人分化相关基因Ndr3的克隆、组织表达谱及亚细胞定位研究

目的 :研究人源分化相关新基因Ndr3的克隆、组织表达谱及亚细胞定位。方法 :采用电子拼接和PCR扩增技术 ,从人 2 2周孕龄胎肝cDNA文库中获得与人Ndr1基因同源的一段表达性序列标签 ,继而从成人脑cDNA文库分离出Ndr3的全长cDNA ;采用点杂交分析和多组织Northern杂交分析方法 ,确定其组织表达谱 ;将其亚克隆入绿色荧光蛋白表达载体pEGFP_N1,用脂质体介导法转染COS_7细胞 ,确定其亚细胞定位。结果与结论 :Ndr3的全长cDNA为 2 879bp ,其开放阅读框 (ORF)编码 375个氨基酸 ,染色体定位为 2 0q12_11.2 3。Northern杂交和点杂交分析显示 ,NDR3在脑组织和睾丸中高表达 ,在肾、心肌和前列腺中有一定量的表达 ,在胚胎组织的表达较低 ,在 8种人肿瘤细胞中的表达极低。与绿色荧光蛋白融合表达的实验结果显示 ,该蛋白定位于核外胞浆内     

百草枯中毒的基础研究及救治进展

百草枯属剧毒除草剂,重度中毒患者通常出现多脏器功能损伤,后期可能出现肺纤维化,发生急性呼吸窘迫综合征而死亡,极重度中毒者可在短时间内死于多脏器功能衰竭。百草枯中毒目前尚无特效解毒药,临床救治多以对症和支持治疗为主,病死率极高。本文通过百草枯在人体内的毒物代谢动力学和中毒机制研究,对临床救治方法作一综述。 更多还原     

血脑屏障的基因组学和蛋白质组学研究进展

血脑屏障是分隔外周血和大脑的屏障,选择性地允许或阻止物质在两者间的通透。近年来陆续有研究指出,血脑屏障存在大量转运体参与重要生理物质选择性进入大脑,并且将代谢产物转运入血以维持脑内环境稳定。血脑屏障功能失调与很多脑疾病密切相关。基因组学与蛋白质组学等研究方法的介入可高通量、大规模地研究血脑屏障中的转运体,极大地加快了人们对血脑屏障在疾病发生发展中的作用以及临床治疗研究中的认识。     

大鼠肠系膜上动脉和静脉各级分支中NPY免疫反应神经纤维密度的相关分析

用免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵(GDN)增强显色技术,对大鼠肠系膜上动脉和静脉及其分支中NPY免疫反应神经纤维的形态和分布进行了研究,并用交点计数法统计了其密度。结果发现,NPY免疫反应神经纤维的密度随肠系膜上动脉和静脉分支级别的增加而增加;肠系膜上动脉和静脉中相应分支级别上的NPY免疫反应神经纤维的密度没有显著差异。     

一种对斑点和条带信号进行半定量图像分析的简便方法

对多种斑点信号(如Dot Blot信号)和条带信号(如DNA/RNA电泳条带,Northern B1ot信号,Western B1ot信号及重组蛋白的原核表达条带等)进行定量或半定量的图像分析是分子生物学实验中的日常工作之一.经过与PD Quest、Quantity One等专业软件就Dot Blot、Northern Blot等图像的分析进行对比,发现NIH开发的免费图像分析软件ImageJ能够较为准确地对斑点和条带信号进行半定量分析,从而提出了一种简便的斑点和条带信号的半定量图像分析方案.     

