显微数码互动系统在留学生组织学与胚胎学实验课的灵活应用与体会

正随着本校高等教育水平的不断提高和国际化接轨,自2009年开始招收海外留学生,目前本校海外教育学院已有400多名海外留学生。同时伴随着2013年第1期和2016年第2期全国来华留学英语授课品牌课程的申报,组织学与胚胎学课程对留学生的教学一直在不断探索和进步,教学条件和师资力量也一     

新生期肺炎链球菌肺炎对气道平滑肌表型的影响

目的研究新生期肺炎链球菌肺炎(Streptococcus pneumoniae pneumonia,S.pp)对气道平滑肌表型的影响。方法Balb/c小鼠出生后第7天鼻腔滴注2×107CFU肺炎链球菌5μl建立新生期S.pp模型,对照组滴注等量PBS。感染5周后收集肺组织标本,免疫组织化学检测气道平滑肌肌层厚度;RT-PCR检测气道平滑肌Acta2-mRNA、My11-mRNA、Tagln-mRNA表达量;Western blot检测α-SMA、SMMHC、SM22α蛋白表达量。结果 S.pp组气道平滑肌面积(α-SMA+area/Pbm)较对照组显著增加(46.06±10.74 vs 22.50±9.131,P<0.01),平滑肌收缩蛋白SMMHC面积(SMMHC+area/Pbm)较对照组明显增加(58.33±29.40 vs19.75±13.10,P<0.05),2组间平滑肌收缩蛋白SM22α面积(SM22α+area/Pbm)无统计学差异(37.20±10.67 vs 41.33±5.871,P>0.05);Western blot分析发现S.pp组小鼠肺组织α-SMA、SMMHC蛋白较对照组显著升高(分别为1.352±0.552 9 vs 0.633 0±0.157 5,P<0.05;1.291±0.487 2 vs 0.776 8±0.279 3,P<0.01),肺组织SM22α蛋白表达水平差异无统计学意义(1.435±0.436 5 vs 1.398±0.437 3,P>0.05);RT-PCR检测发现S.pp组Acta2-mRNA、My11-mRNA表达水平较对照组显著增加(分别为2.704±1.044 vs0.906 5±0.214 8,P<0.01;1.780±0.454 6 vs 1.183±0.369 9,P<0.05),而2组间Tagln-mRNA表达水平无统计学差异(1.438±0.321 3vs 1.207±0.334 5,P>0.05)。结论新生期肺炎链球菌肺炎可诱导气道平滑肌表型改变,促进气道高反应性形成。     

维生素D通过抑制Pin1介导线粒体氧化应激拮抗高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

目的:观察维生素D对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)氧化损伤的作用,对脯氨酰异构酶1(Pin1)蛋白表达和活性、p66Shc线粒体转位及活性氧簇(ROS)生成的影响,以及维生素D受体(VDR)在这一过程的作用。方法:以33 mmol/L葡萄糖干预建立高糖内皮细胞损伤模型,分别接受维生素D(10~(-8)~10~(-6)mol/L)和Pin1抑制剂胡桃醌(10~(-7)mol/L)共孵育;流式细胞术和TUNEL染色法检测HUVECs的凋亡率;流式细胞术和荧光显微术检测细胞内的ROS水平;Western blot法检测HUVECs中Pin1、p66Shc、p-p66Shc、p66Shc胞浆/线粒体比值及caspase-3的蛋白水平;多肽酶解法测定HUVECs裂解液中Pin1的活性;通过转染siRNA沉默VDR的表达,观察VDR是否介导Pin1蛋白及活性改变。结果:维生素D(10~(-8)~10~(-6)mol/L)抑制高糖诱导的HUVECs凋亡,并抑制高糖诱导的HUVECs中Pin1蛋白表达和活性增加。维生素D抑制高糖诱导的HUVECs中p66Shc磷酸化、p66Shc线粒体转位、ROS生成及caspase-3蛋白表达(P0.05)。通过转染siRNA沉默VDR表达,可削弱维生素D对高糖诱导的HUVECs中Pin1蛋白表达和活性增加的抑制作用。结论:维生素D通过激动VDR,抑制高糖环境下Pin1蛋白表达和活性增加,抑制p66Shc的线粒体转位,减少ROS生成,从而减轻血管内皮细胞凋亡。     

