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目的: 构建HIV-1辅受体的配体-趋化因子RANTES和SDF-1的逆转录病毒载体,并观察在NIH3T3细胞的表达.方法: 从重组质粒pCMV-R-K-S-K中获取RANTES-KDEL-SDF-KDEL基因片段,构建RANTES和SDF-1的逆转录病毒载体pLNCX-R-K-S-K,酶切鉴定并测序.采用标准的磷酸钙共沉淀法转染包装细胞Bing, G418筛选克隆细胞,制备重组病毒液,继之感染NIH3T3细胞,计算病毒滴度.间接免疫荧光检测NIH3T3细胞中RANTES、SDF-1的表达.结果: pLNCX-R-K-S-K逆转录病毒载体酶切和测序结果与预期一致,筛选出抗性克隆,制备了高滴度的重组病毒液,间接免疫荧光证实RANTES和SDF-1可表达于转染细胞.结论: HIV-1辅受体的配体、趋化因子RANTES和SDF-1的逆转录病毒载体构建成功,重组病毒可以感染NIH3T3细胞,为下一步HIV-1感染实验打下了基础. 相似文献
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网络课程在传染病学教学应用过程中,从教与学的实际需求出发,利用多媒体形象、多样化表达及交互性强的特点,充分发挥网络交互功能,提高了学生的自主学习能力、学习兴趣、学习效率,取得了很好的教学效果.文章介绍了网络课程的实践及给传统的医学教学模式带来的启示与思考. 相似文献
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目的研究HBV adr型C区突变对机体HLA-I表达的调节机制。方法构建HBV C区突变株L97、G87、V60的真核表达载体,转染HepG2细胞,检测转染细胞中HLA-I的表达以及抗原提呈相关基因LMP2、TAP1、tapasin的mRNA表达情况。结果各转染细胞株均能有效表达HBeAg,但表达量不同,野生株高于C区突变株;各转染细胞株均有HLA-I的表达,其中以L97突变株表达量最高;TAP1 mRNA表达上调,LMP2 mRNA及tapasin mRNA均未见明显表达。结论HBV C区突变株可降低HBeAg的表达,且均能维持甚至上调HLA-I的表达,TAP1 mRNA的表达上调可能是HLA-I表达增强的原因之一。 相似文献
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目的探讨HBV C基因变异G87宿主细胞内TNF-α对HLA-Ⅰ表达的介导作用.方法用定点突变和亚克隆技术构建HBV基因组G87变异株和野生株表达载体EBO-G87和EBO-WT,经脂质体介导转染HepG2细胞.流式细胞术检测转染细胞HLA-Ⅰ表达的强度,受抗TNF-α单克隆抗体阻断的EBO-G87和EBO-WT转染细胞与未经处理的对应株转染细胞作比较.结果对照EBO-plpp空载体转染细胞表面HLA-Ⅰ荧光强度仅为1.33,未经处理的EBO-G87和EBO-WT转染细胞荧光强度增强为8.02和13.94,受抗TNF-αmAb阻断的EBO-G87和EBO-WT转染细胞荧光强度下降至4.31和7.42.结论HBV C基因变异G87上调宿主细胞HLA-Ⅰ表达部分依赖于细胞内TNF-α的自分泌效应. 相似文献
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搞好物理诊断学教学的四大要点及三点建议 总被引:6,自引:3,他引:3
物理诊断学是医学生从基础到临床的一门桥梁课 ,构架桥梁成功与否 ,直接影响临床课程的学习效果和今后学生做临床医生的水平。因此 ,教学水平和教学效果是教学组最关心的问题。一方面要把握教师活动、教学手段、教学组织的先进性、科学性和合理性 ;另一方面要帮助学生了解该学科的特点 ,指导学生如何学习。通过展示物理诊断学的教学流程 ,学生可以明确课程进展以及各阶段学习任务。讲清学习物理诊断学要求掌握的三件事 ,问诊、查体、写病历就是关于症状、体征和病历的三个问题。掌握基本概念及要点 ,注意区分容易混淆的体征。熟悉正常人体标准及正常值 ,按规定的检体顺序和手法标准完成实习课 ,弄清体征的临床意义。按病历格式要求认真完成查体记录 ,是养成书写标准病历的基础。熟知和掌握这些要点 ,会使学生积极主动地进入学习状态 ,胸有成竹地完成学习任务 相似文献
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目的:用共聚焦定量分析方法,观察拉米夫定脂质纳米粒对细胞内HBV基因表达的作用。方法:构建半乳糖修饰的十六酸拉米夫定脂质纳米粒(LAP-GSLN),将其定向导入2.2.15细胞,对导入的细胞所表达HBeAg进行间接免疫荧光染色,用共聚焦技术对其含量进行定量分析。结果:导入LAP-GSLN的细胞内HBeAg荧光量与单纯加入拉米夫定(LA)比较,导入LAP-GSLN的细胞内HBeAg荧光明明显减少。结论:LAP-GSLN与2.2.15细胞上的半乳糖受体结合,将LA导入细胞而发挥对HBeAg抑制作用。 相似文献
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