荜茇酰胺对人肺腺癌A549细胞的增殖及其辐射敏感性的影响

目的探讨荜茇酰胺对人肺腺癌A549细胞的增殖以及辐射增敏性的影响。方法体外培养人肺腺癌A549细胞,取对数生长期细胞进行实验。采用活细胞计数盒(CCK-8)法测定荜茇酰胺对A549细胞生长增殖的影响;流式细胞术观察细胞周期和凋亡。结果荜茇酰胺明显抑制A549细胞的增殖,引起细胞凋亡和细胞G_0/G_1期的阻滞。荜茇酰胺联合X射线照射能明显增加细胞的增殖抑制率和细胞凋亡。结论荜茇酰胺可明显抑制人肺腺癌细胞的生长增殖。低浓度的荜茇酰胺增加了人肺腺癌细胞的辐射敏感性,可能与其促进细胞的增殖抑制、诱导细胞凋亡、引起G_0/G_1期阻滞有关。     

HCV F蛋白和APC基因甲基化与慢性HCV感染的相关研究

目的 探讨丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）F蛋白与多发性腺瘤样息肉病（adenomatous polyposis coli,APC）基因甲基化在慢性HCV感染中的关系。方法 收集慢性HCV患者（chronic hepatitis patient,CHP）的血样,检测F抗体（F antibody,F-Ab）的阳性率并且分成两组（F-Ab（+）CHP组、F-Ab（-）CHP组）,收集健康者的血样作为对照组;分离外周血单核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）,分别用HCV Core/F蛋白刺激,72 h后,分别提取DNA,用二代测序检测APC基因的甲基化水平,分析各组APC基因甲基化程度的差异。结果 APC基因甲基化程度在F-Ab（+）CHP组、F-Ab（-）CHP组及健康对照组三组间差异有统计学意义（F=185.185,P<0.001）,F-Ab（+）CHP组APC基因甲基化程度高于F-Ab（-）CHP组,健康对照组最低（均有P<0.05）;三组样本PBMC分别经Core/F蛋白体外刺激后,APC基因甲基化程度各组总体比较差异均有统计学意义（均有P<0.05）,Core蛋白与F蛋白共刺激组细胞APC基因甲基化程度高于F蛋白刺激组,Core蛋白刺激组为最低。结论 在慢性HCV感染患者中,HCV F蛋白的产生能够影响APC基因甲基化程度。     

试行形态学综合性实验改革 培养“复合型”医学人才

目的在"形态实验学"课程中开设跨学科的综合性实验,并进行教学实践,以推进基础医学实验教学改革,探索"复合型"医学人才培养模式。方法以综合性实验——"腹泻的诊断和鉴别诊断"为例,就教学方案的设计和实施、信息反馈、教学体会等方面进行总结和分析。结果形态学综合性实验的开设,有助于培养"复合型"医学人才,提高了医学生的知识整合能力、分析解决问题能力、实践操作能力、团队合作精神和创新思维能力。结论形态学综合性实验的开设取得了良好的教学效果,但还有待进一步完善,并在实验教学中逐步推广实施。     

自身免疫性感音神经性聋豚鼠的子代内耳生理功能研究

目的 :观察自身免疫性感音神经性聋 (ASHL)母豚鼠所产子代内耳生理功能的变化 ,探讨针对内耳的自身免疫因素对子代内耳生理功能的影响及其改变特点。方法 :同种内耳抗原 (CIEAg)持续免疫孕豚鼠 ,采用耳蜗电图 (记录cAP、CM )和眼震电图仪 (记录自发性眼震和冷热空气试验 )测试母鼠和子鼠的听觉和前庭功能 ,并检测血清特异性体液免疫反应。结果 :ASHL模型母豚鼠所产子鼠血清中发现有特异性抗体水平升高 ,部分 (3 /9)出现听觉损伤。非ASHL母鼠和对照组母鼠所产子代未见明显异常。结论 :ASHL雌鼠所产子代可出现感音神经性聋 ,其内耳损伤和功能障碍极可能与针对内耳组织的自身免疫反应 (尤其是体液免疫 )有关 ,从而提示内耳自身免疫因素可能为部分先天性非遗传性感音神经性聋的病因之一。     

高效液相色谱法测定血清中依普拉芬浓度及在人体的药代动力学研究

高效液相色谱法测定血清中依普拉芬浓度及在人体的药代动力学研究马晓红许逸刘天培（南京医科大学基础医学院药理教研室，南京２１００２９）依普拉芬（ｉｐｒｉｆｌａｖｏｎｅ，７异丙氧基异黄酮）为一合成的异黄酮衍生物，是新型治疗骨质疏松药物。它主要通过抑制骨吸...     

抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的:制备抗-戊型肝炎病毒的单克隆抗体,并将其用于分析戊型肝炎病毒不同毒株结构蛋白的抗原表位。方法:采用来自墨西哥株(Mexicanstrain)的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Mex)免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法筛选阳性克隆,并将获得的单克隆抗体与戊型肝炎病毒缅甸株(Burmastrain)和美国株(USAstrain)的重组蛋白(p166Bur、p166US)进行交叉反应测定。结果:最终获得4株能稳定分泌抗-p166Mex的杂交瘤细胞株,即D8G10、E5E12、D4A3、B7E6。其中D8G10,E5E12和B7E6细胞株的培养上清液,还能分别与p166Bur和p166US重组蛋白发生阳性反应。结论:利用已获得的抗-p166Mex单克隆抗体,初步确定3种不同的戊型肝炎病毒重组蛋白(p166Bur、p166US、p166Mex)含有一种共同的抗原表位。     

抗成长型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和初步应用

目的：制备抗-戊型肝炎病毒的单克隆抗体，并将其用于分析戊型肝炎病毒不同毒株结构蛋白的抗原表位。方法：采用来自墨西哥株（Mexican strain)的戊型肝炎病毒重组蛋白（p166Mex)免疫Balb/c小鼠，取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合，经酶联免疫吸附试验（ELISA）法筛选阳性克隆，并将获得的单克隆抗体与戊型肝炎病毒缅甸株（Burma strain)和美国株（USA strain)的重组蛋白（p166Bur,p166US)进行交叉反应测定。结果：最终获得4株能稳定分泌抗-p166Mex的杂交瘤细胞株。即D8G10,E5E12,D4A3,B7E6。其中D8G10，E5E12和B7E6细胞株的培养上清液，还能分别与p166Bur和p166US重组蛋白发生阳性反应。结论：利用已获得的抗-p166Mex单克隆抗体，初步确定3种不同的戊型肝炎病毒重组蛋白（p166Bur,p166US,p166Mex)含有一种共同的抗原表位。     

大鼠骨髓间质干细胞体外分离培养及生物学特性研究

目的：建立大鼠骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)体外分离培养方法，并对大鼠MSCs的生物学特性进行研究。方法：分离5～8周龄的大鼠股骨骨髓进行体外培养，取5代以后的MSCs观察形态特征，绘制生长曲线，进行细胞化学染色，并用流式细胞仪检测其表面标志和进行细胞周期分析。结果：大鼠MSCs细胞形态呈长梭形或多边形，细胞生长曲线呈S形，群体倍增时间为30h，细胞化学染色显示碱性磷酸酶(ALP)、过氧化物酶(POX)、苏丹黑B(SB)阴性，而*醋酸萘酚醋酶(α-NAE)与糖原(PAS)阳性，流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD90表达阳性，而CD34、CD38、CD45表达阴性；细胞周期分析显示，G0／G1期：79．48％，G2／M期：6．10％，S期：14．42％。结论：本方法分离纯化出的是MSCs，其在体外具有生长稳定，增殖较快的特点，是组织工程研究中良好的细胞来源，也是转基因研究优良的载体细胞。     

食管鳞癌中PTEN和Ki-67蛋白的表达

目的探讨食管鳞癌中PTEN和Ki-67蛋白表达情况及其临床意义.方法采用SP免疫组织化学法对65例食管鳞癌标本进行了检测.结果65例食管鳞癌中PTEN蛋白的阳性率为58.46%(38/65),高、中分化组与低分化组相比,有显著性差异(P<0.05).并且,食管鳞癌中PTEN与Ki-67蛋白表达之间存在显著的负相关关系(P<0.05).结论PTEN基因的缺失或突变在食管鳞癌的发生发展中可能起重要作用,且与肿瘤恶性分化程度及细胞增殖情况密切相关.     

斑蝥酸钠对人胃癌裸鼠皮下移植瘤组织中血管生成作用的研究

目的:研究斑蝥酸钠对人胃癌裸鼠移植瘤组织中血管生成的影响。方法:采用人胃癌BGC823细胞株种植裸鼠皮下建立人胃癌移植瘤模型。应用免疫组化法测定斑蝥酸钠对移植瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)及肿瘤内微血管密度(MVD)表达的影响。结果:中、高剂量斑蝥酸钠治疗组VEGF表达积分极显著低于低剂量组和对照组(P<0.01),中剂量组与高剂量组、低剂量组与对照组之间VEGF表达积分无差异(P>0.05)。中、高剂量斑蝥酸钠治疗组MVD极显著低于对照组和低剂量组(P<0.01),但中剂量组和高剂量组之间无显著性差异(P>0.05)。结论:斑蝥酸钠可能通过下调肿瘤细胞分泌VEGF,抑制肿瘤血管生成而抑制肿瘤细胞生长。