全麻诱导期不同吸氧浓度对气管插管时无通气安全时限的影响

目的探索全麻诱导期不同吸氧浓度对气管插管时无通气安全时限的影响。方法选择80例ASAⅠ到Ⅱ级在气管插管全麻下行择期手术患者,根据全麻醉诱导时面罩通气吸入氧浓度(fraction of inspired oxygen,FIO_(2)),采用随机数字法将患者分为4组:A组(FIO_(2)=1,n=20)、B组(FIO_(2)=0.8,n=20)、C组(FIO_(2)=0.6,n=20)、D组(FIO_(2)=0.4,n=20)。面罩通气和气管插管均由三位有经验的麻醉医生进行操作完成,由助手进行气体浓度调整和脉搏氧饱和度(SPO_(2))及相关指标的观察记录。各组气管插管操作完成后均不予通气,直至SPO_(2)降至90%。在气管插管未完成时SPO_(2)降至90%以下,则认定为失败病例。记录失败病例数,无通气安全时限(即无通气状态下SPO_(2)≥90%的持续时间)及气管插管时长。结果各组均无失败病例,无通气安全时限分别为A组(493.5±172.8)s,B组(380.9±93.7)s,C组(276.3±103.2)s,D组(160.3±54.8)s,气管插管时长分别为(38.4±9.8)s,(32.8±7.5)s,(36.8±9.0)s,(35.9±10.3)s。无通气安全时限和气管插管时长的99%置信区间分别为A组(382.9,604.0)s、(32.1,44.6)s,B组(320.9,440.9)s、(27.9,37.6)s,C组(210.2,342.2)s、(31.0,42.5)s,D组(125.3,195.3)s、(29.3,42.5)s。各组的无通气安全时限均显著大于气管插管时长(P<0.01)。四组间的气管插管时长的差异以及气管插管完成时SpO_(2)≥90%例数的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对于有经验的麻醉医师,全麻诱导时面罩通气吸入氧浓度为40%即可提供充足的无通气安全时限以便完成气管插管。     

不同剂量右美托咪定对胃肠道恶性肿瘤根治术患者围术期电解质及术后康复的影响

目的 观察不同剂量右美托咪定对胃肠道恶性肿瘤根治术患者围术期电解质及术后康复的影响。
方法 选择择期全麻下胃肠道恶性肿瘤根治术患者106例,男40例,女66例,年龄55～75岁,BMI 18.5～25.0 kg/m²,ASA Ⅰ—Ⅲ级。采用随机数字表法将患者分为四组：麻醉诱导前,D1组、D2组和D3组右美托咪定负荷剂量分别为1.0、1.0、0.5 μg/kg（均于10 min内静脉泵注完成）,维持剂量分别为0.25、0.5、0.5 μg·kg^-1·h^-1;C组生理盐水50 ml/h泵注10 min,维持量10 ml/h,四组维持剂量均至术毕前约30 min停止输注。于动脉穿刺完成后5 min（t₀）、手术开始后1 h（t₁）、术毕（t₂）、入PACU后1 h（t₃）、术后48 h（t₄）测定血清K⁺、Na⁺、Ca²⁺浓度,于t₀—t₃时测定血清乳酸浓度。记录丙泊酚及瑞芬太尼用量。记录术后48 h内腹腔引流量、镇痛泵总按压次数、镇痛泵有效按压次数、氟比洛芬酯追加例数。记录住院时间及术后肺部感染等并发症的发生情况。
结果 与T₀时比较,t₄时D1组、D2组和C组血清K⁺浓度明显升高（P<0.05）,t₂—t₄时D3组血清K⁺浓度明显升高（P<0.05）。t4时D2组血清K⁺浓度明显低于C组（P<0.05）;t₂时D3组血清K+浓度明显高于D2组（P<0.05）。与T₀时比较,t₄时D1组、D2组和C组血清Na+浓度明显降低（P<0.05）。t4时D1组和D3组血清Na+浓度明显高于C组（P<0.05）。与t₀时比较,t4时D1组、D2 组和C组血清Ca²⁺浓度明显升高（P<0.05）。t₃、t₄时D3组血清Ca2+浓度明显升高（P<0.05）。t3时D3组血清Ca²⁺浓度明显高于C组（P<0.05）。与t₀时比较,t₁时D2组和D3组血清乳酸浓度明显降低(P<0.05)。与C组比较,D2组丙泊酚用量明显减少（P<0.05）,D1组、D2组和D3组瑞芬太尼用量明显减少（P<0.05）。四组术后48 h内腹腔引流量、镇痛泵总按压次数、镇痛泵有效按压次数、氟比洛芬酯追加率、住院时间和肺部感染率差异无统计学意义。
结论 右美托咪定的使用未降低胃肠道恶性肿瘤根治术患者围术期K+浓度,负荷剂量0.5 μg/kg、维持剂量0.5 μg·kg^-1·h^-1可轻度升高入PACU后1 h血清K+浓度,明显降低血清乳酸浓度,减少瑞芬太尼用量,且对术后康复无不利影响。     

