Stathmin siRNA对EC9706细胞紫杉醇化疗敏感性的影响

目的:探讨Stathmin表达下调的EC9076细胞对紫杉醇(PTX)化疗敏感性的变化。方法:将EC9706细胞分为PTX组、pSUPER+PTX组和pSUPER-S2+PTX组3组,MTT法检测pSUPER-S2+PTX对EC9706细胞存活率的影响;流式细胞术检测其对EC9076细胞周期的影响;采用AnnexinV-FITC/PI合染流式细胞仪、原位酶标记法和DNALadder检测其对EC9076细胞凋亡的影响。结果:MTT结果显示,pSUPER-S2+PTX组EC9706细胞存活率低于PTX组和pSUPER+PTX组(F组间=7.324,P=0.022;F时间=6.471,P=0.027)。与PTX组和pSUPER+PTX组相比,pSUPER-S2+PTX能明显增加G2/M期细胞、减少G0/G1期细胞(F=75.360,10.938,P<0.001);流式细胞仪和TUNEL法检测早期细胞凋亡率均显示pSUPER-S2+PTX可促进细胞凋亡(F=36.827和15.091,F<0.001)。DNALadder实验显示pSUPER-S2+PTX组凋亡条带明显增多。讨论:抑制Stathmin的表达能增加EC9706细胞对PTX的化疗敏感性。     

干细胞基因Lgr5在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨干细胞基因Lgr5在食管鳞癌组织及其成球细胞中的表达意义。方法 采用免疫组织化学法（IHC）检测280例食管鳞癌和150例癌旁组织中Lgr5蛋白的表达水平;低黏附培养法培养食管鳞癌细胞KYSE70形成成球细胞,Quantitative real-time PCR（qRT-PCR）、Western blot法检测干性相关基因SOX2、ALDH1A1、NANOG以及Lgr5在亲代细胞和成球细胞中的表达差异;Transwell实验检测成球细胞的迁移和侵袭能力、qRT-PCR法检测成球细胞中上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition, EMT）相关标志物Vimentin和N-cadherin的表达水平。结果 Lgr5在食管鳞癌组织的表达水平明显高于癌旁正常食管组织（P＜0.05）,且与淋巴结转移、浸润深度、肿块大小、分化程度、肿瘤分期密切相关（P均＜0.05）。与亲代细胞相比,食管鳞癌成球细胞中干性相关基因SOX2、ALDH1A1、NANOG表达水平升高（P均＜0.05）,Lgr5在食管鳞癌成球细胞中的表达水平也明显升高（P＜0.05）,并且其迁移和侵袭能力增强（P＜0.05）,EMT相关标志物Vimentin和N-cadherin的mRNA表达水平升高（P均＜0.05）。结论 Lgr5可能为食管鳞癌复发、进展、侵袭转移的标志之一,Lgr5高表达的食管鳞癌细胞可能具有干细胞样特性,并且可能为食管鳞癌细胞的一个干性调控基因。     

在CerbB-2表达不同的乳腺癌组织中Maspin的表达

目的　对CerbB 2表达不同的乳腺癌组织中肿瘤抑制基因Maspin的表达变化进行比较研究。方法　采用免疫组化SP染色法检测2 9例乳腺癌组织中Maspin蛋白的表达情况。结果　Maspin蛋白在CerbB 2阴性表达的乳腺癌组织中的高表达率为47% (7/15 ) ,在CerbB 2阳性表达的乳腺癌组织中的高表达率仅为7% (1/14 ) ,两者有显著性差异(P <0 .0 5 )。结论　在CerbB 2表达不同的乳腺癌组织中Maspin表达亦存在显著差异,Maspin也可作为判定乳腺癌恶性程度及预后的指标。     

Stathmin基因在食管鳞癌中的表达及生物学意义

目的 探讨Stathmin基因在食管鳞癌(ESCC)中的表达及其与ESCC发生、发展的关系.方法 应用原位杂交和免疫组织化学法检测3株食管鳞癌细胞EC9706、Eca109和EC-1及75例食管鳞癌组织、25例癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中Stathmin mRNA和蛋白的表达,并分析Stathmin基因表达与临床病理特征的关系.结果 StathminmRNA和蛋白在3株食管鳞癌细胞EC9706、Eca109和EC-1中均呈高表达,阳性表达率>80%.在75例食管鳞癌组织标本中,Stathmin mRNA和蛋白的阳性表达率分别为82.7%和81.3%,与癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织比较有显著性差异(χ2=19.204、25.03,均P<0.01).Stathmin mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈正相关(r=0.413,P=0.000).不同分化程度、有无淋巴结转移、肿瘤浸润深度和TNM分级的食管鳞癌组织之间Stathmin mRNA和蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 食管鳞癌细胞株及组织中Stathmin mRNA及蛋白高表达,与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及TNM分期显著相关,Stathmin可能与食管鳞癌发生发展有关.Stathmin对ESCC的早期诊断及预后判断均有重要意义.Stathmin有望成为理想的生物治疗靶点.     

