蝎毒素Ⅳ分离,纯化研究

取东亚钳蝎毒４ｍｌ，用０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸钠缓冲稀释，在４℃条件下，１５０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，取上清上柱。蝎毒经分离可得１１个组分，取ＳＶＣ－Ⅳ再次柱层次柱层析以脱盐，以真空冷冻干燥，置－１０Ⅰ以下贮藏，生物活性可保持５ａ以上。     

蝎毒素Ⅳ在大鼠脊髓中的镇痛作用及其机理的研究

蛛网膜下腔插管大鼠模型２５只，随机等分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ５组，分别经插管注入蝎毒素Ⅳ１μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ＋蝎毒素Ⅳ１μｇ／ｋｇ，吗啡３２μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ＋吗啡３２μｇ／ｋｇ，纳络酮１６μｇ／ｋｇ。以屈肌反射作为疼痛指标，观察蝎毒素Ⅳ在脊髓的镇痛作用及纳络酮对蝎毒素Ⅳ作用的影响并与吗啡进行对比观察。结果蝎毒素Ⅳ注入５～２０ｍｉｎ和９０～１２０ｍｉｎ内屈肌反射被显著抑制（Ｐ＜０．０１），表现为屈肌反射阈值升高及Ｃ波潜伏期延长；此种抑制不能被纳络酮消除。提示蝎毒素Ⅳ在脊髓具有一定的镇痛作用；其发挥镇痛作用的机制不同于吗啡。     

蝎素抗癌因子胸腔内给药治疗癌性胸水23例近期疗效观察

为探讨蝎素抗癌因子（ＡＦＳＶＣ－Ⅱ）对癌性胸水的治疗作用，将癌性胸水患者随机分为治疗组２３例，对照组２０例，两组性别、年龄、病程、病理分型等构成比大致相同。在治疗前均未对胸水进行任何治疗，每次胸腔给药时，均在抽尽胸水后进行。治疗组用ＡＦＳＶＣ－Ⅱ０．４ｍｇ加２ｍｌ注射用水稀释后注入，每周２次，每周增加０．４ｍｇ，最大剂量≤１．６ｍｇ。对照组用５－氟尿嘧啶５００ｍｇ，丝裂霉素１６～２０ｍｇ，每周２次，４周后进行比较。结果：治疗组对腺癌引起的胸水的疗效优于对照组（Ｐ＜０．０５），对疼痛、纳差（Ｐ＜０．０１），增加外周白细胞均有显著差异（Ｐ＜０．０５）。提示ＡＦＳＶＣ－Ⅱ对肺癌伴胸水有效。     

水果鲜样中铅含量的检测探析

1　仪器与试剂日立Z— 5 0 0型原子吸收光谱仪 ;铅空心阴极灯 (日立 ) ;玻璃三角烧瓶 ;可调式电热板。铅标准储备液 :5 .0 0mg/l;铅标准应用液 :用浓度为 0 .5 0mg/l的硝酸稀释而成 ;硝酸 ;混合酸 :硝酸 +高氯酸 (4 +1 )分析过程全部用水均用去离子水 ,所使用化学试剂均为优级纯以上 ,实验所用玻璃器皿均以硝酸 (1 +4)浸泡过夜 ,用去离子水冲洗干净。2　仪器工作条件波长 2 83.3nm ;通带宽度 1 .3nm ;灯电流 9.0mA ;干燥温度 80℃～ 1 4 0℃ ,4 0s;灰化温度 4 0 0℃ ,2 0s ;原子化温度2 0 0 0℃ ,5s ;冷却温度 2 2 0 0℃ ,4s ;载气 :氩气。…     

蝎毒抗癌多肽对CNE-2Z细胞膜电位的影响

目的: 观察蝎毒多肽(APBMV)对鼻咽癌CNE-2Z细胞株细胞膜电位的影响.方法: 细胞经培养传代,分组处理.空白对照组加生理盐水,其他3组分别加入浓度为8,12和16 mg/L的APBMV. 采用玻璃微电极细胞内记录法测定CNE-2Z细胞膜电位,MTT法观察APBMV对CNE-2Z细胞的毒性作用. 结果: CNE-2Z 细胞经APBMV处理48 h后,细胞膜负电位(13.00±3.58) mV明显小于空白对照组(23.00±8 .21)mV,P<0.01,细胞膜呈去极化状态;CNE-2Z细胞代谢MTT的能力下降,显示明显的毒性反应.结论: APBMV可能具有膜毒素的作用,通过降低CNE-2Z细胞膜电位 ,继而影响肿瘤细胞的增殖.     

