两次骨髓干细胞移植治疗大面积急性心肌梗死的疗效观察

目的探讨两次细胞移植治疗大面积心肌梗死患者的疗效。方法35例大面积急性心肌梗死患者(LVEF<40％),成功实施急诊PCI术后3-7 d,行uRI及SPECT后,随机分为3组。A组11例单次细胞移植组患者于PCI术后3-7 d施行细胞移植,B组12例两次细胞移植组患者分别于PCI术后3-7 d及术后3个月接受细胞移植, 12例对照组患者在相同时间接受0．9％氯化钠溶液冠脉内注射。结果随访12个月时,未发现与重复细胞移植相关的不良反应。MRI结果发现,与对照组相比,单次移植组和两次移植组LVEFF变化值均显著升高[(2．9±2．0)％比(7．1±1．5)％比(11．7±2．7)％,P<0．01],而两次移植组较单次移植组变化更为显著(P<0．01)。同时,MRI显示两次移植组梗死心肌面积、SPECT显示心肌灌注面积改善幅度均优于其他两组(P<0．01)。结论两次骨髓干细胞移植治疗对于大面积急性心肌梗死患者是安全可行的,可在一次移植的基础上进一步改善心脏功能。     

SHU555A标记间充质千细胞心肌内磁共振成像的策略优化

目的目前研究表明,超顺磁性氧化铁颗粒标记干细胞后,可进行心肌内移植磁共振活体示踪,但由于标记效率较低,加上大动物心电门控和呼吸控制效果较差,磁共振图像质量差强人意。本实验采用SHU555A(Resovist)纳米微粒标记猪骨髓间充质干细胞(MSCs),对标记方法和标记细胞磁共振成像进行方法学优化,以期提高磁共振成像质量。方法①细胞磁标记方法的优化:分离培养猪MSCs。将SHU555A和非特异性转染剂PLL以1:0．03的比例用无血清的DMEM培养液稀释,制成含铁终浓度分别为0、25、50、100和200 g／mL的SHU555A-PLL标记培养液,室温下轻摇混合60 min,形成SHU555A-PLL复合物,标记猪MSCs 24 h以确定最佳标记浓度;然后以该浓度与猪MSCs分别共孵育0、2、4、8、16、24和48 h,以确定最佳标记时间。反映不同条件下标记效率和标记毒性的检测指标包括:普鲁士蓝染色、细胞电子显微镜检查、细胞铁浓度测定(原子吸收分光光度仪)、锥虫蓝排除试验、细胞毒性和增殖活性测定(CCK-8试验)。②标记细胞心脏移植的磁共振成像优化:开胸结扎前降支建立猪急性心肌梗死模型10头,每头直视下经心外膜向左室梗死交界区心肌内缓慢注射(1-10)×106细胞,每点150μL,共3点。对植入猪心肌内的标记细胞进行体内磁共振成像。比较T2 * WI-Flash2d(快速小角度反转梯度回波序列)、T2*WI-MAP和钆喷酸葡胺静脉注射后T2*WI-Flash2d等3种成像方法的图像质量。结果①MSCs平均含铁量随着培养液中SHU555A浓度的增加而升高;但SHU555A浓度增加到100 g／mL时,细胞活力开始下降(P<0．01),并可见较多蓝染铁颗粒粘附于细胞表面甚至游离于细胞外;进一步增加到200 g／mL时,细胞存活率和细胞活力均下降(P分别<0．05、0．01)。MSCs平均含铁量随着共孵育时间的增加而相应升高:但共孵育48 h时,细胞存活率降低(P<0．05)。电子显微镜检查显示, 50:1．5μg／mL SHU555A-PLL 24 h标记方案在细胞和亚细胞水平未发现氧化铁的毒性作用。该方案体外磁共振T2*WI-GRE检测闽值为7．5×104细胞。②标记细胞心肌内移植磁共振成像发现,T2*WI-Flash2d图像平均评分为(2．00±0．82)分;72*WI-Map成像、钆喷酸葡胺注射后T2*WI-Flash2d图像平均评分均为(2．60±0．84)分,明显优于前者(P=0．024)。结论50:1．5μg／mL SHU555A-PLL培养液与猪MSCs共孵育24 h是合适的标记方案。1．5 T磁共振成像仪72*WI-Flash2df笋列可对植入心脏的磁标细胞进行活体显像,T2*I-Map成像、钆喷酸葡胺注射后T2*WI-Flash2d成像可显著提高图像质量。     