恩度/贝伐单抗联合紫杉醇加铂类治疗晚期肺腺癌近期疗效对比观察

目的 观察恩度/贝伐单抗联合化疗治疗晚期肺腺癌的近期疗效差异和安全性。方法 回顾性分析郑州大学第一附属医院自2010年1月至2013年6月晚期肺腺癌（ⅢB期或Ⅳ期）患者128例,其中单纯化疗组48例,恩度+化疗组（恩度组）44例,贝伐+化疗组（贝伐组）36例,运用χ2检验和Ridit分析,观察三组患者的近期疗效及安全性。结果 恩度组和贝伐组的客观缓解率和疾病控制率分别为31.8%、59.1%和36.1%、80.5%,均优于单纯化疗组（14.5%,39.5%）（P<0.05）。三组间的不良反应差异无 统计学意义（P>0.05）。结论 靶向药联合化疗治疗晚期肺腺癌疗效确切,不增加不良反应;在控制疾病进展方面贝伐单抗优于恩度。     

胰岛素增强5-氟尿嘧啶对体外结肠癌细胞的细胞毒作用

目的 观察胰岛素增强5-氟尿嘧啶(5-Fu)对结肠癌HCT-8细胞株和HT-29细胞株的细胞毒作用,探讨其增效作用机制.方法 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测胰岛素和5-Fu联合应用对HCT-8细胞和HT-29细胞的生长抑制率,流式细胞仪分析胰岛素对HCT-8细胞和HT-29细胞周期的影响.结果 于5.Fu应用前0-8h加入胰岛素,对结肠癌细胞的生长抑制率显著高于单用5-Fu组(P<0.01),以在5-Fu应用前4h加入胰岛素对细胞的生长抑制率最高,HCT-8细胞和HT-29细胞的生长抑制率分别为71.27%和70.71%.胰岛素浓度在0.8 mU/ml以上时,与5-Fu联用,对结肠癌细胞的生长抑制率高于单用5-Fu组(P<0.01).胰岛素浓度在0.8-8 mU/ml之间,细胞生长抑制率随着胰岛素剂量的增加而增高;但当胰岛素浓度在8-200 mU/ml之间时,细胞生长抑制率并未随胰岛素剂量的增加而增高,而是稳定在一定的水平.胰岛素作用于结肠癌HCT-8细胞和HT-29细胞后,各时点G_0/G_1期细胞百分比均明显低于对照组(P<0.01).胰岛素作用6、12和24h,HCT-8细胞和HT-29细胞s期百分比明显增高(P<0.01),其中以作用6h最高(HCT-8细胞和HT-29细胞分别为39.18%和36.42%),之后逐渐降低.结论 胰岛素可以增强5-Fu对结肠癌细胞的细胞毒作用.胰岛素作用细胞后使S期细胞增多.是其增强5-Fu细胞毒作用的主要机制之一.     

三氧化二砷对乳腺癌细胞MDA-MB-231雌激素受体α的去甲基化作用

目的研究三氧化二砷（As2O3）作用于乳腺癌细胞MDA-MB-231后,对雌激素受体α（ERα）表达的影响,并初步探讨其机制。方法用As2O3处理ERα阴性的人乳腺癌细胞MDA-MB-231,甲基化特异性PCR（MSP）检测ERα启动子CpG岛的甲基化状态,反转录PCR（RT-PCR）检测ERα mRNA表达水平的变化。以雌激素受体α阳性的人乳腺癌细胞MCF-7 为阳性对照。结果MDA-MB-231细胞ERα启动子CpG岛存在高甲基化,经过As2O3处理后,CpG岛高甲基化水平降低,ERα mRNA恢复表达。结论 一定浓度的As2O3能够使人乳腺癌细胞MDA-MB-231 ERα启动子中的CpG岛发生去甲基化,重新恢复mRNA的表达。     

乳腺癌分子靶向治疗的进展与展望

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,全世界每年约有120万妇女罹患乳腺癌,占所有女性肿瘤的18%.乳腺癌5年生存率约50%～60%,近50%患者治疗后复发转移.晚期乳腺癌患者平均生存时间仅18～30个月.分子靶向治疗已经成为继手术、放疗和化疗三大传统模式之后一种全新的生物治疗模式,也是当前乳腺癌治疗领域研究的热点.本文就乳腺癌分子靶向治疗的新进展作一综述.     

重组人血管内皮抑制素联合DP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,早期诊断很困难,70%～80%的非小细胞肺癌(non small cell lung cancer, NSCLC)确诊时已属晚期.晚期NSCLC的治疗主要以全身化疗为主,尽管第3代细胞毒药物(如吉西他滨、长春瑞滨和多西他赛等)联合铂类药物治疗晚期NSCLC的疗效有所提高,但患者的5年生存率仍然偏低,生存获益仍然有限.     

胰岛素对化疗药物5-氟尿嘧啶的增效作用及其机制

目的建立裸鼠人食管癌模型,观察胰岛素是否增强5-氟尿嘧啶(5-Fu)对裸鼠的化疗疗效并探讨其机制。方法免疫组织化学方法检测肿瘤组织中CyclinD1的表达。ELISA方法检测裸鼠血清中胰岛素样生长因子(IGF-1)和胰岛素样生长因子结合蛋3(IGFBP-3)含量变化。结果大中小剂量胰岛素(0.09、0.06、0.03u/20g)均可明显增强5-Fu的抑瘤作用(P<0.05),但并不增加5-Fu的毒副反应。胰岛素组与对照组相比,CyclinD1表达水平明显增多(P<0.05)。5-Fu组和联合用药组之间IGF-I和IGFBP-3水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论在裸鼠人食管癌模型中,胰岛素能增强5-Fu对裸鼠人食管癌移植瘤的化疗疗效,CyclinD1表达水平增多在胰岛素增效机制中发挥着重要作用。而血清中IGF-I和IGFBP-3含量变化尚不能解释其增效机制。