急性Q热并横纹肌溶解1例

 Q热是由贝纳柯克斯体感染引起的人畜共患疾病,临床表现可引起肺炎、肝炎、心肌炎、心内膜炎等,但合并横纹肌溶解病例相对少见。贝纳柯克斯体感染诊断相对困难,而高通量测序,包括纳米孔三代测序(ONT)在内,可作为诊断Q热较为敏感的检测方法,早期诊断和及时治疗,一般Q热预后良好。本文报告1例经ONT检测确诊为急性Q热合并横纹肌溶解的病例,该病例经治疗后病情好转出院。     

现代菌种鉴定技术在药品控制菌检查中的比较

目的探索药品控制菌检查中适合的菌种鉴定方法。方法采用VITEK 2 Compact全自动微生物生化鉴定系统和3500 Micro Seq全自动微生物基因分型鉴定系统,对控制菌检查中常见的32株菌进行生化反应鉴定和16S r DNA测序鉴定,并对鉴定结果为沙门菌的菌株进行血清分型。结果 2种方法鉴定结果基本一致,部分菌株生化反应鉴定只能至属,而16S r DNA测序可以鉴定至种甚至亚种水平,沙门菌的分型需采用血清学鉴定。结论药品控制菌检查可结合16S r DNA测序和生化鉴定,选择不同控制菌适合的鉴定方法。     

高通量血液透析对血液透析不宁腿综合征患者43例观察

目的:观察高通量血液透析对血液透析不宁腿综合征(RLS)患者的影响。方法:选择2010年1月—2014年12月常规尿毒症血液透析有RLS患者43例,随机分为常规血液透析组(HD组)20例和高通量血液透析组(HFHD组)23例。HD组每周行HD治疗3次,每次4 h,采用费森F60透析器;HFHD组为每周行高通量血液透析治疗1次,HD治疗2次,每次均为4 h,采用费森F800透析器。疗程为8周。观察患者RLS程度判断改变及生化指标变化。结果:两组治疗前生化指标及RLS评分差异均无统计学意义,经过治疗2个月后,HFHD组与HD组比较,血肌酐、血磷、甲状旁腺素(PTH)及RLS评分明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。且HFHD组治疗前后比较,血肌酐、血磷、PTH及RLS评分明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。HD组治疗前后比较,血肌酐和PTH明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:高通量血液透析可能通过充分清除尿毒症毒素,从而对血液透析RLS患者具有一定的治疗作用,其机制有待于进一步研究。     

不同透析方式对维持血液透析患者微炎症状态的影响

目的研究维持血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者在不同血液透析方式中,尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、白蛋白(albumin,Alb)、β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)、白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、C反应蛋白(C-reaction protein,CRP)及降钙素原(procalcitonin,PCT)的浓度变化,了解透析方式对维持血液透析患者微炎症状态的影响。方法选择内蒙古兴安盟人民医院60例MHD患者,男34例,女26例,年龄18~75岁。按透析方式将60例患者分为2组。高通量血液透析(high-flux hemodialysis,HFHD)组32例,使用Fx80聚砜膜进入HFHD;血液灌流(hemoperfusion,HP)联合血液透析(hemodialysis,HD)组28例,使用F6聚砜膜进入HP+HD。在所有患者均接受透析治疗6个月后分别采集2组患者血样检测BUN、SCr、β2-MG、Alb、IL-1、IL-6、CRP及PCT水平,采用方差分析进行比较。结果 2组的年龄、性别、透析龄比较,无统计学意义(P0.05),具有可比性。高通量血液透析与血液灌流联合血液透析比较,BUN、SCr、、Alb水平差异性无统计学意义(P0.05);IL-1、IL-6、CRP、PCT、β2-MG水平比较差异性均有统计学意义(P0.05)。结论高通量血液透析较血液灌流联合血液透析患者,更好的改善微炎症状态,提高生存质量,而且不会明显增加患者的经济负担。     

MHC捕获测序探寻慢性肾功能衰竭的致病基因

目的 研究慢性肾功能衰竭患者人类白细胞抗原(HLA)基因,以获得慢性肾功能衰竭的致病突变.方法 使用新的MHC捕获技术结合新一代高通量测序技术对15例慢性肾功能衰竭患者和15名健康对照的HLA区域基因进行捕获测序.结果 慢性肾功能衰竭的致病与HLA-A* 02∶01∶01、B*15∶01∶01和DRB1* 09∶01∶02关联,且这三个基因相互独立与慢性肾功能衰竭关联.结论 HLA-A*02∶01∶01、B* 15∶01∶01和DRB1* 09∶01∶02与慢性肾功能衰竭相关.采用MHC基因捕获技术结合下一代高通量测序技术研究慢性肾功能衰竭的基因易感性是可行的.     

