抑郁大鼠海马的双向凝胶电泳图谱分析

背景及目的抑郁症发病机制不清。结构影像、遗传、神经生化的研究都从不同角度阐述了抑郁症的发病机制,种种证据也显示抑郁症的发病在脑代谢层面是有其器质性基础的,但至今还无明确、统一的结论。蛋白质组学技术为抑郁症发病机制的研究提供了新的手段。本研究通过建立抑郁症的动物模型,利用双向电泳和质谱鉴定技术,分析海马组织差异蛋白质表达,旨在探索抑郁症新的治疗靶点,为建立客观的诊断、治疗、停药指标提供线索。方法以雄性成年SD大鼠10只,采用慢性不可预见的轻度应激(chronic unpredictablemildstress,CUMS)制作抑郁症模型。将动物…     

胰岛β细胞瘤误诊为抑郁症一例

患者女，53岁。发作性头晕、站立不稳伴情绪障碍4年，加重伴跌倒、嗜睡1个月。2001年行走时突发头晕，站立不稳，伴潮热、多汗，持续1h。1年后症状再次发作，每月约1—2次，持续1—2h／次，偶有烦躁、“抓头发”、“脱衣服”等异常行为。发作间期正常且能回忆。曾在当地医院神经内科诊断为癫痫，经卡马西平治疗1年，症状无明显好转。近一年发作频繁，伴焦虑、抑郁情绪和消极意念，反应迟钝，     

超顺磁性氧化铁Resovist标记神经干细胞的实验研究

目的研究超顺磁性氧化铁（superparamgnetic iron oxides，SPIOs）标记神经干细胞及其生物学特性．方法：神经干细胞培养、传代和诱导分化；Resovist（一种SPIOs）标记神经干细胞。制备磁标记神经干细胞；利用免疫细胞化学、透射电镜和Prussian blue染色等方法对磁标记神经干细胞生物学特性进行研究。结果：在原代及传代细胞中有Nestin阳性细胞即神经干细胞．血清诱导下，神经干细胞可分化为GFAP、NF200阳性细胞．Resovist与神经干细胞共同孵育后，透射电镜及Prussian blue染色显示胞浆中含有铁颗粒，Resovist也可以随细胞的分裂增殖而传到子代细胞中。随Resovist浓度的增高（5．6μg／ml-11．2μg/ml），Resovist对神经干细胞存活、分化能力的影响无显著性差异（P〉0．05）．当Resovist的浓度大于22．4μg／ml时。Resovist影响其存活和分化（P〈0．05）。结论：本实验利用Resovist作为磁标记探针，对神经干细胞进行成功磁标记，为进一步利用核磁共振（MRI）对神经干细胞活体追踪奠定实验基础。     

皮质激素辅助治疗结核性脑膜炎的研究现状

结核性脑膜炎（tuberculous meningitis，TBM）以血脑屏障紊乱、颅内压升高和脑水肿为特征，是人型结核分枝杆菌感染最严重的类型。未经治疗死亡率达100%，治疗后死亡率约为10%，生存者中约80%有严重的神经系统后遗症。随着新增病例的不断增多，世界卫生组织（World Health Organiza-tion，WHO）在2007年的结核防治报告中提出：“要让所有结核患者都有机会得到有效的治疗。”目前尚没有明确针对TBM最佳治疗方案的临床指南。临床上主要参考肺结核的治疗方案。     

苦参碱诱导U937细胞凋亡及其对Bcl-2表达的影响

目的:探讨苦参碱(Mat)抑制人淋巴瘤细胞(U937)增殖及诱导其凋亡的机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mat对U937细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化;Annexin V双标记染色结合FCM检测凋亡率;RT-PCR方法检测Bcl-2 mRNA表达.结果:Mat(0.2～0.5 g/L)作用24,48,72 h后对U937细胞均有增殖抑制作用(P<0.05或P<0.01),在该浓度范围内呈剂量和时间依赖性,其半数抑制浓度(IC50>)为0.4 g/L;Mat 0.2～0.5 g/L组作用U937细胞72 h后,s期细胞比例均增加,细胞发生S期阻滞(P<0.01);细胞凋亡率分别为3.25%,5.32%,8.17%,11.20%,与U937细胞对照组(1.84%)及Mat 0.1 g/L组(1.95%)相比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).RT-PCR显示Bcl-2 mRNA表达明显减弱,且随剂量增加越明显.结论:Mat在一定浓度和时间对U937细胞具有增殖抑制作用,其机制可能是使细胞发生S期阻滞;Mat可以下调U937细胞Bcl-2表达,促进细胞凋亡.     

基因芯片分析Wnt刺激后小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2的差异基因表达

目的 探讨Wnt信号传导系统对诱导干细胞向神经系统分化的基因表达的影响.方法 采用最新的含有22000多个已知基因及EST克隆的小鼠基因芯片U74Av2,检测了Wnt刺激后的小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2中目标基因表达的变化,并进行实时定量PCR,验证了基因芯片结果.结果 Wnt刺激后小鼠多潜能分化干细胞C3H10T1/2中Wnt信号传导系统各主要组成基因表达有不同程度增加;对干细胞向神经系统发育有潜在调节作用的基因表达也有增加或减少.结论 表达谱芯片分析成功筛选出wnt刺激引起表达改变且可能与神经发生有关的基因.     

