凋亡相关基因在胃癌组织中的表达及其相关性研究

本研究运用免疫组化法检测胃癌组织中三个凋产相关基因：X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）、第二个线粒体衍生的胱天蛋白酶激活剂（Smac）及天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶（Caspases）-3的表达，并探讨三者与胃癌临床病理特征的关系。     

除草醚诱导的小鼠先天性膈疝肺发育不良模型的建立

目的 建立小鼠先天性膈疝(CDH)模型.方法 实验组10只妊娠第8天的BABL/C小鼠通过灌胃给于除草醚25 mg/只,正常对照组给予橄榄油,于妊娠第20天剖宫产取出子鼠,解剖显微镜下观察子鼠有无膈疝形成,测定子鼠体重及双肺重量,HE染色观测肺组织发育情况,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织SP-B、SP-C和VEGF表达水平.结果 实验组69只子鼠中有膈疝形成者39只,成功率为56.5%,子鼠双肺重量较对照组显著降低(P＜0.01);实验组有膈疝形成和无膈疝形成者的肺组织均发育不良,处于假腺体期和原始肺小管期;与对照组比较,实验组胎肺组织中SP-B、SP-C和VEGF表达水平均显著下调(P＜0.01),且与膈疝形成与否无关.结论 采用除草醚能在小鼠成功建立CDH模型,具有简便、成功率高的优点,为深入研究CDH发病机制及其治疗提供了新的手段.     

Preparation of Curcumin Prodrugs and Their in Vitro Anti-tumor Activities

The curcumin prodrugs, which could be selectively activated in tumor cells, were prepared to establish a basis for the targeted chemotherapy for cancer. On the basis of the molecular structure of curcumin, the N-maleoyl-L-valine-curcumin （NVC）, N-maleoyl- glycine-curcumin （NGC） were chemically synthesized and identified by IR and NMR spectroscopy. After treatment with these two prodrugs for 6--24 h, the rates of growth inhibition on human bladder cancer EJ cells and renal tubular epithelial （HKC） cells were detected by MTT colorimetry. Our results showed that after the treatment with 20 μmol/L--40 μmol/L NVC and NGC for 6--24 h, the growth inhibitory effects on EJ cells were 6.71%-65.13 % （P〈0.05）, 10. 96 %-73.01 % （p〈0. 05）, respectively, in both dose- and time-dependent manners. When compared with the curcumin of same concentrations, the growth inhibitory effects of these two prodrugs on HKC cells were significantly decreased （P〈0.01）. It is concluded that activation of curcumin prodrugs via hydrolysis functions of cellular esterase could inhibit the growth activities of tumor cells, and reduce the side effects on normal diploid cells. This provided a novel strategy for further exploration of tumor targeted chemotherapeutic drugs.     

Smac/DIABLO Promotes Mitomycin C-induced Apoptosis of Bladder Cancer T24 Cells

Thesecondmitochondria derivedactivatorofcaspase(Smac)ordirectIAPbindingproteinwithlowpl(DIABLO),amitochondrialproteinthatisreleasedtogetherwithcytochromeCfromthemi tochondriainresponsetoapoptoticstimuli,wasrecentlyfoundtopromotecaspaseactivationbybindingandneutralizingtheinhibitorofapoptosisproteins(IAPs)[1-3].Inthisstudy,inordertoex plorethepossibilityofSmac/DIABLOasanoveltargetofgenetherapyforbladdercancer,theeffectoftheSmacexpressiononthemitomycinC(MMC)inducedapoptosisofthebladder…     

膀胱移行细胞癌UroplakinⅡmRNA反义结合位点的筛选

目的筛选膀胱移行细胞癌(TCC)高表达基因UroplakinⅡ(UPⅡ)的反义结合位点(AAS).方法合成20聚随机寡核苷酸文库,与全长UPⅡcRNA杂交,RNase H酶切割后,经引物延伸、放射自显影、RNADraw软件分析,筛选UPⅡmRNA的AAS,合成反义寡核苷酸(AS-ODN),转染RT4细胞株18 h后,RT-PCR检测UPⅡmRNA水平.结果筛选出4个具有茎环结构的AAS(558～577 bp、552～571 bp、217～236 bp、97～116 bp),AS-ODN对UPⅡmRNA的封闭效率分别为29.3%(P＜0.01)、82.7%(P＜0.01)、71.3%(P＜0.01)、70.9%(P＜0.01).结论随机寡核苷酸文库/RNase H酶切割法能在体外筛选出UPⅡmRNA的AAS,为研究UPⅡ生物学功能、TCC靶向生物治疗奠定了基础.     

