丙型肝炎病毒感染者F基因区变异临床意义的初步研究

目的探讨丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）F基因区变异的临床意义。方法以78例未治疗慢性丙型肝炎患者为研究对象,采用单链构象多态性分析对HCV-F基因区进行准种分析,实时荧光定量聚合酶链反应对HCV RNA进行定量检测,利用酶联免疫吸附试验分别对患者血清中的抗F蛋白抗体、Th1（IL-12,IFN-γ）和Th2（IL-5,IL-10）细胞因子水平进行检测分析。结果 78例慢性丙型肝炎患者中有46例为抗HCV-F抗体阳性,阳性率为59%。HCV1b亚型患者F基因区准种数目高于非HCV1b亚型（P=0.002）。F基因区SSCP条带数与HCV RNA载量及ALT/AST水平呈正相关（均有P<0.05）。另外,与F基因准种数量≤2的患者相比,F基因准种数量>2的患者血清中,Th1细胞因子IL-12、IFN-γ水平降低（P=0.023,P=0.010）,Th2细胞因子IL-5、IL-10水平显著升高（P=0.024,P=0.012）。结论 HCV-F基因区准种多样性与病毒复制、肝损伤和机体Th2优势应答有关,具有一定的临床意义。     

促甲状腺激素(TSH)水平对IVF/ICSI妊娠结局的影响

目的:探讨在IVF/ICSI-ET周期中患者基础促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平与临床妊娠结局的关系。方法:回顾性分析第1次行IVF/ICSI-ET不孕患者的促排卵结局与TSH的相关性。结果:①在1 832个IVF/ICSI周期中,TSH与PRL水平呈正相关(r=0.080,P=0.002),而与获卵数、受精卵子数、受精率、可移植胚胎数、优质胚胎数、孕囊与心芽搏动数、种植率、生化妊娠率、流产率、活产率无明显相关性(P>0.05);PRL与获卵数呈正相关(r=-0.050,P=0.032),但不影响后期的受精、可移植胚胎数、优质胚胎数、着床及后期的生化妊娠率、临床妊娠率及活产率。控制PRL后对TSH本身与获卵数行相关性分析,结果两者间无相关性(r=0.004,P=0.874)。②分别比较不同TSH界值下高于界值与低于界值组的获卵数、受精卵子数、受精率、可移植胚胎数、优质胚胎数、孕囊与心芽搏动数、种植率的情况,结果界值上、下组间实验室及临床相关指标无明显差异。但当TSH界值分别为2.7 mIU/L、3.3 mIU/L、3.9 mIU/L时,低、高组间的活产率分别为83.1%和81.0%,82.3%和78.9%,83.9%和70.3%,流产率分别为16.1%和19.0%,17.7%和21.1%,16.1%和19.7%,虽未达到统计学差异,但低水平TSH组的流产率较高水平TSH组相对较低,活产率较高,并随着界值的增大,界值上、下组间的活产率与流产率差距增大。结论:在0.3~4.2 mIU/L区间,TSH水平对于IVF/ICSI-ET的妊娠结局无明显影响。当基础TSH水平>2.7 mIU/L时,流产率有上升趋势,活产率有下降趋势,需对孕妇孕期情况进行密切随访。     

芍药苷对巨噬细胞炎症因子表达的影响

目的：明确芍药苷（PF）对脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞炎症因子的影响。方法：小鼠单核细胞系Raw 264.7细胞体外培养，分为LPS组，PF+LPS组和空白对照组，qRT-PCR及Western blot检测各组LL37、TLR2、SOCS3、ASK1及p38表达的水平。结果：LPS可诱导Raw 264.7细胞活化并产生炎症反应。与空白对照组比较，LPS组ASK1、TLR2和p38的表达降低，SOCS3表达升高；与LPS组比较，PF+LPS组ASK1、TLR2和p38的表达增高，SOCS3表达降低。结论：芍药苷可抑制巨噬细胞炎症反应。     

转化生长因子-β1和甲壳胺联合作用对老年人牙周膜细胞生长分化功能的影响

目的探讨转化生长因子(TGF)-β1和甲壳胺(chitosan,Chi)联合作用对老年人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。方法用原代培养的老年人牙周膜细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和酶动力学方法检测Chi 0.1 g/L、TGF-β1 1μg/L和Chi(0.1 g/L)加TGF-β1(1μg/L)对老年人牙周膜细胞增殖和ALP的作用。结果①与对照组比较,3 d和5 d时Chi加TGF-β1组和TGF-β1组及7d时Chi加TGF-β1组和Chi组均能明显增强老年人牙周膜细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01),Chi加TGF-β1组的促增殖能力明显强于Chi组和TGF-β1组;②3个实验组的细胞裂解液和Chi加TGF-β1组和TGF-β1组细胞培养液中牙周膜细胞ALP活性均高于对照组(P<0.05,P<0.01),以Chi加TGF-β1组最高(P<0.01)。结论Chi和TGF-β1单独都能增加老年人牙周膜细胞增殖的能力和ALP活性,Chi和TGF-β1联合使用增强老年人牙周膜细胞增殖和ALP活性的能力强于单独使用Chi和TGF-β1。     

