体外循环技术在胸科复杂手术中的应用探讨

目的:总结体外循环(CPB)在胸科复杂手术中应用的技术特点及经验、教训,探讨安全有效的技术支持.方法:2006年1月至2009年7月,12例患者在体外循环辅助下完成肿瘤扩大切除术,其中肺癌侵及心房行肺癌根治术+心房部分切除术5例;肺癌侵及上腔静脉行肺癌根治术+上腔静脉部分切除重建术3例;气管肿瘤行气管肿瘤切除术+气管重建术4例.CPB技术采用浅低温体外循环8例;股动脉-静脉体外膜肺氧合(FA-V ECMO)呼吸支持4例.结果:浅低温体外循环时间27-78min,平均时间39.00min;ECMO呼吸支持时间36-60min,平均48.25min;术后呼吸机辅助呼吸1260-2880min,平均2203.64min.术中死亡1例(肺癌侵及左+右心房行肺癌根治术+左心房部分切除术+右心房部分切除术),其余手术均获成功.术后随访1月至3年,未见复发、转移及死亡.结论:CPB是胸科某些复杂手术有效的辅助技术,可以提高手术成功率.     

非小细胞肺癌组织ABCC10的表达及其与耐药相关性的研究

目的:检测ABCC10在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,探讨其与组织学类型、分级和TNM分期的关系,检测相应癌组织对化疗药物的敏感性.方法:采用免疫组化EnVinsion法检测ABCC10在75例NSCLC组织中的表达,进行统计学分析.采用MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与ABCC10表达的相关性.结果:ABCC10主要定位于胞膜上和胞质中.鳞癌、腺癌阳性率分别为77.5%和85.7%,两者差异有统计学意义,P=0.007.鳞癌、腺癌不同病理分级、TNM分期间ABCC10表达差异均有统计学意义(P=0.000、0.003、0.009和0.032).NSCLC组织的耐药性试验结果与其相应组织中ABCC10的表达做相关性检验,多西他赛、紫杉醇、长春瑞滨、长春新碱、顺铂差异有统计学意义(P=0.000),相关系数分别为0.674、0.633、0.610、0.565和0.532.结论:ABCC10在NSCLC组织中高表达,其中腺癌表达高于鳞癌,表达的高低与组织学类型、分级,TNM分期有关,很可能与NSCLC化疗药物耐药有关.     

非小细胞肺癌中NOK蛋白表达的临床意义

目的:检测NOK蛋白在非小细胞肺癌中的表达,分析其表达率与病理分型、分级及临床TNM分期间的关系,为研究NOK的功能及其机制提供临床证据.方法:采用免疫组织化学EnVinsion法检测NOK蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达.结果:免疫组化结果显示NOK阳性表达主要位于胞质中.NSCLC中NOK总阳性率68.1%,癌旁组织阳性率只有12.1%,差异性非常显著(P=0.000);肺鳞癌和腺癌总阳性率分别为60.49%、78.33%,两者差异显著(P=0.009);鳞癌中分化、低分化阳性率分别为51.1%、72.22%,差异显著(P=0.01),腺癌的高、中、低分级的阳性率分别是 20.0%、79.5%、100%,经Kruskal-Wallis H检验差异性非常显著(P=0.001);NSCLC(鳞癌、腺癌)TNM分期Ⅱa、Ⅱb、Ⅲa、Ⅲb的阳性率,经Kruskal-Wallis H检验其差异性非常显著(P=0.000).结论:NOK在肺鳞癌、腺癌中高表达,表达的高低与病理分型、分级及临床TNM分期(转移)有关.     

