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干扰HERG钾通道表达可抑制成神经细胞瘤细胞增殖 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:采用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术抑制HERG基因的表达,探讨HERG基因编码钾通道对人成神经细胞瘤细胞(SH-SY5Y)存活及增殖的影响。方法:构建发卡状RNA干扰质粒(shRNA-HERG)转染SH-SY5Y细胞,再分别使用半定量RT-PCR和Western印迹方法观察shRNA-HERG对SH-SY5Y细胞中HERG基因mRNA及其编码蛋白表达的干扰效果。利用SH-SY5Y细胞的生长曲线和集落形成实验,观察转染shRNA-HERG质粒对SH-SY5Y细胞存活及增殖能力的影响。结果:转染shRNA-HERG干扰质粒后,SH—SY5Y细胞中HERG基因的mRNA水平及其编码的钾通道蛋白表达水平显著下降。与对照组相比,shRNA—HERG使SH-SY5Y细胞生长曲线明显下压,细胞倍增时间延长136.8%。集落形成实验结果显示,无论接种细胞数为50,100或200,shRNA-HERG组克隆形成率均显著下降,与shRNA-control组和未干扰组相比,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:所构建的shRNA-HERG表达质粒能有效抑制HERG基因编码钾通道蛋白的表达,明显抑制SH-SY5Y细胞的生长和增殖。 相似文献
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应激对于认知和情感有重要影响,促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)作为应激反应的主要调节器,通过调控下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能,协调机体对应激的反应。近年研究表明,应激可导致小鼠海马神经元树突分支异常,树突棘缺失,而促肾上腺皮质激素释放因子受体-1(CRFR1)缺失小鼠或在CRFR1拮抗剂存在下则表现出正常的树突分支。另外,CRFR1作为G蛋白偶联受体(GPCR),可通过不同的信号通路影响海马神经元结构及相关因子的表达。目前,CRF对海马神经元损伤的分子机制仍不明确,本文就应激下CRF及其受体信号通路对海马神经元生长发育影响的研究进展做一综述。 相似文献
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心房颤动的(简称房颤)发生机制一直是医学界研究的热点与难点。近年来,各种学说机制并存,其中电生理机制学说多见。分布于心肌细胞上与生命活动密切相关的离子通道基因单核苷酸多态性可致离子通道重构,从而影响心房肌细胞动作电位,导致心房电重构,进而增加房颤的易患性。其中以钾离子通道基因单核苷酸多态性与房颤发生的相关性研究较为深入。 相似文献
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Antitumor effects of erythromycin and the related mechanism were investigated in the present study.Neuroblastoma cells(SH-SY5Y) were exposed to erythromycin at different concentrations for different durations.Cell proliferation was measured by cell counting,and cell viability was examined by MTT assay.Cell cycle phase distribution and the cytosolic calcium level were detected by flow cytometry.Mitochondrial membrane potential was measured by the JC-1 probe staining and fluorescent microscopy.The expression of an oncogene(c-Myc) and a tumor suppressor [p21(WAF1/Cip1)] proteins was analyzed by using Western blotting.Erythromycin could inhibit the proliferation of SH-SY5Y cells in a concentration-and time-dependent manner.The cell cycle was arrested at S phase.Mitochondrial membrane potential collapsed and the cytosolic calcium was overloaded in SH-SY5Y cells when treated with erythromycin.The expression of c-Myc protein was down-regulated,while that of p21(WAF1/Cip1) protein was up-regulated.It was concluded that erythromycin could restrain the proliferation of SH-SY5Y cells.The antitumor mechanism of erythromycin might involve regulating the expression of c-Myc and p21(WAF1/Cip1) proteins. 相似文献
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目的讨论急性上呼吸道感染患者的护理.方法 配合治疗进行护理.结论 遵医嘱使用抗病毒药物或抗生素及对症药物,观察药物疗效及不良反应. 相似文献
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酸感受离子通道亚基1a敲减后的细胞抗酸性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:通过酸感受离子通道(ASIC)1a表达抑制的细胞模型,探讨在酸性条件下ASIC1a对细胞生长增殖的影响。方法:以大鼠神经胶质瘤(C6)为模型细胞,利用RNAi技术建立ASIC1a表达抑制的细胞模型。通过绘制细胞生长曲线、集落形成试验、MTT试验和乳酸脱氢酶(LDH)释放试验来观察不同pH条件下,ASIC1a表达抑制细胞和阴性对照细胞生长增殖能力的变化。结果:RNAi技术可明显抑制C6细胞ASIC1a蛋白的表达。在正常pH条件下,ASIC1a表达缺失对C6细胞的生长增殖没有显著影响。但在不同酸性条件下,ASIC1a表达抑制细胞与阴性对照细胞相比对酸的耐受性明显提高,表现为细胞损伤减轻,存活数目明显增多。结论:C6细胞中有ASIC1a,ASIC1b,ASIC2a,ASIC2b和ASIC3亚基的表达。抑制ASIC1a的表达不影响正常pH条件下细胞的生长增殖,但能明显提高细胞对酸的耐受性,提示ASIC1a可能是潜在的抗酸靶分子。 相似文献