乙醛脱氢酶2抑制剂daidzin对大鼠心肌细胞缺氧损伤作用的机制

目的检测乙醛脱氢酶2(ALDH2)被daidzin抑制时对大鼠心肌细胞在缺氧状态下发生凋亡和信号转导的影响,验证乙醛脱氢酶2 (ALDH2)在此过程中所起的作用．方法在确定daidzin的最佳抑制浓度后,运用心肌细胞缺氧模型,比较大鼠心肌细胞在单独缺氧和经ALDH2特异性抑制剂daidzin预处理24 h后缺氧的凋亡和MAPK信号通路的改变。酶活性检测采用乙醛代谢法、ROS的检测用C400测定,凋亡的测定通过用Hoechest 33324、免疫荧光标记的流式细胞仪和TUNEL试剂盒检测,MAPK信号通路酶(ERK1／2、JNK、P38)磷酸化的改变用Western印迹法检测。结果60μmol/Ldaidzin浓度是ALDH2酶活性被抑制而细胞无凋亡发生的最佳工作浓度。在daidzin (60μmol／L)预处理24 h后再经缺氧诱导,比单独缺氧引起的心肌细胞凋亡更为明显:表现为在Hoechest 33324染色中,细胞核溶解和核碎裂(P<0．05),在FACS和TUNEL的检测中,凋亡细胞明显增加(P<0．05),经凋亡后的死亡细胞有增加趋势但差异无统计学意义,同时与MAPK信号通路有关的磷酸化ERK1／2、JNX和P38的酶活性均表达增强。结论daidzin使ALDH2酶活性降低可增加心肌细胞对缺氧导致凋亡的易感性,其机制是与细胞ROS和凋亡的增加及MAPK信号通路的激活有关。ALDH2对缺氧引起的细胞凋亡损伤具有保护作用。     

性分化与性发育异常13例分析

目的:探讨性分化和发育异常的临床特点,并对腹腔镜在治疗中的应用进行评价。方法:对我院13例行腹腔镜切除性腺的性分化和发育异常病例资料进行分析。结果:13例均为女性外阴,含有Y染色体或Y的成分,性腺位于腹腔内或腹股沟内,4例为条索状原始性腺,9例为睾丸。3例有始基子宫和输卵管。性激素水平符合绝经期表现。11例经腹腔镜完成手术,2例转传统手术,手术后1~2天出院。结论:含有Y染色体或Y成分的性腺位于腹腔或腹股沟内并且丧失正常功能,是手术切除的指征,腹腔镜手术具有微创和术后恢复快的优势。     

骨质疏松症的性激素补充疗法

绝经后骨质疏松症属于原发性骨质疏松症Ⅰ型,主要表现为单位体积骨量减少,骨组织显微结构异常而导致骨折危险性增加的一种疾病。由于该病的隐匿性,这种疾病被认为是严重影响老年人健康的一个“无声的杀手”。 绝经后骨质疏松症的发生主要与以下两方面因素相关:1.绝经前骨量峰值的高低。骨峰值与遗传、生活     

柴胡注射液致急性肾衰竭1例

患儿,女,11岁,因发热5 d,昏迷1 d入院。5 d前出现 发热,体温38.5℃,村医予肌注安痛定、柴胡各1.5 ml／d,连续3 d,发热控制。患儿食欲较差,予生理盐水500 ml、柴胡14 ml静滴,输约250 ml时,患儿面部、手足部出现出血点,未作处理,约2 h后出现疼痛、烦躁、软瘫、二便失禁,急送当地医院,诊为过敏性休克。予多巴胺、地塞米松静滴后转我院,患儿近24 h无尿,频繁呕吐咖啡样物。查体:神志不清、烦躁不安,体温37.0℃,脉搏不能触及,呼吸     

增殖细胞核抗原指数监测激素替代治疗子宫内膜的变化

目的：了解核分裂率与增殖细胞核抗原（PCNA）指数两项指标在监测子宫内膜变化中的作用。方法：选择正常月经周期内增殖期,分泌期,绝经后子宫内膜;观察接受周期性激素替代治疗后子宫内膜中两项指标的变化。结果：显示PCNA指数可敏感,可靠的反映月经周期内子宫内膜的变化。同时也能够反映激素替代治疗中,加用孕激素不同时间子宫内膜的增殖与抑制变化。结论：（1）PCNA指数可反映子宫内膜的增殖与抑制情况。（2）PCNA指数可用于激素替代治疗中对子宫内膜的监测。     

79例XY性腺发育异常患者性腺肿瘤发生情况分析

目的 探讨表型为女性、染色体含有Y或Y成分的性腺发育异常患者的性腺肿瘤发生情况.方法 1989年10月至2005年12月间于北京协和医院妇产科因性腺发育异常手术切除双侧性腺的患者共79例,所有患者均取外周血进行淋巴细胞染色体核型分析、Y基因性决定区检测以及相关激素和酶检测,影像学检查了解性腺位置.行经腹或腹腔镜下性腺切除术,所有手术标本均行病理检查.结果 79例患者中,雄激素不敏感综合征患者41例,其中发生精原细胞瘤1例、支持细胞腺瘤2例,占7%;170r羟化酶缺乏症患者14例,其中发生支持细胞腺瘤1例,占7%;XY单纯性腺发育不全患者4例,其中发生性腺母细胞瘤及无性细胞瘤1例,占1/4;XO/XY性腺发育不全患者16例,其中发生精原细胞瘤及性腺母细胞瘤1例,占6%;睾丸退化患者4例中无肿瘤发生.发生肿瘤的性腺多位于盆腔内,发生肿瘤的年龄集中于15～23岁.结论 表型为女性、染色体含有Y或Y成分的性腺发育异常患者易发生性腺母细胞瘤和生殖细胞肿瘤,一旦确诊宜及早切除双侧性腺.     

关节镜下综合治疗复发性髌骨脱位

我院从2004年至今应用关节镜下髌外侧支持带松解，内侧支持带紧缩，胫骨结节移位术综合治疗复发性髌骨脱位12例，疗效确切，现报道如下。