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51.
52.
目的:X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1能够诱导半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3凋亡,其具体转录调控机制尚不十分清楚。克隆X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1基因启动子,检测干扰素对其转录活性的影响。
方法:实验于2006-05/2007-07在香港大学分子生物学研究所和洛阳华美生物工程公司完成。①材料:结肠癌细胞株Lovo和Sw1116来自美国 American Type Culture Col-lection。pGL3 basic载体,内参照pRL-CMV载体和Dual-luciferase reporter Kit,T4 DNA连接酶,限制性内切酶Kpn I和XhoI均由Promega公司提供。②实验方法:采用PCR法扩增获得X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1基因的启动子片段,将之定向克隆到含荧光素酶报告基因的pGL3 basic载体上,获得的报告基因质粒命名为pLUC107,瞬时转染Lovo和Sw1116细胞株,经α-干扰素刺激处理,启动子转录活性用荧光素酶相对表达活性表示。
结果:①PCR扩增结果:在预期的271 bp处出现清晰DNA片段,无非特异扩增现象,证明其为X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1启动子的PCR扩增产物。②重组质粒的酶切鉴定及测序:重组质粒pLUC107双酶切后可见约为271 bp的DNA片段,与理论值相一致。DNA测序证实含X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1启动子荧光素酶报告基因质粒构建成功。③干扰素对X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1启动子转录活性的影响:与未经α-干扰素处理的含pLUC107的Lovo和Sw1116细胞的荧光素酶相对活性值比较,经α-干扰素处理后两种细胞的荧光素酶相对活性值均明显升高(P均 < 0.05),且升高幅度与α-干扰素呈剂量依赖性。
结论:成功克隆出X-染色体相关凋亡抑制蛋白相关因子1基因启动子片段,并利用荧光素酶报告基因证实α-干扰素可上调其转录活性。 相似文献
53.
小儿急性喉炎较为常见,起病急,发展快,常伴有不同程度的呼吸困难,严重者造成喉阻塞,甚至危及生命。近年来多由于采用抗生素、激素及冬眠药物的治疗,使气管切开率及病死率大大降低。现将我院耳鼻喉科自1981年至2001年间收治的60例小儿急性喉炎做如下分析: 相似文献
54.
本文应用ELISA双抗体夹心法,以抗人结肠癌单克隆抗体SC_3A和SC_6检测47例结,直肠癌,33例结。直肠腺瘤,14例原发性肝癌,15例胃癌患者及60例正常人群的血清和粪便中癌相关抗原。结果表明,血清和粪便检测阳性率,结、直肠癌组分别为66.0%和72.3%;结、直肠腺瘤组为63.6%和60.6%;原发性肝癌组为35.7%和57.1%;胃癌组为40.0%和33.3%,而正常对照组为11.7%和13.3%。提示单抗ELISA法检测六肠癌及癌前病变有较好的敏感性,进一步 相似文献
55.
<正> 如何提高现有基层卫生人员的业务水平,最大限度地满足基层需要,确保实现“2000年人人享有卫生保健”战略目标,是目前卫生事业的重大课题。资料与数据来源 11990年济宁市卫生事业统计报表。 相似文献
56.
本研究建立了幽门螺杆菌的近缘苗猪胃螺杆菌的SPF级Balb/c小鼠模型,发现细菌可在其中长期定植并引起与人类Hp相关胃炎相似的组织学改变,提示该模型可用于幽门螺杆菌的研究。 相似文献
57.
1997年4月21日至25日在广州第一军医大学召开了中华医学会第二届全国幽门螺杆菌专题学术研讨会,大会收到348篇论文,分别来自除西藏、台湾以外的全国各省市;出席会议正式代表430余名,列席代表近百名,大会特邀全国消化界的60余位著名专家莅会指导。大会采取专题报告、大会发言与自由讨论相结合的方式进行。包括美国、日本和香港在内的20位中外专家作了有关幽门螺杆菌(Hp)研究的专题报告,内容涉及Hp的致病因子及致病机制、与胃癌及粘膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤的关系、诊断与治疗的评价、疫苗研制等多个方面;并有近50名代表作了大会发言,到会代表进行了热烈讨论。大会全面检阅了我国第一届Hp会议后近7年来有关Hp研究的成果,对有关问题达成了初步的共识。 相似文献
58.
目的构建表达幽门螺杆菌(Hp)过氧化氢酶的无抗性减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗。方法采用缺失腺苷酸环化酶(△cya)、环腺苷酸受体蛋白(△crp)及天门冬氨酸β-半醛脱氢酶(△asd)的鼠伤寒沙门菌(X4072)作为宿主,将编码过氧化氢酶的基因CAT插入Asd 的组成型表达载体pYA248,通过两次转化引入宿主菌,构建表达过氧化氢酶基因平衡致死的减毒鼠伤寒沙门重组菌X4072(pYA248-CAT)。采用桥联法ELISA测定X4072(pYA248-CAT)培养上清液和裂解上清液中过氧化氢酶的抗原性,参照Meacock的方法及重组菌生长曲线的测定来确定重组菌株的稳定性,通过C57BL/6小鼠口服测定半致死量来确定重组菌的安全性。结果成功构建了表达过氧化氢酶的减毒鼠伤寒沙门菌重组菌株X4072(pYA248-CAT)。桥联法ELISA测定表明重组菌X4072(pYA248-CAT)培养上清中过氧化氢酶的含量高于菌体裂解液;重组菌pYA248-CAT在没有选择压力的情况下培养25代,随机挑选的重组菌全部都能生长,且在ELISA测定过氧化氢酶抗原时均显阳性;重组菌的生长曲线测定表明,X4072(pYA248)和X4072(pYA248-CAT)的生长状态基本一致。口服重组菌株X4072(pYA248-CAT) 1.0×1010 cfu,30 d后C57BL/6存活率仍为100%。结论成功构建了表达过氧化氢酶的无抗性的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗X4072(pYA248-CA 相似文献
59.
在临床上发现房水混浊对葡萄膜炎症的诊断有重要意义。目前检查房水有无混浊一般采用斑点状光束(spot-beam)或圆柱状光束(cylindric beam)照射房水,看其有无闪光现象(即Tyndall氏征)。作者于1962年某日夜间检查一名因角膜浅层异物合并虹膜睫状体炎的患者时,偶而使用较宽光束和较 相似文献
60.
王继德 《华南国防医学杂志》1989,(4)
角膜异物多数为铁屑。己生锈的角膜异物用角膜异物针(或注射针头)有时很难挑净,为此,笔者于1984年试制了“电动角膜异物钻”,至今治疗已生锈的角膜异物328例,报告如下。材料和方法1684年4月起,我院门诊接诊已生锈的铁屑性浅层角膜异物328例,详见附表。治疗方法: 相似文献