基因捕获联合高通量测序技术在甲基丙二酸血症诊断中的应用

目的 探讨新一代基因测序平台(HiSeq2000)在甲基丙二酸血症(MMA)诊断中的价值.方法 1.采集已经临床确诊的9例MMA患儿外周血并提取DNA,将设计好的基因捕获探针与患儿DNA文库混合,然后利用基因捕获联合高通量测序分析技术对有机酸代谢相关的48个基因全部外显子区域进行测序.2.获得原始数据,去除接头和过滤低质量数据,对数据进行SNP、InDel等分析,并采用Sanger测序方法对异常位点进行测序验证.3.气相色谱-质谱联用分析技术对尿液标本的有机酸测定及其他辅助检查.结果 1.突变基因:7例存在MMACHC基因突变,7例患儿中共检测出7种突变,包括c.482G＞A、c.567_568insT、c.609G＞A、c.440_ 441del、c.80A＞G、c.315C＞G、c.90G＞A,其中c.440_441 del为未见报道突变;1例存在甲基丙二酰辅酶A变位酶(MUT)基因突变,均为内含子异常,分别是c.754-1G＞C、c.1677-1G＞A,其中c.754-1G＞C为未见报道突变;1例未检测到突变.2.临床症状:9例患儿均存在智力运动发育迟缓,伴抽搐3例,反复顽固性代谢性酸中毒、头痛及面瘫、反复性溶血各1例.脑电图异常9例,头颅磁共振异常8例,尿液中甲基丙二酸水平均升高(273.4 ～146 022.8倍),血同型半胱氨酸水平增高8例(27.13～ 396.84 μmol/L,正常＜20 μmol/L).3.Sanger测序验证:均符合新一代测序平台结果,无假阳性存在.结论 1.进一步证明c.609G＞A突变位点为中国MMA合并同型半胱氨酸血症患儿的热点突变位点.MMA基因突变类型较多,与临床症状无明显相关性.2.推测MMACHC基因c.440_441 del突变及MUT基因c.754-1G＞C突变为新发突变.3.基因捕获联合高通量基因测序技术一次性捕获突变基因数量大,获取疾病的遗传信息量广,具有高通量、高灵敏度、高效等特点,适合于MMA患儿检测,也可为其他儿科临床常见遗传性疾病的检测提供参考.     

c血清型变形链球菌致龋相关基因/DNA片段的批量克隆与高通量筛选

目的筛选含致龋相关基因／DNA片段的阳性克隆，为探究变形链球茵致龋的分子机制奠定基础。方法将抑制消减杂交方法获得的高毒力株特异的消减PCR产物与T／A栽体pCR2．1连接，将连接产物转化E．coli TOP0F’感受态细胞，进行蓝白筛选。对96个转化子进行Colony PCR，将PCR产物点样于同一尼龙膜上，分别与地高辛标记的变形链球茵高、低毒力株基因组DNA／AluI酶切产物杂交，高通量筛选阳性克隆。结果随机挑取了96个白色或白色中央有蓝色的茵落，经过Colony PCR，其中有1个转化子的扩增产物为双带，其余均为0．2～2kb之间的单一条带。经过杂交，以与高毒力株基因组有杂交信号，而与低毒力株基因组无杂交信号或信号明显弱的转化子为阳性克隆。筛选的阳性率为50％左右，阳性克隆中含有c血清型变形链球茵致龋相关的基因／片段。结论对抑制消减杂交方法获得的变形链球茵高毒力株特异的消减PCR产物进行批量克隆和高通量筛选，获得了致龋相关的基因／DNA片段。     

