蝎毒素Ⅳ分离、纯化研究

取东亚钳蝎毒４ｍｌ，用０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸钠缓冲液（ｐＨ７．４）稀释，在４℃条件下，１５０００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，取上清上柱（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０，长１８０ｃｍ，流速１～１．５ｍｌ／ｍｉｎ）。蝎毒经分离可得１１个组分，取ＳＶＣ－Ⅳ再次柱层析（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５，长４０ｃｍ，流速２～２．５ｍｌ／ｍｉｎ）以脱盐，经真空冷冻干燥，置－１０℃以下贮藏，生物活性可保持５ａ以上。蝎毒在聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示１２条带以上，而ＳＶＣ－Ⅳ呈现出单一条带，相对分子质量为８５００～９０００。     

蝎毒抗癌多肽对放疗后肝癌小鼠瘤重和一般状况影响的初步观察

目的　观察蝎毒抗癌多肽 (APBMV)与放疗 (RT)合用对肝癌小鼠的作用。方法　取H2 2 带瘤小鼠 10 0只 ,采用肿瘤生长抑制率 (IR)、白细胞计数和血红蛋白含量、SOD活力、LPO含量测定及脾重指数 (SI)等指标 ,观察不同剂量的APBMV与放疗合用后上述指标的变化。结果　放疗后 6d及 9d ,RT与APBMV合用后瘤重明显降低 ,IR最高达 78 2 9%与 70 45 % (与RT组和APB MV组比较 ,P <0 0 5 ,或P <0 0 1) ,白细胞计数和SI较RT组显著升高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ;血红蛋白含量测定结果无明显差异 ;RT组SOD活力最低 ,LPO含量最高 (与对照组比较P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,RT APBMV高剂量组SOD活力明显提高 ,LPO含量显著降低 (P <0 0 1) ,接近空白对照水平。结论　APBMV与放疗合用对H2 2 的抑制作用比单纯放疗和单用APBMV增强 ,APBMV并能减轻辐射对带瘤小鼠机体的损伤。     

蝎毒抗癌多肽纯化组分Ⅲ对小鼠肝癌的生长抑制作用及带瘤小鼠胸腺重量的影响

目的观察蝎毒抗癌多肽纯化组分Ⅲ(antineoplasticpolypeptide-ⅢfromAPBMV,AP-Ⅲ)对小鼠肝癌(hep-atoma-22,H22)的生长抑制作用及对带瘤小鼠胸腺重量的影响。方法将接种细胞h后的昆明种小鼠65只,随机分为5组5-组10只(20mg／kg);APBMV组10只(0．04mg／kg);AP-Ⅲ实验组(I0．04mg／kg,Ⅱ0．03mg／kg),每组10只;非正常对照组只(生理盐水),均腹腔注射给药,1次,连续给药10d。于末次给药24h后,颈椎脱臼处死小鼠,剥离肿瘤和胸腺,称重,并作数据处理。结果AP-Ⅲ实验组和APBMV组对H22有明显的抑制作用,与非正常对照组比较差异有显著性(P<0．01或P<0．001);5-Fu组胸腺质量低于非正常对照组,而AP-Ⅲ实验组和APBMV组则高于或接近非正常对照组。结论AP-Ⅲ具有抑制H22生长的作用,高剂量的AP-Ⅲ可增加带瘤小鼠胸腺的重量。     

