平比Th1类细胞因子水平高。结论 Th2类细胞因子水平增高以及由此引起的Th1/Th2比值下降可能与慢性丙型肝炎的病程持续有关。     

血清IgE水平检测及变应原皮试诊断Ⅰ型变态反应病的意义

目的 检测变态反应病患者血清IgE的水平及变应原皮试并分析其临床意义。方法 应用酶联免疫吸附分析法检测了150例正常人与223例变态反应病患者血清IgE水平。结果 结果表明：（1）正常人血清IgE水平随年龄增长而下降（P＜0．01）,（2）各年龄组（小于等于20岁,21－40岁和大于等于40岁）变态反应病患者血清IgE水平均高于对照组;（3）吸入性变态反应病患者血清IgE水平明显高于同年龄正常对照组（P＜0．01）,与皮试结果有高度一致性,结论 血清IgE水平测定对变态反应病的诊断具有重要意义,与皮试联合应用,结合临床综合分析更有价值。     

慢性肝炎并发肝性糖尿病25例临床分析

0　引言　肝脏对调节机体糖代谢起着重要的作用 ,肝脏功能异常可引起糖代谢的障碍 ,严重者可引起糖尿病 .现将我院近年来收治的 2 5例慢性肝病并糖尿病患者分析报告如下 .1　临床资料1.1　病例　 2 5例患者诊断为糖尿病前均有慢性病毒性肝炎病史 ,男 2 0例 ,女 5例 ;年龄 2 2～ 70岁 ,糖尿病按 WHO1985年诊断标准 ,既往无糖尿病史及糖尿病家族史 ,诊断糖尿病前有慢性病毒性肝炎病史 .病毒性肝炎按 1995年 (北京 )第 5次全国传染病学学术会议修订的病毒性肝炎的诊断标准 .收稿日期 :2 0 0 0 -0 3 -2 0 ;　修回日期 :2 0 0 0 -0 5 -10作者简…