蝎毒抗癌多肽及其纯化组分Ⅰ及Ⅲ的毒性观察

目的观察蝎毒抗癌多肽(APBMV)纯化组分Ⅰ(AP-Ⅰ)及Ⅲ(AP-Ⅲ)与蝎毒抗癌多肽之间的毒性差别,为前二者药效学研究提供新的实验依据.方法取昆明种小鼠180只,随机分为18组,每组10只,腹腔一次注射0.2ml/20g不同浓度的APBMV(1～6组)、AP-Ⅰ(7～12组)及AP-Ⅲ(13～18组),观察动物的行为学改变,并取出死亡动物脏器进行病理学观察,按照综合计算法得出AP-Ⅰ、AP-Ⅲ与APBMV的LD50和95%可信区间.结果小鼠注射高浓度的APBMV、AP-Ⅰ或AP-Ⅲ后,在2min后即出现明显的烦躁、尖叫、嘶咬、多涎,继而呆滞、呼吸不规则、颈毛直立等行为学改变,随着给药时间的延长,动物会表现行动迟缓、竖尾、腹泻、喘息性呼吸,后肢强直,窒息直至死亡.而其他各组在3min后才出现程度不同的毒性反应.高浓度组动物在25min内全部死亡,其他各组部分动物在60min内相继死亡.死亡和处死动物内脏无明显病理学改变.APBMV、AP-Ⅰ或AP-Ⅲ的LD50和95%可信区间分别为1.386,1.118,1.145和(1.386±0.247),(1.118±0.194),(1.145±20.198).结论[HTSSAPBMV经进一步纯化后,其有效成分AP-Ⅰ及AP-Ⅲ毒性均有显著提高.     

针刺镇痛与睾酮、双氢睾酮的关系

针麻是个复杂的生理调节过程,其除了神经系统的作用外,还有体液因素的参与。近年来实验证明针刺可提高血浆中亮啡肽,ACTH,肾上腺皮质激素的含量,并且针麻效果与这些体液因素有密切关系。另有资料表明针刺可提高血浆睾酮的含量,关于睾酮水平的改变对针刺镇痛的效果是否有影响,目前尚未见报道,本文试对该问题     

不同剂型的蝎毒抗癌多肽对小鼠肝癌的抑制作用及带瘤小 …

目的：观察蝎毒抗癌多肽对小鼠肝癌的生长抑制作用及带瘤小鼠免疫功能的影响。方法：（１）将接种Ｈ２２细胞２４ｈ后的带瘤小鼠４５只随机分为非正常对照组,５－Ｆｕ组、ＡＰＢＭＶ针剂组和胶囊组４组,给予不同的药物处理１０ｄ后,观察瘤块及脾脏重量的变化,计算抑瘤率和脾重指数;（２）接种Ｈ２２细胞２４ｈ带瘤小鼠４０只随机分为非正常对照组、５－Ｆｕ组、ＡＰＢＭＶ针剂组和ＡＰＢＭＶ针剂＋５－Ｆｕ组,给予ＡＰＢＭＶ针     

脐血干细胞移植对帕金森病大鼠神经功能恢复的影响

目的:观察脐血干细胞移植对帕金森病(PD)大鼠神经功能恢复的影响.方法:PD大鼠模型分成实验组(n=10)和对照组(n=10).将第三代脐血间充质干细胞(MSCs)用Hoechst33258标记后植入实验组大鼠纹状体内,对照组注射PBS.此后每周腹腔注射阿朴吗啡以观察神经功能恢复情况,并在2周,4周,8周用免疫荧光双标法检测MSCs的存活,迁移以及胶质纤维酸性蛋白(GFAP),神经元特异性烯醇化酶(NSE),酪氨酸羟化酶(TH)和突触素的表达.利用高效液相色谱-电化学检测仪(HPLC-ECD)检测纹状体多巴胺含量.结果:脐血MSCs移植后大鼠的旋转行为与对照组相比有明显改善(P＜0.05);MSCs可在大鼠脑内存活,随时间延长,迁移范围扩大,分布于纹状体,胼胝体和皮质;GFAP,NSE,TH都有表达,突触素无表达.多巴胺水平与对照组相比有明显提高(P＜0.05).结论:脐血MSCs有望成为治疗PD的种子细胞,为神经退行性变提供一种治疗方法.     

人脐血间充质样细胞体外培养的形态学变化

目的:分离培养人脐血间充质样细胞,观察其形态学的变化.方法:取新鲜采集脐带血,用1.077 g/cm3的淋巴细胞分层液密度梯度离心法分离脐血单个核细胞.将脐血单个核细胞接种于37℃、体积分数5%CO2培养箱内培养.于不同时间观察细胞形态的变化.结果:从脐血中可以分离出单个核细胞;培养3 d出现大量的造血细胞集落,瑞氏染色显示粒-巨噬系集落形成单位与红系集落形成单位集落形成最多;培养5 d出现贴壁的扁平状上皮样细胞和长梭形的成纤维样细胞,同时有大量的破骨样细胞混杂;培养1周出现上皮样细胞和成纤维样细胞的集落,此时经胰蛋白酶消化机械吹打可以传代;培养2周以上,出现上皮样细胞的克隆,镜下呈现球形样结构,折光性强.结论:脐血成分复杂,在体外分离培养可以获得形态各异的脐血间充质样细胞.