干细胞标志物CD133在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的研究干细胞标志物CD133在神经母细胞瘤中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测32例神经母细胞瘤（NB）、8例节细胞神经母细胞瘤（GNB）组织中CD133的表达，并分析CD133表达与临床分期、病理类型和患儿术后生存时间的关系。结果NB、GNB组织中CD133阳性检出率分别为46．9％（15／32）、37．5％（3／8），主要表达于瘤细胞的胞浆。142期、344期、4S期NB组织中CD133阳性检出率分别为311．7％、57．9％、37．5％，各分期间差异均具有显著性意义（P〈0．05）；预后不良组织型CD133阳性率（52．4%）显著高于预后良好组织型（36．8％，P=0．007）。CD133阴性患儿平均生存时间较阳性患儿显著延长（P=0．026）。结论CD133可能与NB发生、发展相关，有望成为评估患儿预后的指标之一。     

茉莉酸甲酯诱导人神经母细胞瘤细胞株BE(2)-C凋亡作用机制

探讨茉莉酸甲酯对人神经母细胞瘤细胞株BE(2)-C的生长抑制作用及其对凋亡抑制蛋白家族成员XIAP和survivin表达的影响。1～2 mmol·L^-1茉莉酸甲酯处理BE(2)-C细胞6～24 h后， MTT法检测瘤细胞生长活性， 克隆形成实验检测细胞增殖能力， PI单染流式细胞术检测细胞周期， AO/EB荧光染色法、 Hoechst 33258荧光染色法、 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡， 半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测细胞周期素D1(cyclin D1)、 X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein， XIAP)及survivin表达。结果表明， 各浓度茉莉酸甲酯作用后， BE(2)-C细胞呈时间、 浓度依赖性生长抑制， 1， 1.5和2 mmol·L^-1茉莉酸甲酯作用24 h后， 细胞生长抑制率为20.6%～85.5%(P<0.01)， IC₅₀为1.35 mmol·L^-1； S期细胞比率增高， 部分瘤细胞发生典型的凋亡形态学改变， 早期凋亡细胞(FITC⁺ PI^-)分别占13.51%、 17.32%和24.59%(均P<0.01)，细胞死亡率分别为29.36%、 54.73%和75.52%(均P<0.01)； XIAP和survivin表达分别下调18.5%～68.9%和22.4%～48.7%(均P<0.05)， 而cyclin D1表达无显著变化(P>0.05)。可见， 茉莉酸甲酯能通过诱导细胞周期阻滞和凋亡抑制人神经母细胞瘤细胞株BE(2)-C的生长活性， 下调XIAP和survivin基因表达可能是其作用机制之一。     

缺氧诱导丝裂原因子在小鼠支气管肺发育不良模型中的表达及意义

目的 探讨缺氧诱导丝裂原因子(HIMF)在小鼠支气管肺发育不良(BPD)模型中的表达及意义.方法 32只新生昆明小鼠随机分为对照组(n=16)、高氧暴露组(n=16),分别置于正常空气(21%,O2)及氧箱(85%,O2)中,于暴露后第7、14、21、28天每组随机选取4只,采用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织形态学改变,运用实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot方法检测肺组织中HIMF mRNA和蛋白表达水平.结果 对照组肺泡逐渐发育成熟,大小均匀,肺间质变薄;高氧暴露组肺泡隔增厚、肺泡融合,放射状肺泡计数减少31.1%～65.3%;与对照组比较,高氧暴露7、14、21 d后肺组织HIMF mRNA和蛋白水平分别增高2.435～2.528倍(P<0.05)、2.45～5.42倍(P<0.05),而高氧暴露28 d后分别下调52.81%(P<0.05)、74.60%(P<0.05).结论 成功建立小鼠BPD模型,HIMF基因表达异常可能参与BPD的发生、发展过程.     

肝细胞蛋白在肠上皮化生型Barrett食管中的诊断价值

目的 比较肝细胞蛋白、细胞角蛋白7、细胞角蛋白20、上皮膜抗原(EMA)4种蛋白在Barrett食管化生的肠上皮中表达的差异。方法 采用免疫组化SP法检测23例肠上皮化生型Barrett食管标本中肝细胞蛋白、细胞角蛋白7、细胞角蛋白20、．EMA四种蛋白的表达，同时进行爱先蓝一高碘酸一无色品红[AB(pH2．5)-PAS]染色标记，比较表达的差异。结果化生的肠上皮中均可见肝细胞蛋白、细胞角蛋白7、细胞角蛋白20及AB(pH2．5)-PAS染色的阳性表达；肝细胞蛋白在所有肠化上皮细胞胞质中表达，胃及肠上皮均不表达；细胞角蛋白20、细胞角蛋白7在肠化上皮细胞胞质、部分胃柱状上皮中呈阳性表达；EMA在小肠及肠化上皮以外的其他上皮均有表达；AB(pH2．5)-PAS染色蓝染部分仅为肠上皮杯细胞中的黏液，其余的胃上皮细胞显示红色，鳞状上皮不显色。结论 肝细胞蛋白可作为特异性标记化生肠上皮的首选指标，细胞角蛋白20、细胞角蛋白7亦是肠上皮化生的敏感指标，但特异性不强；AB(pH2．5)-PAS及EMA在显示肠上皮化生方面不具有优势。