蝎毒抗癌多肽对4种人肿瘤细胞系的作用

目的：观察蝎毒抗癌多肽（ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅｆｒｏｍＢｕｔｈｕｓＭａｔｅｎｓｉｖｅｎｏｍ,ＡＰＢＭＶ）对人肿瘤细胞生长的抑制作用。方法：采用噻唑蓝（ＭＴＴ）法、台盼蓝拒染法和集落形成观察为指标,丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）为阳性对照药品,以ＡＰＢＭＶ４ｍｇ／Ｌ,８ｍｇ／Ｌ,１２ｍｇ／Ｌ和１６ｍｇ／Ｌ处理４种人肿瘤细胞（人早幼粒白血病细胞株ＨＬ６０、人肝细胞癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１、人低分化鼻咽上皮癌细胞株ＣＮＥ２Ｚ和人胃癌细胞株ＭＧＣ８０３）,选用不同的作用时间点,分别观察ＡＰＢＭＶ对上述细胞的影响。结果：ＡＰＢＭＶ对ＨＬ６０、ＳＭＭＣ７７２１、ＣＮＥ２Ｚ和ＭＧＣ８０３细胞均有显著的细胞毒性作用,ＨＬ６０和ＳＭＭＣ７７２１比后两者显示出更好的量效关系（ｒ＝０．９８２８,ｒ＝０．９８６３,Ｐ＝０．０２）。ＡＰＢＭＶ处理ＨＬ６０和ＳＭＭＣ７７２１细胞２４ｈ,４８ｈ和９６ｈ后,两种细胞的生长均受到抑制（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）,并有显著的剂量效应关系;处理ＳＭＭＣ７７２１细胞２４ｈ,４８ｈ和９６ｈ时ＡＰＢＭＶ的ＩＣ５０分别是１５．８７ｍｇ／Ｌ、１３．０５ｍｇ／     

注射用蝎毒抗癌多肽热稳定性研究

目的：热稳定性实验,可望为蝎毒抗癌多肽（ＡＰＢＭＶ）粉针的生产、运输、储存和使用提供更科学的理论依据。方法：利用紫外分光光谱、聚丙烯酰胺凝胶电泳等法,测定了ＡＰＢＭＶ制剂的热稳定性。结果：在５０℃～８０℃的范围内,随着加热时间延长,样品Ａ２８０吸收度逐渐升高,聚丙烯酰胺凝胶电泳主色带逐渐变浅,但ｐＨ值、水溶性及外观色泽无明显改变。结论：根据上述结果,注射用ＡＰＢＭＶ在４℃下有效期暂定为５ａ。     

蝎毒抗癌多肽对肝肿瘤的抑制作用研究

目的：观察蝎毒抗癌多肽（ＡＰＢＭＶ）对肝肿瘤的抑制作用。方法：噻唑蓝（ＭＴＴ）法、台盼蓝拒染法、集落形成以及Ｈ２２荷瘤小鼠模型。结果：ＡＰＢＭＶ导致ＳＭＭＣ－７７２１细胞代谢ＭＴＴ的能力显著低于对照组,ＡＰＢＭＶ的ＩＣ５０为１１．３３μｇ／ｍＬ;ＡＰＢＭＶ能显著抑制该细胞的生长,剂量－效应关系明显,其ＩＣ５０分别为１５．８７μｇ／ｍｌ、１３．５０μｇ／ｍＬ和８．７０μｇ／ｍＬ;当ＡＰＢＭＶ的浓度〉     

舒芬太尼或吗啡复合罗哌卡因PCEA用于剖宫产术后镇痛的比较

目的比较舒芬太尼与吗啡分别复合甲磺酸罗哌卡因用于硬膜外术后自控镇痛(PCEA)的临床有效性和不良反应。方法腰硬联合麻醉下行剖宫产手术的足月初产妇患者120例,随机分为两组(n=60):对照组(A组)0.179%甲磺酸罗哌卡因+0.05mg/mL吗啡+0.05mg/mL氟哌利多的混合液;试验组(B组)0.179%甲磺酸罗哌卡因+0.5ug/mL舒芬太尼+氟哌利多0.05mg/mL的混合液。负荷剂量6mL,维持剂量2mL/h。采用视觉模拟评分法(VAS)评价患者疼痛程度,用改良Bromage法评价下肢运动阻滞程度,记录不良反应发生情况。结果与A组比较,B组术后4、8、16、24、48h的镇静、镇痛效果较好且不良反应明显降低。结论 0.179%甲磺酸罗哌卡因+0.5ug/mL舒芬太尼+0.05mg/mL氟哌利多用于剖宫产术后PCEA镇痛,不良反应少,镇痛效果好,患者的满意度高。     