口腔扁平苔藓基因表达谱中差异表达基因初步探讨

目的筛选口腔扁平苔藓组织中的差异表达基因,并对其进行功能分类。方法用4 000种人类基因多聚酶链反应产物制成BiostarH- 40s型表达谱芯片,分离纯化正常口腔黏膜组织和口腔扁平苔藓病变组织mRNA,制备表达谱探针,用ScanArray 4000 荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像,分析正常口腔黏膜组织和口腔扁平苔藓组织之间差异表达的基因。结果1）在4 000条基因中,有213条基因表达差异,其中122条基因表达上调,91条基因表达下调。2）在表达上调基因中,功能分类主要包括免疫相关基因、代谢相关基因、癌基因、细胞因子、细胞信号和传递蛋白。3）在表达下调基因中,功能分类主要包括DNA结合、转录和转录因子、细胞信号和传递蛋白、免疫相关基因、细胞因子、代谢相关基因。结论口腔扁平苔藓的发生、发展过程中存在着多条不同功能基因表达调控的改变。     

猪链球菌2型二元信号转导系统ciaR基因敲除突变株的构建及生物学功能研究

目的构建猪链球菌2型强毒株05ZYH33二元信号转导系统1094HK/1095RR的反应调节因子ciaR基因敲除突变株(ΔciaR),并研究ΔciaR的生物学功能。方法和结果基于同源重组原理筛选ciaR基因缺失株,PCR分析及Southern杂交结果均显示突变株构建成功。通过检测OD600值绘制生长曲线,发现突变株在37℃和40℃其OD600值均明显低于野生株;与40mmol/L过氧化氢共作用15min后涂板计数,突变株存活率明显低于野生株;不同pH值的培养基中培养,发现在pH5.0的酸性环境中突变株OD600值明显低于野生株;野生株与突变株对BALB/c小鼠攻毒(约1×109CFU/只),各10只,两组16h后均死亡9只。结论成功获得05ZYH33ciaR基因敲除突变株;发现删除ciaR基因会导致细菌的生长繁殖能力减弱,抗氧化应激能力下降,在酸性环境生长存活能力下降;但对小鼠毒力无差别。     

环氧化酶-2在皮肤肿瘤中的表达及其临床意义

研究发现,在长期使用非甾体抗炎药(NsAIDs)治疗的类风湿性关节炎患者中结肠癌的发病率下降40%～60%[1].体内外及动物模型等研究[2]表明,NSAIDs的作用靶点是环氧化酶(cyclooxygenase,COX).COX有两种异构体:COX-1和COX-2,已证明COX-2在多种内脏肿瘤中存在过表达[3],因此,COX-2与肿瘤的关系得到了普遍关注.我们应用免疫组化方法检测了COX-2在几种常见皮肤肿瘤组织中的表达,并探讨其临床意义.     

松黄蛋白组分的分离及抗原性的实验分析

目的：分析松黄蛋白抗原中致敏成分。方法：用硫酸铵沉淀、葡聚糖凝胶层析分离松黄蛋白质组分，以致敏大鼠腹腔肥大细胞组胺释放试验和被动皮肤过敏反应试验检测松黄蛋白组分的致敏活性。结果：松黄蛋白中含有３种抗原性不同的组分，组分Ⅱ是松黄主要抗原。结论：松黄蛋白中含有致敏组分，此蛋白组分具对热和酸碱不稳定的性质。     

细胞移植对脑出血脑损伤的保护作用

目前用于脑出血治疗研究的主要细胞有：神经干细胞、遗传工程神经干细胞、骨髓间质干细胞、脐血细胞、胚胎干细胞、重组细胞、微囊化人工细胞等，本文就前5种细胞移植在出血性脑损伤中的保护作用进行综述。干细胞移植在脑出血性动物身上的实验所取得的良好效果，显示细胞移植重建损伤的脑组织、改善脑功能成为治疗脑出血疾病的必然途径。临床实验也取得了一定效果，但要真正应用于临床目前还有许多问题要解决：要想准确的定向诱导细胞分化，需要更深入的研究局部微环境，细胞因子及基因对干细胞分化的作用；细胞移植促进脑出血功能的恢复，其确切的机制还需要进一步研究 ；诱导分化的神经干细胞是否能象正常神经细胞一样能分泌神经递质，是否具有复杂的电生理等。     

钙通道阻滞剂对大鼠坐骨神经损伤后c-fos表达及神经功能的影响

目的探讨钙通道阻滞剂(CCB)对周围神经损伤后c-fos表达及神经功能的影响。方法制作坐骨神经嵌压性损伤大鼠模型,给予模型大鼠分别腹腔注射氟桂利嗪1mg/kg(低剂量组)、2mg/kg(高剂量组),或生理盐水10ml/kg(模型组)。在坐骨神经嵌压后第1周、第4周时取大鼠坐骨神经,采用免疫组织化学、行为医学和电生理学的方法测定c-fos阳性细胞数及第4周时足趾间距、神经传导速度(NCV);并与正常大鼠比较。结果(1)损伤后1周时,模型组、氟桂利嗪低剂量组坐骨神经c-fos阳性细胞数显著多于正常对照组(均P<0.01);氟桂利嗪高剂量组c-fos阳性细胞数轻度增加,也显著多于正常对照组(P<0.05),但明显少于模型组和氟桂利嗪低剂量组(均P<0.01);损伤4周时各组c-fos阳性细胞数均无明显增高。(2)损伤后4周时,模型组和氟桂利嗪低剂量组、高剂量组坐骨神经NCV显著慢于正常对照组(均P<0.01),氟桂利嗪低剂量组、高剂量组的NCV快于模型组(P<0.05,P<0.01)。(3)损伤后4周时,模型组大鼠右后肢足趾间距明显小于其他3组(均P<0.01);氟桂利嗪高剂量组、低剂量组与正常对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论CCB使周围神经损伤后早期c-fos表达下调,并使神经功能受损减轻。