新型冠状病毒肺炎疫情常态化防控期间安全开展普外科手术策略

随着新型冠状病毒奥密克戎变异株在全球范围广泛流行,疫情常态化防控进入一个新的阶段。普外科由于疾病范围广、急危重症多,是疫情期间社会面就医需求最为迫切的主要专科之一。基于现有的研究证据和临床实践经验,提出安全开展普外科手术的对策。首先,宏观策略上,病房应进行分区布置,并合理制定急诊和择期手术病人收治流程。其次,术中防护的技术细节方面,需重点注意防护装备穿脱、手术烟雾处理、手术标本转运等关键环节。最后,还应重视职业暴露的预防和处置。     

腹腔镜肝左外叶供肝获取术中供肝血管影像学解剖特征及其临床意义

目的探讨腹腔镜肝左外叶供肝获取术中供肝血管的影像学解剖特征及临床意义。方法采用回顾性描述性研究方法。收集2016年10月至2018年12月复旦大学附属华山医院收治的39例活体肝移植供者的临床资料;男10例,女29例;年龄为(31±7)岁。同时收集39例活体肝移植受者的临床资料;男26例,女13例;年龄为8个月(4~68个月)。供者术前常规行腹部增强X线计算机体层摄影术检查、三维血管重建判断供肝血管解剖情况。供者均施行腹腔镜肝左外叶供肝获取术。观察指标:(1)术前影像学检查三维血管重建情况。(2)手术情况。(3)随访情况。采用门诊方式对受者进行随访,了解受者肝移植后并发症情况。随访时间截至2019年10月。正态分布的计量资料以±s表示,组间比较采用t检验。偏态分布的计量资料以M(范围)表示。计数资料以绝对数或百分比表示。结果(1)术前影像学检查三维血管重建情况。39例供者术前影像学检查三维血管重建显示肝动脉和肝静脉解剖学特征包括:①肝动脉情况为11例供者存在肝中动脉,其中5例起始于肝右动脉,3例起始于肝右动脉和肝左动脉汇合处,3例起始于肝左动脉。2例供者肝左动脉解剖变异,均存在副肝左动脉,起始于胃左动脉。26例供者无肝中动脉,肝左动脉无解剖变异。②肝静脉情况:9例供者肝左静脉和肝中静脉分别汇入下腔静脉。7例供者存在肝左静脉左上缘支。23例供者肝左静脉与肝中静脉共干汇入下腔静脉。(2)手术情况。①39例供者均成功施行腹腔镜肝左外叶供肝获取术,手术时间为(160±32)min,术中出血量为(142±74)mL。②11例有肝中动脉供者中,8例为肝左动脉优势型,留取肝左动脉用于肝移植术中肝动脉吻合重建,3例肝中动脉起始于肝左动脉,留取肝左动脉和肝中动脉共干用于肝移植术中肝动脉吻合重建。2例肝左动脉解剖变异供者中,1例为副肝左动脉优势型,1例为肝左动脉优势型,分别留取副肝左动脉和肝左动脉用于肝移植术中肝动脉吻合重建。其余26例供者留取肝左动脉用于肝移植术中肝动脉吻合重建。③39例供者中,11例术中行肝左静脉优先入路,28例术中行非肝左静脉优先入路。肝左静脉优先入路供者手术时间和术中出血量分别为(147±22)min和(110±44)mL,非肝左静脉优先入路供者上述指标分别为(169±33)min和(154±81)mL,两者上述指标比较,差异均有统计学意义(t=4.19,2.81,P<0.05)。(3)随访情况。39例受者均获得术后10个月的随访,随访期间未出现肝动脉吻合口出血、狭窄,以及由肝动脉供血不良引起的缺血性胆管损伤和胆道狭窄等并发症,也未出现肝静脉流出道狭窄相关并发症。结论腹腔镜肝左外叶供肝获取术前影像学检查三维血管重建可发现肝中动脉和肝左动脉解剖变异,指导手术入路的选择。腹腔镜肝左外叶供肝获取术对于符合条件的供者推荐采用肝左静脉优先入路,可缩短手术时间、减少术中出血量。     