食管鳞癌组织中V-ATPase的表达及其与化疗药物耐药相关性探讨

目的:探讨V-ATPase在食管鳞癌中的表达及其病理分级、TNM分期中的差异性;检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与V-ATPase表达的相关性,为进一步研究V-ATPase耐药性及其机制提供依据.方法:采用免疫组化EnVinsion法检测V-ATPase在66例食管鳞癌中的表达,MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与V-ATPase表达的相关性.结果:V-ATPase阳性表达主要定位于胞膜上和胞质中,总阳性率68.18%,病理分级和TNM分期三组间的表达差异性非常显著,P值各为0.003、0.000,分级各两组间的检验除Ⅱ与Ⅲ组间差异性不显著(P=0.06)外,其余组间的P值均小于0.05;TNM分期中除Ⅱb与Ⅲ间的差异性不显著外(P=0.368),其余组间P值均为0.000.转移组与非转移组相比差异性非常显著(P=0.000);环磷酰胺、5-氟尿嘧啶、吉西他滨、阿霉素、丝裂霉素、长春瑞滨、紫杉醇、羟喜树碱、顺铂、卡铂化疗药在食管鳞癌组织中药物敏感性试验结果与其相应组织V-ATPase表达相关检验,除丝裂霉素、紫杉醇外,其余P值均<0.05,相关系数rs除紫杉醇外均小于-0.30,即除丝裂霉素、紫杉醇外都有较好的相关性.结论:V-ATPase在食管鳞癌中高表达,表达的高低与病理分级、TNM分期、淋巴转移相关联,很可能与食管鳞癌化疗药物耐药有关.     

非小细胞肺癌组织ABCG4表达与耐药的相关性研究

目的:探讨ABC膜转运蛋白ABCG4在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与临床病理因素和化疗药物敏感性的相关性.方法:免疫组化EnVinsion法、免疫荧光法检测ABCG4在92例NSCLC组织中的表达,激光共聚焦显微镜观察其定位;MTT法检测相应癌组织对化疗药物的敏感性,分析其与ABCG4表达的相关性.结果:ABCG4阳性表达主要定位于胞膜和胞质,鳞癌阳性率为 67.3%(33/49),腺癌为81.4%(35/43),两者差异有统计学意义,P=0.001;鳞癌Ⅱ期阳性率为41.7%(10/24),Ⅱ～Ⅲ期为92.0%(23/25),差异有统计学意义,P=0.000;腺癌中高分化阳性率为76.7%(23/30),低分化为92.3%(12/13),差异有统计学意义,P=0.033.环磷酰胺、吉西他滨、多柔比星、紫杉醇和顺铂在NSCLC组织中药物敏感性试验结果与其相应组织ABCG4表达相关性检验,P均<0.05,rs均<-0.3,其中鳞癌中rs除紫杉醇外(-0.23)均<-0.3,而腺癌也均<-0.3.结论:ABCG4在NSCLC组织中高表达,表达的高低与病理分类、分级有关,并很可能与NSCLC化疗药物耐药有关.中华肿瘤防治杂志,2009,16(1):31-35     

RNAi沉默肺癌细胞中VEGF的表达治疗肺癌机制的初步研究

目的：探讨RNAi干涉沉默肺癌细胞中VEGF的表达治疗肺癌机制.方法：将pSilencerTM-3.1-VEGF分别稳定转染入人肺癌细胞株A549,建立稳转细胞系.通过RT-PCR检测Bcl-2和Bax的mRNA的水平.免疫印迹方法检测稳转的人肺癌细胞株A549中P53,Bcl-2和Bax的表达.流式细胞仪检测稳转的人肺癌细胞株A549细胞系的凋亡.结果：稳定转染pSilencerTM-3.1-VEGF的人肺癌细胞株A549细胞系中VEGF的表达明显下调.稳转的人肺癌细胞株A549细胞系中P53,Bcl-2和Bax的表达无明显变化,未观察到明显的细胞凋亡现象.与对照组比较,在人HUVEC细胞系的作用下,稳定转染的人A549细胞虽Bax的表达未发生变化,但P53表达明显增高,Bcl-2表达下调,并且呈现细胞凋亡现象.外源性VEGF能够增加Bcl-2的表达,并导致P53表达下调.结论：RNAi沉默肺癌细胞中VEGF的表达未影响肺癌细胞自身的变化,其对肺癌发展的抑制可能是通过抑制了血管内皮细胞上的VEGF/VEGFR通路,从而引起了肺癌细胞的凋亡.     