益生菌对NICU早产儿的肠道菌群代谢功能及临床疾病的影响

目的 探讨益生菌对新生儿重症监护病房(NICU)早产儿肠道菌群的功能代谢及临床疾病的影响方法 选取NICU早产儿40例,随机分为益生菌组和对照组.收集两组早产儿出生第10天时的粪便标本,通过16S rRNA高通量测序对肠道菌群进行检测和分析,并比较两组早产儿发生相关临床疾病的差异.结果 与对照组比较,益生菌组早产儿第10天时肠道菌群中的双歧杆菌属与乳酸杆菌属丰度更高(P＜0.05),而梭菌属、葡萄球菌属和亲铜菌属更低(P＜0.05).功能分析中益生菌组的磷酸戊糖途径及烟酸和烟酰胺代谢功能高于对照组(P＜0.05),而坏死性凋亡功能更低(P＜0.05).且人类病原体败血症(P＜0.01)、肺炎、肠胃炎和腹泻(P＜0.05)的基因功能表达也更低.此外,益生菌组早产儿第10天时的胆红素、血红蛋白水平(P＜0.01)和腹泻、喂养不耐受的发生率(P＜0.05)均低于对照组.益生菌组败血症和坏死性小肠结肠炎(NEC)发生率也较低,但差异无统计学意义.结论 研究表明益生菌可能对NICU早产儿的肠道菌群代谢功能和临床疾病均产生有利影响,并从功能上解释了益生菌降低临床疾病风险的机制.     

Klippel-Feil综合征的临床特征及遗传学分析

目的 总结Klippel-Feil综合征(KFS)的临床特征,利用自主设计的多基因panel测序筛查KFS患者的可能致病基因,为疾病早期诊断及靶向治疗提供基础。方法 以2015年1月至2018年12月在北京协和医院明确KFS诊断的25例患者为研究对象,统计所有患者的流行病学信息、临床表现、体格检查及影像学资料,提取外周血DNA后进行多基因panel二代测序,并结合生物信息学分析探索KFS可能的致病突变。结果 25例KFS患者中,男15例,女10例,平均年龄(12.9±7.3)岁,颈椎活动受限是最常见的临床特征(12例,48%)。根据Samartzis分型,KFS Ⅲ型患者出现短颈(P=0.031)和颈椎活动受限(P=0.026)的比例明显高于KFS Ⅱ型和KFS Ⅰ型。Panel测序共在8例患者中检测到11种基因突变,包括COL6A1、COL6A2、CDAN1、GLI3、FLNB、CHRNG、MYH3、POR、TNXB,突变类型均为错义突变;未发现已报道的5种KFS致病基因(GDF6、MEOX1、GDF3、MYO18B和RIPPLY2)的突变。结论 长节段连续性颈椎融合畸形患者更易表现出短颈畸形、颈椎活动受限及临床三联征的表现,因此在临床中更应引起关注和密切随访。筛选出COL6A、CDAN1等与KFS相关的候选致病突变,扩展了KFS的已知突变谱,为进一步阐明疾病的发病机制提供参考。     

基于转录组测序和网络药理学探究青蒿琥酯干预U87和U251脑胶质瘤细胞的药效差异机制

青蒿琥酯具有干预脑胶质瘤的潜能,但其药理作用机制尚不明确。本研究首先基于U87和U251两种人源脑胶质瘤细胞,探究青蒿琥酯对细胞活性、增殖和凋亡的影响,发现青蒿琥酯对U87细胞活性和增殖能力的抑制作用强于对U251细胞; Hoechst和TUNEL细胞凋亡染色实验也发现,青蒿琥酯可以显著促进U87细胞的凋亡(P <0.05),而仅大剂量的青蒿琥酯可促进U251细胞的凋亡(P <0.01)。接着,利用青蒿琥酯处理前后的U87和U251细胞裂解液,通过转录组测序检测和差异数据分析,分别获得青蒿琥酯敏感性和非敏感性细胞株的差异基因集以及青蒿琥酯效应相关基因集,旨在挖掘青蒿琥酯对两类细胞敏感性不一的分子机制。通过构建上述各对比组差异基因互作网络和计算网络拓扑特征值,筛选药效相关的关键网络靶标;生物功能富集分析结果表明,上述关键网络靶标显著富集于多条与脑胶质瘤病理环节相关的信号通路,其中,与细胞凋亡相关的转录激活因子4 (ATF4)-DNA损伤诱导转录因子3 (DDIT3)-聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1 (PARP1)信号轴的富集显著性最高。分子对接结果也表明,青蒿琥酯与ATF4和DDI...