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21.
目的研究神经突起诱向因子Netrin-4的受体,并分析Netrin-1已知受体DCC和UNC5H1作为Netrin-4共受体的可能性。方法以碱性磷酸酶(AP)标记的Netrin-4为配体,分别以原代培养神经元及转染DCC和UNC5H1的COS7细胞为对象,采用亲和细胞化学技术检测Netrin-4的受体,并分析Netrin-4的受体结合动力学及受体竞争结合动力学特征。结果通过载体转染表达已知Netrin-1受体DCC和UNC5H1的COS7细胞既能被Netrin—1结合,也能被Netrin-4结合;受体结合饱和实验显示Netrin-4与其受体快速结合(15min达高峰)后缓慢解离;受体结合竞争实验显示Netrin—1能竞争Netrin-4与其受体的结合。结论DCC和UNC5H1可能是Netrin—1与Netrin-4的共受体。由于Netrin-4受体结合动力学及受体竞争结合实验显示Netrin—1与受体的亲和力高于Netrin-4,提示Netrin-4可能还存在自身独特的受体。 相似文献
22.
目的:采用碱性磷酸酶(AP4)标记技术研究netrin-4的神经导向功能和受体结合特征,并评估碱性磷酸酶作为标签分子在真核基因功能研究中的意义。方法:将netrin-4全长及3个结构域编码区cDNA克隆到碱性磷酸酶表达载体APtag4,成功构建真核表达载体AP4-netrin4、AP4-LNT、AP4-EGFL和AP4-NCT,进而在COS7细胞中表达出含有AP标签的融合蛋白,并通过神经组织块培养技术和神经元原代培养技术对其活性进行鉴定。结果:确认了netrin-4的神经突起导向功能。进一步通过对AP标签进行检测,发现netrin-4全长、LNT和NCT可与原代培养的神经元表面相结合,而EGFL不结合,说明神经元表面舍有netrin-4受体或结合位点,且可能通过LNT和NCT结构域起作用。结论:netrin-4具有明确的神经突起导向功能,在神经元表面舍有结合位点,同时发现碱性磷酸酶标签融合表达技术在真核基因功能研究方面具有一定优势。 相似文献
23.
原发性红斑性肢痛症致病基因研究进展 总被引:2,自引:0,他引:2
原发性红斑性肢痛症是一种罕见的常染色体单基因遗传病,国际范围内仅报道过6个家系及一些散发病例。该病虽无生命危险但严重影响患者生活,以肢端阵发性剧烈灼烧样疼痛以及对温度敏感为主要特征,但其发病机制一直不明。Drenth等通过家系分析于2001年将原发性红斑性的致病基因定位于Zq31-q32。在此基础上,我国学者杨勇等进一步研究发现该病的致病基因可能为1个钠离子通道基因scn9a,其他研究组针对该基因进行基因敲除后的结果也提示了该可能性。然而,由于该疾病可能具有遗传异质性,该致病基因尚未在其他家系中得到确证。更深入的分子遗传学研究结果将为原发性红斑性肢痛症的正确诊断和合理治疗提供依据。 相似文献
24.
用免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶-DAB-硫酸镍铵(GDN)增强显色技术,对大鼠肠系膜上动脉和静脉及其分支中NPY免疫反应神经纤维的形态和分布进行了研究,并用交点计数法统计了其密度。结果发现,NPY免疫反应神经纤维的密度随肠系膜上动脉和静脉分支级别的增加而增加;肠系膜上动脉和静脉中相应分支级别上的NPY免疫反应神经纤维的密度没有显著差异。 相似文献
25.
缺氧损伤是常见而又重要的病理过程,P53蛋白在缺氧调控中发挥的作用也逐渐为人们所认识。P53可在细胞核内富集并协助细胞快速应答缺氧信号,还能根据缺氧程度等因素间接决定缺氧损伤细胞的命运,促使细胞周期停滞、衰老或凋亡等。因此,P53是细胞缺氧损伤与保护过程中的重要影响因素。 相似文献
26.
NOV蛋白免疫反应阳性神经元在鲢、鸡和几种哺乳动物脑的比较发育 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究鲢、鸡、牛、犬和大鼠脑肾母细胞瘤过度表达基因(nov)蛋白免疫反应阳性神经元的比较发育。方法:免疫组织化学技术。结果:低等脊椎动物鲢脑仅有少量NOV蛋白免疫反应阳性神经元,分布于延髓的一些核团、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑NOV蛋白免疫反应阳性神经元除广泛分布于脑干外,小脑、间脑和大脑纹状体的多数脑区阳性神经元亦较多。哺乳动物牛、犬和大鼠脑NOV蛋白免疫反应阳性神经元广泛分布,脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。结论:nov基因在从低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中非常保守,提示它在脑神经元生长、分化及正常生理功能中可能具有重要作用 相似文献
27.
LinearlyoptimumseekingK-valueinthefittingofexponentialandgeometriccurves¥(陈长生)(徐勇勇)(张成岗)ChenChangsheng;XuYongyong;ZhangChengg... 相似文献
28.
29.
目的:利用细胞内脱氢酶对2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)的催化作用建立比目前常用的3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四氮唑(噻唑蓝,MTT)法更可靠的测定细胞活力的方法。方法使用不同浓度的TTC溶液测定细胞活力,并确定TTC的有效浓度范围。在计算所测定值与细胞数量函数关系的基础上,通过与传统测定细胞活力的MTT法进行比较,分析该方法的可行性。结果0.5%~1.0%浓度范围内的TTC溶液可用来测定细胞活力,测定值与细胞数量之间存在线性关系,与MTT法得到的结果基本一致,可避免MTT法测定过程中来自于细胞培养体系中其他抗氧化物质的非特异性干扰。结论 TTC可用于测定细胞活力,可替代常规的MTT法,具有操作简便,费用经济,结果可靠等优点。 相似文献
30.
应激性胃黏膜损伤(stress-induced gastric mucosal lesions)是由于手术创伤、休克、烧伤等应激引起胃黏膜保护机制与损伤机制发生失衡而出现的以溃疡或糜烂为特征的严重并发症. 其病理表现为胃黏膜广泛而表浅的糜烂,发病机制复杂,尚未完全阐明. 目前认为是由神经内分泌失调、胃黏膜保护屏障受损、损伤因子增强、细胞凋亡等多因素共同作用的结果. 本文对此作一简要综述. 相似文献