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91.
目的 检测胃上皮细胞恶性转化过程中的慢性浅表性胃炎、萎缩性胃炎伴肠化、胃癌组织中XIAP蛋白表达的差异以及其与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系,探讨胃癌的发病机制.方法 采用免疫组化法检测25例慢性浅表性胃炎、30例萎缩性胃炎伴肠化、32例胃癌组织中XIAP蛋白的表达;Hp感染与XIAP表达的关系体内实验通过对病例进行尿素酶试验检测Hp感染情况,将各种病变分为Hp阳性组和Hp阴性组;体外实验通过将Hp裂解液与AGS细胞共同孵育24 h后提取细胞总蛋白通过Western Blot检测XIAP蛋白水平的变化.结果 XIAP蛋向阳性表达位于胞浆,XIAP蛋白表达从慢性浅表性胃炎到萎缩性胃炎伴肠化到胃癌呈逐渐上升趋势,差异有显著性意义(P<0.05),其中慢性浅表性胃炎与萎缩性胃炎伴肠化两组间、慢性浅表性胃炎与胃癌两组间表达有显著性差异(P<0.0167),萎缩性胃炎伴肠化与胃癌两组问表达无显著性差异(P>0.0167).胃癌组Hp感染率较慢性浅表性胃炎组高,但统计学无差异(p>0.05),Hp感染伴胃上皮细胞XIAP蛋白的表达升高,但无统计学差异(P>0.05);体外实验结果显示,加入Hp共同孵育的实验组XIAP蛋白表达量明显较阴性对照组高,差异有显著性意义(P<0.05).结论 胃上皮细胞在恶性转化过程中伴有XIAP的表达上调,XIAP的诱导表达可能出现在萎缩性胃炎之前.Hp感染伴胃上皮细胞XIAP蛋白的表达升高,但尤统计学差异.Hp体外能够刺激胃型上皮的XIAP蛋白表达,可能是Hp致癌的机制之一. 相似文献
92.
目的 克隆肝螺杆菌(H.hepatieus)基基团接受趋化信号转导蛋白(MCSTP)全基因,并应用生物信息学方法对其进行分析.方法 以肝螺杆菌全基因组作为模板,设计肝螺杆菌MCSTP c1977特异性引物,利用PCR方法扩增目的 基因片段,连接至原核表达载体pET22b(+).从而构建原核表达质料pET22b+/MCSTP并测序鉴定.廊用牛物信息学方法分析MCSTP基囚的序列同源性及其结构特征.结果 克隆的MCSTP基因经测序可知与GenBank公布的肝螺杆菌标准株ATCC51449序列一致性达99%,仅第1 160 bp处由A变为T.利用生物信息学方法进行分析可发现此基因与空肠弯曲杆菌、幽门螺杆菌具有非常低的相似性,表明其在微生物界巾具有一定的特异性.结论 成功构建pET22b+/MCSTP重组质粒,并通过生物信息学技术进行序列及结构分析,为进一步研究其生物学功能及致病机制提供了线索和依据. 相似文献
93.
目的 本研究旨在调查通过siRNA抑制FHL2表达后对β-catenin活性及其下游基因survivin表达的影响,探讨两者在肠癌发生中的协同作用。方法 (1)PCR扩增含有β-catenin作用位点、长为340bp的survivin基因启动子片段,克隆入PGL3-basic载体,构建荧光素酶报告质粒pluc340。(2)脂质体瞬时转染法将β-catenin活性报告质粒pTOPFLASH、pFOPFLASH和pluc340转染入胃肠癌及正常细胞株,双荧光素酶法测定其启动子活性,并评价其对fhl2 siRNA的反应。(3)RT-PCR方法检测基因表达。结果 成功构建了survivin启动子片段pluc340;荧光素酶活性检测显示:β-catenin 转录活性在胃肠癌细胞明显高于正常细胞;siRNA抑制FHL2表达后,β-catenin转录活性下降,survivin表达降低。结论 抑制FHL2的表达能够降低β-catenin转录活性及下游癌基因的表达,干扰Wnt信号通路,说明fhl2有望成为肠癌治疗的新靶点。 相似文献
94.
95.
P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体的构建及其体外表达 总被引:1,自引:1,他引:1
背景:NOD2/CARD15基因序列单核苷酸多态性(SNP)与欧美人群的克罗恩病(CD)明显相关.其中R702W、G908R和3020insC3个SNP位点与CD的相关性尤为显著。而13本、韩国以及我国香港和浙江地区的研究均未发现上述3个SNP的改变,但最近研究发现了可能与中国人CD相关的P268S突变。目的:构建P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体和体外转染体系,为研究突变型NOD2/CARD15的功能提供实验基础。方法:应用定点诱变技术构建P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体,以阳离子脂质体介导体外转染技术瞬时转染人胚肾细胞HEK293T.以蛋白质印迹法和逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测HEK293T细胞NOD2/CARD15的表达。结果:经克隆、酶切、测序证实获得P268S突变型NOD2/CARD15基因,突变载体转入HEK293T细胞后,NOD2/CARD15有效表达。结论:成功构建了P268S突变型NOD2/CARD15真核表达载体,阳离子脂质体是人胚肾细胞有效的体外转染体系。 相似文献
96.
幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)现已证实的传播途径有口口或粪口两种方式,医院感染主要是胃镜传播目前己开始受到重视,但我国的报道尚不多,本研究应用(14)~C呼气试验((14)~C-UBT)对该现象进行了研究。 相似文献
97.
过氧化氢酶对SW480细胞应激反应的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
目的: 观察过氧化氢酶(catalase ,CAT),对脂多糖(liposaccharide,LPS)诱导肠上皮SW480细胞凋亡,细胞内TNF-α、IL-1β、IL-8的表达和NF-κB激活的影响.方法: LPS刺激SW-480细胞后,应用流式细胞术观察细胞凋亡;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测细胞内TNF-α、IL-1β、IL-8 mRNA的表达水平;应用免疫电泳迁移率改变分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)法检测细胞内NF-κB的激活.结果: CAT预孵后细胞凋亡(24.97±2.35)%较正常对照组(1.23±0.25)%明显减少(P<0.05). TNF-α (0.65±0.59)、IL-1β (0.32±0.06)、IL-8 (0.62±0.25)的表达较LPS组[(1.33±0.94),(0.83±0.05),(1.03±0.20)]和CAT治疗组[(1.31±0.07),(0.82±0.04),(0.98±0.23)]明显降低(P<0.05).NF-κB 的核结合活性也减弱,但较正常对照组仍明显增强.结论: CAT能抑制NF-κB 的核结合活性,降低SW480细胞对应激的反应,减少细胞凋亡. 相似文献
98.
目的测定晚期消化道肿瘤患者肠道通透性的改变,探讨消化道肿瘤是否影响肠粘膜屏障功能。方法健康志愿者、晚期消化道肿瘤患者各16名,每人口服乳果糖、甘露醇液后采集6 h尿样。尿样和乳果糖、甘露醇的标准样经肟化处理后通过气相色谱分析仪进行检测分析。结果甘露醇峰、乳果糖峰出峰时间稳定,峰面积与含量呈线性相关;消化道晚期肿瘤患者与健康志愿者尿样中的乳果糖含量和乳果糖/甘露醇比值存在显著差异(P<0.05),乳果糖含量增高,而甘露醇含量2组无显著差异。结论晚期消化道肿瘤患者肠粘膜通透性增加,存在肠粘膜屏障功能障碍。 相似文献
99.
过氧化氢酶和黏附素保守区二价疫苗治疗小鼠幽门螺杆菌感染 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:利用人类幽门螺杆菌(H.pylori)感染的小鼠模型研究过氧化氢酶和黏附素保守区二价疫苗治疗H.pylori感染的作用. 方法: 把已感染H.pylori的小白鼠分成7组, 分别通过灌胃方法给予过氧化氢酶和黏附素保守区(各100 μg)加霍乱毒素CT(2 μg)、过氧化氢酶(100 μg)加CT (2 μg)、黏附素保守区(100 μg)加CT (2 μg),PBS,单纯过氧化氢酶(100 μg)、单纯黏附素保守区(100 μg)、单纯CT (2 μg),1次/wk,共4次,治疗结束后4 wk处死动物,取胃黏膜行半定量细菌培养检查H.pylori情况. 结果: 治疗实验各组H.pylori根除率分别为: 过氧化氢酶和黏附素保守区加CT组69.2%(18/26)、过氧化氢酶加CT组30.8%(8/26)、黏附素保守区加CT组38.5%(10/26);生理盐水组、单纯过氧化氢酶、单纯黏附素保守区、单纯CT组根除率均为0%. 未根除H.pylori的小鼠,疫苗治疗组H.pylori的定植密度明显低于其他4组(P<0.05). 此外,二价疫苗组的H.pylori根除率及定植密度较单价疫苗组均有显著性差异(P<0.05). 结论: 由过氧化氢酶和黏附素保守区加免疫佐剂组成的二价口服疫苗较单价口服疫苗有更好的免疫治疗效果,多价疫苗是未来H.pylori疫苗的研制方向. 相似文献
100.
目的研究XAF1对胃肠癌细胞周期的影响,以及细胞周期与凋亡诱导的关系。方法在胃肠癌细胞AGS和Lovo中瞬时/稳定转染XAF1,应用免疫荧光和流式细胞技术研究XAF1与MPM2分布及表达的关系,并观察XAF1过表达对化疗药物诱导的凋亡有无影响。结果免疫荧光染色发现XAF1过表达的细胞其MPM2染色也呈强阳性,并出现细胞凋亡的典型形态;XAF1显著增加细胞对血清剥夺及5-FU和cisplatin诱导凋亡的敏感性。结论XAF1能够增加胃肠癌细胞对凋亡的敏感性,因而有望成为肿瘤基因治疗的重要靶标。 相似文献