60Coγ射线全身照射后大鼠脑GAP-43 mRNA的表达增强

目的 研究^60Coγ射线照射后大鼠脑GAP－43表达的变化与神经再生的关系。方法 地高辛标记的cRNA探针原位杂交。结果 正常对照大鼠海马锥体细胞层有较强的阳性标记外,其他脑区仅有弥散的GAP－43mRNA弱阳性标记。8Gy^60Coγ射线照射1周后,大脑皮质、基底核、丘脑和下丘脑的大部分核团GAP－43呈中等强度的表达,照射后第4周,以上脑区的GAP－43mRNA水平明显升高,第7周GAP－43的表达逐渐减弱,但仍高于正常水平。结论 ^60Coγ射线照射致大鼠脑损伤后GAP－43mRNA表达增强,可能与损伤神经元结构再生和突触重建过程密切相关。     

戊四氮致痫大鼠脑内脑红蛋白表达的初步研究

癫痫性脑损伤导致的神经元死亡包括凋亡和坏死两种形式，缺血和缺氧是引起细胞死亡的原因之一，脑红蛋白(neuroglobin，NGB)是于2000年新发现的一种神经系统特异的单体携氧球蛋白，对氧有很高的亲和力，并在脊椎动物神经组织特异表达，缺氧诱导的。NGB表达升高具有显著的神经保护作用，     

用图像分析作交点计数的尝试

目的;探讨如何利用图像分析仪定量测量血管表面神经纤维密度。方法：对相同视野中的神经纤维分别采用灰度法和交点计数法进行测量,然后分析二者之间的函数关系,为进行统计学分析。结果：建立了测量血管表面神经纤维密度的灰度法和交点计数法之间的对数关系进行验证。结论：在图像分析仪上可以利用灰度法测量进行神经纤维密度的定量分析。     

连续多次应用丙泊酚复合维生素C对小鼠麻醉效应的影响

目的探讨连续6 d给予丙泊酚或丙泊酚配伍维生素C对小鼠的麻醉效果。方法取40只昆明鼠随机分为丙泊酚80 mg/kg
组（P80组）、丙泊酚70 mg/kg+维生素C50 mg/kg组（P70+Vc50组）、丙泊酚55 mg/kg+维生素C100 mg/kg组（P55+Vc100组）、丙
泊酚50 mg/kg+维生素C200 mg/kg组（P50+Vc200组）,共4组,各组小鼠10只,以腹腔注射给药的方式,在同一时间点连续6 d
给药,观察并记录小鼠麻醉诱导时间以及维持时间,并进行比较。结果与同天的丙泊酚组（P80）相比,给药的第1、2、3 天的
P55+Vc100组、P50+Vc200组麻醉维持时间缩短（P<0.05）。与同一组第1天麻醉维持时间相比,各组小鼠其余5 d麻醉维持时
间均缩短（P<0.01）;与同一组第2天麻醉维持时间相比,第3天P50+Vc200组麻醉维持时间缩短（P<0.01）,各组小鼠第4、5、6天
麻醉维持时间均缩短（P<0.01）。各组小鼠翻正反射消失的发生率由第1~6天逐渐下降,且各组趋势接近一致。结论维生素C
与丙泊酚配伍,可在保证麻醉效果的前提下一定程度减少丙泊酚使用剂量,同时可减少丙泊酚耐受的发生,对于减少丙泊酚麻
醉剂量相关的副作用或不良反应。
     

外显子芯片的数据分析和可变剪接预测的新算法

可变剪接（alternative splicing）是产生高等真核生物蛋白质多样性的重要分子调控机制之一,众多研究表明,可变剪接可以改变蛋白质的结构和功能从而导致多种人类疾病。外显子芯片是Affymetrix公司开发的全基因组范围内检测外显子表达的高通量芯片系统,可通过检测外显子的差异表达来推断可变剪接事件。和传统的3′基因表达芯片相比,外显子芯片不仅探针（probe）设计的密度大,而且覆盖了全转录本中所有已知和预测的外显子。外显子芯片的数据分析包含基因和外显子两个水平的分析流程以及可变剪接预测部分。由于使用常规的芯片分析方法并不能有效地预测可变剪接事件,因此本文就现有的外显子芯片分析方法和流程进行综述,并着重介绍可变剪接事件预测的新算法。