体外神经干细胞培养过程中蛋白激酶磷脂酰肌醇-3激酶／AKT信号途径的作用

目的：探讨磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3 kinase，P13K)／AKT信号途径在体外培养神经干细胞存活、分化中的作用。方法：实验于2001-11／2004-04在重庆医科大学神经病学研究所完成。分为对照组、P13K特异性抑制剂wortmannin组和LY294002组；采用间接免疫荧光法检测nestin，NF-200和GFAP的表达；TUNEL评价细胞凋亡率；Western Blot法检测磷酸化的AKT，caspase-9和bad的表达。结果：随着wortmannin和LY294002浓度增大，神经干细胞的形态变化逐渐明显，而且细胞凋亡率也逐渐增加。低浓度时(wortmannin浓度为5nmol／L，LY294002浓度为2μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组无显著性意义(P&;gt;0．05)；高浓度时(wonmannin浓度为50，100nmol／L，LY294002浓度为50，100μmol／L)，神经干细胞凋亡率与对照组、低浓度组有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。Western Blot结果提示，随着PI3K特异性抑制剂浓度增大，磷酸化AKT的表达逐渐减弱。当高浓度woftmannin(20nmol／L)和LY294002(10μmol／L)抑制了AKT磷酸化后，磷酸化的caspase-9，Bad表达减弱。此外，将wortmannin组和LY294002组存活的细胞接种后，分化后细胞的NF-200，GFAP表达无显著性意义。结论：神经干细胞存活依赖于PI3K／AKT途径的活化，其机制可能是PI3K／AKT活化后，促进了Bad和caspase-9等蛋白的磷酸化，抑制了细胞凋亡事件的发生。但是PI3K／AKT途径可能在神经干细胞的分化中的作用甚微。     

颅内多发结核性肉芽肿1例分析

对颅内多发结核性肉芽肿1例分析如下。1病历摘要女，12岁。因反应迟钝伴发热、头痛6个月，四肢抽搐2个月，右眼失明10d于2007—06—05入我院。6个月前，家人发现其反应迟钝伴发热、精神萎靡，院外诊断粟粒性肺结核、结核性脑膜炎，给予IRPS四联抗痨及地塞米松治疗40d后好转出院，2个月前患者出现视物模糊，且无明显诱因出现4次痫样发作，发作时双眼凝视、四肢抽搐，呼之不应，意识丧失，数分钟后清醒，但不能回忆，无大小便失禁，10d前出现右眼失明，     

Borna病病毒与慢性粒细胞白血病：病例对照

目的：检测人类慢性粒细胞白血病中Boma病病毒的感染率情况，分析Boma病病毒与慢性粒细胞白血病是否存在相关性。 方法：选取2004-01／2005-06重庆医科大学附属第一医院血液科收治的符合细胞形态学、免疫学及遗传学分型诊断标准的30例慢性粒细胞白血病确诊患者，另以30例健康自愿献血者作为正常对照。慢性粒细胞白血病患者和正常对照人群均取10mL外周枸橼酸二钠抗凝血，采用Ficoll-conray液分离出外周血单个核细胞，提取RNA，随后采用紫外分光光度计测A260,A280值，计算RNA浓度。采用琼脂糖凝胶电泳进行RNA完整性检测，建立Boma病病毒P24阳性定量标准曲线。随机抽取一浓度质粒聚合酶链反应扩增产物进行克隆测序。采用荧光定量套式反转录聚合酶链反应检测RNA中Boma病病毒P24基因片段。 结果：①5个梯度阳性模板定量扩增后均呈典型的S形，起始模板浓度与循环阈值相关系数达0．99969，具有良好的线性关系。质粒PCR产物克隆测序结果与美国国立卫生研究院基因列数据库中调出Boma病病毒的第二开放阅读框（ORFII）区P24序列一致，确定扩增成功。②4份样本电泳后可见28s，18s两条清晰的条带和稍欠清晰的5s条带。A260/A280值分别为1．825，1．946，1．833，1．895，均在1．8以上。RNA浓度分别为0．584，0．872，0．416，0．524mg／L。RNA的提取质量达到聚合酶链反应要求。③电泳条带清晰，反转录及第1轮聚合酶链反应扩增成功。④第2轮聚合酶链反应阳性模板扩增荧光呈典型的S形，说明定量聚合酶链反应扩增成功，起始模板浓度与循环阈值相关系数达0．99以上，具有良好的线性关系。慢性粒细胞白血病患者Boma病病毒P24基因片段与正常对照者的阳性率均为0％，无差异。 结论：本实验不支持Boma病病毒与慢性粒细胞白血病的发生具有相关性。