先天性巨结肠神经营养因子-3、酪氨酸激酶C的表达及其意义

目的　探讨神经营养因子(NT ) 3及其受体酪氨酸激酶(Trk)C在先天性巨结肠(HD)中的表达及其意义。方法　采用免疫组织化学方法检测3 2例HD患者不同节段肠组织中神经节细胞NT 3、TrkC的表达水平。结果　正常肠段肌间和黏膜下神经丛内神经节细胞呈NT 3、TrkC强阳性表达。HD狭窄段未见NT 3、TrkC阳性染色;移行段神经节细胞NT 3、TrkC阳性率(5 3 .1%、2 8.1% )均较扩张段(93 .8%、43 .8% )显著降低(P <0 .0 5 )。结论　NT 3及其受体TrkC在神经节细胞缺乏肠段的异常表达可能与HD的发病机制有关,对HD具有潜在诊断价值     

姜黄素前体药物的合成及其体外抗肿瘤活性研究

目的制备姜黄素前体药物,使其在肿瘤细胞内高选择性活化,为进一步开展肿瘤靶向性化疗奠定基础。方法以姜黄素分子结构为基础,化学合成N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素,红外光谱法进行鉴定;MTT比色分析法比较两种姜黄素前体药物作用6~24 h后,人膀胱癌EJ细胞及肾小管上皮HKC细胞生长抑制的差异。结果20~40μmol.L-1的N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素作用6~24 h后,EJ细胞生长抑制率分别为6.71%~65.13%(P<0.05)、10.96%~73.01%(P<0.05),呈浓度、时间依赖性。与同浓度姜黄素比较,两种前体药物对HKC细胞生长的抑制作用均降低(P<0.01)。结论本研究成功的合成了两种姜黄素的前体药物,N-马来酰-L-缬氨酸酯姜黄素、N-马来酰-甘氨酸酯姜黄素;二者均能体外抑制人膀胱癌EJ细胞增殖,其对人肾小管上皮HKC细胞的抑制毒性作用低于姜黄素。     

色素放大内镜对胃肠上皮化生及早期癌变的诊断价值

目的：探究色素放大内镜对胃肠上皮化生及早期癌变的诊断价值。方法选取慢性胃炎患者164例,分别由同一名资深技师先后对患者进行普通内镜及染色放大内镜检查,并与病理检查结果进行对比,比较两种检测方法对胃黏膜肠上皮化生及早期癌变诊断的优劣。结果色素放大内镜对胃黏膜肠上皮化生及早期癌变诊断与病理诊断结果有极高的一致性(Kappa 值=0.849、0.883,P <0.05)。色素放大内镜对肠上皮化生及胃早期癌变的敏感度(87.324%、87.805%),特异度(96.774%、98.374%)及准确度(92.683%、95.732%)明显大于普通内镜。结论色素放大内镜对胃黏膜肠上皮化生及胃早期癌变的诊断相对普通内镜检出率高,与病理结果一致性高。     

皮肤血管内NK/T细胞淋巴瘤一例

患者女,18岁。双小腿皮肤红斑、结节伴疼痛2年余。皮肤科检查：左小腿内后侧弥漫性浸润性暗红斑,红斑范围内可触及深在大小不等皮下结节,质稍硬,伴显著触痛。皮损组织病理检查：表皮未见明显异常,真皮及皮下血管周围淋巴样细胞浸润,多处血管壁坏死及血管闭塞,部分血管内可见成团的淋巴细胞,其中可见较多核大浓染异形细胞及病理性核分裂。免疫组化染色：血管内淋巴细胞CD3（+++）、CD3ε（+++）、CD2（+）、CD56（+++）、粒酶B （+++）、穿孔素（+++）、CD30（+）,Ki67（+++,100%）,CD20、CD5、CD7、CD4、CD8、TdT、间变性淋巴瘤激酶、上皮膜抗原、泛细胞角蛋白均为阴性,CD34示血管（+）,原位杂交显示血管内淋巴细胞EB病毒编码RNA1/2（+）。诊断：皮肤血管内NK/T细胞淋巴瘤。     

外源性P27kip1基因转染诱导前列腺癌细胞凋亡的实验研究

目的　探索前列腺癌基因治疗的新途径。方法　用脂质体介导 p2 7kip1基因转染前列腺癌 PC- 3 M细胞 ,SABC免疫组化法检测癌细胞外源性 p2 7kip1基因表达 ;MTT比色分析检测癌细胞体外生长活性 ;流式细胞仪 ( FCM)分析细胞周期改变 ;DNA L adder、吖啶橙 -溴化乙啶荧光染色法检测细胞凋亡。结果　发现外源性 p2 7kip1基因转移后 ,前列腺癌细胞 p2 7kip1蛋白水平显著增强 ( P<0 .0 1) ,体外生长抑制 12 .2 4%～ 3 6.5 2 % ( P<0 .0 1) ,出现 G0 / G1 期细胞周期阻滞及凋亡性“亚 G1期”峰 ,电泳可见典型的“梯状”条带 ,凋亡比率为 18.5 % ( P<0 .0 1)。结论　转染外源性p2 7kip1基因能增强对细胞周期的负性调节 ,显著诱导前列腺癌细胞凋亡 ,是前列腺癌基因治疗的潜在途径