对侧肺内有小结节非小细胞肺癌的外科治疗

回顾性分析对侧肺内有小结节的非小细胞肺癌（NSCLC）19例（鳞癌13例，腺癌6例），对侧肺内小结节术前检查不能确定为转移性肿瘤。采用外科手术加放、化疗综合治疗。术后复查对侧肺内小结节数目和大小无明显变化者17例，数目增多且直径增大考虑为转移者2例，肺内原位复发1例，肺外转移2例，1a、3a生存率为70．2％与50．6％。认为对侧肺内有性质不能明确小结节的NSCLC应积极手术治疗，结合术前和（或）术后放、化疗等综合治疗，可获满意效果。     

白细胞介素-10对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨白细胞介素-10(IL-10)对大鼠移植肺再灌注损伤的保护作用及机制. 方法: 将SD大鼠36只随机分为3组,每组12只,即假手术对照组(Control)、肺移植组和肺移植加IL-10处理组. 观察受体气管内滴入IL-10对移植肺再灌注损伤的保护作用. 肺功能指标包括血氧分压、肺湿干重比、肺通透性指数、支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞计数和分类;ELISA法检测受体血清中肿瘤坏死因子α(TNFα)含量. 结果: 肺移植术后1 h,肺湿干重比、肺通透指数和BALF中中性粒细胞百分比分别为(6.57±0.89)、(23.49±5.13)×10-4和(49.84±6.53)%,显著高于对照组(P﹤0.01),经气管内给予受体大鼠IL-10可明显降低上述指标至(4.23±0.58)、(15.96±3.04)×10-4和(20.33±4.26)%(P﹤0.01);肺移植组血清TNFα含量(μg/L)为(0.86±0.11),较对照组显著升高(P﹤0.01),IL-10可明显降低血清TNFα水平至[(0.39±0.05),P﹤0.01]. 结论: IL-10对移植肺缺血/再灌注损伤有显著的保护作用,与其抑制中性粒细胞激活和炎性因子TNFα分泌有关.     

抗血管内皮生长因子多位点核酶的合成及其体外切割作用

目的: 设计合成血管内皮生长因子多位点核酶,探讨其对靶RNA的切割作用.方法: 利用计算机辅助设计针对VEGF165的3个单位点核酶 (Rz1, Rz2, Rz3) 和联合型多位点核酶 (Rz123),构建其自剪切转录载体,观察多位点核酶对靶RNA的切割作用.结果: 构建的多位点核酶自剪切转录载体在体外转录中,顺式核酶发生了自身剪切,并释放出正确的目的核酶,多位点核酶可切割靶RNA,且效率高于单一核酶,其切割效率分别为 (37±10)% (Rz1), (51±8)% (Rz2 ), (68±15)% (Rz3) 和(88±11)% (Rz123).结论: 抗血管内皮生长因子多位点核酶体外可联合切割靶RNA,具有较高的生物活性.     

L-精氨酸在供肺离体保存中的作用

目的:探讨NO前体L-精氨酸(L-Arg)在供肺离体保存中的作用及可能机制. 方法:将实验犬10只随机分为2组,每组5只,对照组以4℃ euro-collins(EC)液灌注及保存供肺,实验组以4℃含L-Arg(2 g/L)的EC液灌注及保存供肺. 分别于肺离体低温保存30,60,120,180和240 min后取材,测定不同时间点NO、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量变化及240 min肺组织的湿干质量比(W/D)和超微结构的改变. 结果:两组在不同时间点NO,SOD,MDA的含量和W/D有显著性差异(P<0.05, P<0.01);实验组肺组织中NO及SOD含量明显增高,MDA含量显著降低. 随着时间的延长,NO,SOD均有下降趋势,但实验组下降幅度较对照组小. MDA均轻度上升,但实验组上升幅度较对照组小. W/D测定及光镜检查发现,实验组损伤明显轻于对照组(P<0.05). 结论:在EC液中加入L-Arg用于离体肺的灌注和保存,能明显减轻供肺损伤,其机制可能与NO生成增加、氧自由基生成及清除过程的变化有关.