β-淀粉样蛋白25~35和人参皂苷Rb1对神经干细胞分化过程中tau蛋白磷酸化水平的影响

背景：通过调节神经干细胞分化过程中的tau蛋白磷酸化水平可提高神经干细胞移植治疗阿尔茨海默病的效果。 目的：观察β-淀粉样蛋白25~35和人参皂苷Rb1对神经干细胞分化过程中tau蛋白磷酸化水平的影响。 方法：分离、培养新生大鼠海马神经干细胞,诱导第3代神经干细胞分化1周后,分别采用免疫荧光细胞化学和Western-blot检测Tau[pS396] 、Tau[pS262] 及GSK-3β[pTyr279,216]表达情况。 结果与结论：正常神经干细胞分化过程中有Tau[pS396] 和Tau[pS262]的表达,β-淀粉样蛋白25~35可以使Tau[pS396]、Tau[pS262]和GSK-3β[pT279/216]表达上调,而人参皂苷Rb1可以逆转β-淀粉样蛋白25~35的作用。提示β-淀粉样蛋白25~35和人参皂苷Rb1通过调节GSK-3β的活性对tau蛋白的磷酸化水平产生调控作用。     

吉西他滨对慢性粒细胞白血病患者骨髓细胞G-CSFR及bcr/abl mRNA的影响

为了观察吉西他滨对慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓粒细胞集落刺激因子受体(G-CSFR)及bcr/ablmRNA的作用,收集CML慢性期、急变期患者的及骨髓象正常的非血液病患者骨髓液,分为吉西他滨组(加入吉西他滨,调整浓度为10μg/ml)和对照组,培养48小时后收集细胞。采用流式细胞术检测各组标本骨髓G-CSFR的表达率;采用RT-PCR技术检测各组标本bcr/abl mRNA的表达。结果表明:吉西他滨组CML慢性期、急变期患者及骨髓象正常者骨髓G-CSFR的表达率分别为(50.72±8.57)%、(36.32±4.25)%和(59.42±7.62)%。对照组CML慢性期、急变期患者及骨髓象正常者骨髓粒系G-CSFR的表达率分别为(45.42±6.52)%、(30.58±5.68)%和(58.56±5.54)%。两组CML患者骨髓G-CSFR的表达率分别与骨髓象正常组比较,差异有显著性(p0.05),CML慢性期患者与急变期比较,差异有显著性(p0.05)。吉西他滨组CML患者G-CSFR的表达率与未加药组相应组别比较,差异有显著性(p0.05)。吉西他滨组CML慢性期、急变期患者bcr/abl mRNA表达水平比较,差异无显著性(p0.05)。吉西他滨组与对照组、CML慢性期、急变期患者G-CSFR表达率与bcr/abl mRNA表达水平呈负相关(p0.05)。结论:在体外培养下,吉西他滨可以提高CML慢性期、急变期患者骨髓G-CSFR的表达率,对bcr/abl mRNA表达的作用不明显,CML慢性期、急变期患者G-CSFR表达率与bcr/abl mRNA表达水平呈负相关。     

深圳市3家综合医院护士遭受医院工作场所暴力及其影响因素分析

目的 了解护士遭受医院工作场所暴力的情况,探讨医院工作场所暴力发生的原因及影响因素.方法 运用整群抽样的方法,对深圳市3家综合性医院至少临床工作1年的932名护士,收集其一般资料和医院工作场所暴力发生的情况.结果 医院工作场所暴力总体发生率为64.3%,其中心理暴力占86.0%、身体暴力占20.9%和性暴力占11.5%.护士认为医院工作场所暴力发生的原因主要有传媒的负面导向(81.1%)、患者病情无好转(67.8%)、患者要求未能得到满足(64.8%)、患者(或探视者)候诊时间长(51.9%)等.医院工作场所暴力主要影响因素包括护龄、性别、学历、应对方式(P<0.05).结论 目前护士遭受医院工作场所暴力的总体发生率较高;针对暴力事件发生的原因,积极加强医院系统应对、干预、控制,强化护士对工作场所暴力的防范意识与应对能力,以减少医院工作场所暴力的发生.