超声刀在不同类型肝切除术中的应用选择

目的比较开放手术中超声刀法和钳夹法离断肝实质以及开放手术对比腹腔镜手术中应用超声刀离断肝实质对于控制出血的效果。方法收集2019年1月至2019年6月在复旦大学附属华山医院普外科同一手术小组因肝脏肿瘤接受肝脏切除手术的263例病人的临床病理资料。观察开放手术中超声刀法和钳夹法离断肝实质的两组病人,以及开放手术和腹腔镜手术中应用超声刀离断肝实质的两组病人,比较其手术时间、术中出血量、肝门阻断时间、术后肝功能恢复和并发症的发生情况。结果组间比较,病人基本的临床病理资料差异均无统计学意义;其手术时间、肝门阻断时间、术后肝功能恢复以及术后并发症发生率方面差异也无统计学意义。开放超声刀组术中出血量明显多于腹腔镜超声刀组[(285±76)ml比(207±53)ml,P=0.02]。虽然总体比较开放超声刀组和开放钳夹法组两组之间的术中出血量没有明显差别[(285±76)ml比(251±58)ml,P=0.27],但是分层分析显示在肝硬化较重的S2~S4级病人中,开放超声刀组的术中出血量明显多于开放钳夹法组[(323±82)ml比(263±63)ml,P=0.03];在脂肪肝病人中,开放超声刀组的术中出血量也明显多于开放钳夹法组[(309±81)ml比(259±71)ml,P=0.04]。结论超声刀在腹腔镜下使用较开放手术更能体现其优势,开放手术中肝硬化和脂肪肝较重的病人不推荐使用超声刀。     

肝癌免疫微环境与免疫治疗：研究进展与发展趋势

肝癌微环境主要由肿瘤相关巨噬细胞、肿瘤相关中性粒细胞、骨髓源性抑制细胞、肿瘤相关成纤维细胞和肿瘤浸润性淋巴细胞等细胞组分,以及细胞外基质、细胞因子等非细胞组分组成。免疫微环境在肝癌进程、免疫逃逸和治疗抵抗中发挥重要作用。近期,以调变炎症免疫微环境为基础的免疫治疗取得突破性进展,免疫疗法的出现为肝癌治疗提供了全新的选择,但仍存在客观缓解率较低、不良反应多和耐药问题。因此,深入研究微环境在肝癌发生发展中的作用及探索免疫治疗的未来发展趋势可提高现有治疗手段的应答率,对肝癌精准诊断与治疗有重要的理论价值和临床意义。     

乙型肝炎性肝癌和酒精相关性肝癌患者外周血中T细胞亚群表达差异和价值

目的:分析乙型肝炎性肝癌（HBV-HCC）和酒精相关性肝癌（ALC-HCC）患者外周血中T 细胞亚群表达差异和价值。方法:将2016年07月至2018年10月期间于本院接受诊治的65例乙型肝炎性肝癌患者作为HBV-HCC组,另选择同期于本院接受诊治的58例酒精相关性肝癌患者作为ALC-HCC组。经全自动生化分析仪及流式细胞仪对两组患者的T细胞亚群指标表达情况进行检测,并对比分析两组患者的肝功能Child-Pugh分级。结果:两组患者的肝功能Child-Pugh分级对比,差异无统计学意义（P＞0.05）;HBV-HCC组患者外周血中CD3+、CD8+、CD4+CD45RA+值高于ALC-HCC组,但外周血中CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+、CD8+CD28+值低于ALC-HCC组,差异有统计学意义（P＜0.05）;单因素分析发现,患者年龄、BMI、手术类型、临床分期、原发病灶大小、血管浸润及生存时间中位数与患者预后存在相关性,差异有统计学意义（P＜0.05）;多因素Logistic回归分析发现,患者年龄≥60岁、BMI＞24 kg/m2、开腹手术、临床分期、原发病灶＞3.6 cm、血管浸润及生存时间中位数＜72个月是影响患者生存质量的独立因素,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:乙型肝炎性肝癌和酒精相关性肝癌患者外周血中T 细胞亚群表达具有明显差异,能视作临床评判肝癌患者病情演变及疗效、预后的重要指标。