幽门螺杆菌粘附素基因alpA的克隆与高效表达

目的 克隆并表达幽门螺杆菌粘附素AlpA基因。方法 提取幽门螺杆菌染色体基因，用PCR方法扩增alpA基因，将其克隆至表达载体pET-22B( ),转化大肠杆菌BL21（DE3），IPTG诱导表达。结果 分离得到了1.5kb的alpA基因片段，并在大肠杆菌中实现了该基因的高效表达，在37℃诱导表达3h后，表达产物占细菌总蛋白的31．9％。表达以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在，其中主要是包涵体的形式，目的蛋白占不溶性蛋白的64．8％。结论 幽门螺杆菌alpA基因的克隆与表达为Hp疫苗的研制打下了基础。     

Detection of toxigenic Clostridium difficile by polymerase chain reaction

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｏｘｉｇｅｎｉｃＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｄｉｆｆｉｃｉｌｅｂｙｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎＣｈｅｎＣｕｎｌｏｎｇ（陈村龙）；ＺｈｏｕＤｉａｎｙｕａｎ（周殿元）；ＰａｎＬｉｎｇｊｉａ（潘令嘉）；ＷａｎｇＪｉｄｅ（...     

电动角膜异物钻治疗角膜残锈效果观察

笔者于1984年试制成功“电动角膜异物钻”,至今用此钻已治疗了生锈的铁渣性浅层角膜界物328例,取得较好效果,特报告如下。 临床资料 1984年4月以来,我院眼科门诊共收治已生锈的铁渣性浅层角膜异物328例,其中年龄最小8岁,最大65岁,进异物到就诊时     

高原部队人群幽门螺杆菌感染的流行病学调查

目的 了解Hp在高原部队人群中感染状态及与上消化道疾病的关系。方法 对驻青藏高原（海拔2800-5231公尺）某邵官兵517人进行普查，年龄18-40岁。采用胃镜普查和^14C-尿素呼吸试验方法，接受胃镜普查的受检均在肾窦部取活检2块，分别行Hp快速尿素酶试验和病理检查。结果 高海拔地区部队人群Hp感染率较低海拔地区为高，入伍仅1月的新兵，Hp感染率为38.18%，而另两组人群长期生活在高原不同海拔高度至少1年以上，Hp感染率达52.42%和62.32%。新兵组与其它两组相比具有显性差异（p<0.05和p<0.01）。结论 不同海拔高度Hp感染率不同，高海拔地区部队人群Hp感染率较低海拔地区为高，高原自然环境特点和缺氧可能是导致Hp在胃粘膜的定植并引起Hp感染率增加的重要素因之一。     

五种HP根除方案对高原部队HP感染的病人治疗效果的比较

了9筛选适合于高原部队防治由于HP感染所致的上消化道疾痛的HP根除治疗方案，设计了5种不同的治疗方案，并对胃镜检查证实的140名HP阳性的患进行随机分组治疗，治疗结束后4周采用“C-尿素呼吸试验复查，溃痔患胃镜复查并行HP快速尿素醇试验和病理检查．结果表明：以蒋诺为主的2号和3号四联方案HP根除率分别为92．23%和91．67%，但不良反应较多；4号方案(雷尼替丁150mg2／天，甲硝唑200mg4／天，呋哺唑酮100mg4／天)HP根除率为83．33%，但与2号和3号四联方案比较并无显差异(P>0．05)，且不良反应少，般从性好，药品成本低。因此，根据我们的结果，4号方案是一种较为理想的并适合于高原基层部队的HP根除治疗方案，值得在临床推广应用。     

猫是幽门螺杆菌的动物宿主

猫是幽门螺杆菌的动物宿主王继德，周殿元，张万岱，徐智民，杨海涛我们应用常规微生物、病理技术及分子生物学方法在猫胃粘膜检出了幽门螺杆菌（ＨＰ）。１８只家养猫均自市场购得，运回实验室的当天宰杀，以排除实验室污染的可能性。杀死动物后立即剖腹，取新鲜胃粘膜组...     

应用^14C呼气试验检测幽门螺杆菌的胃镜传播

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)现已证实的传播途径有口口或粪口两种方式，医院感染主要是胃镜传播目前已开始受到重视，但我国的报道尚不多，本研究应用^14C呼气试验(^14C-UBT)对该现象进行了研究。     

精氨酸对胰腺癌介入治疗患者血清sTNFR-1和T淋巴细胞rDNA转录活性的影响

目的：探讨精氨酸增强的胃肠外营养对胰腺癌患者介入治疗术后血清可溶性肿瘤坏死因子受体-1（sTNFR-1）和T淋巴细胞rDNA转录活性水平的影响及其临床意义。方法：分别用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）和核仁形成区相关蛋白银染技术测定50例中晚期胰腺癌患者行动脉栓塞化疗术治疗前后血清sTNFR-1和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的改变，并与健康对照组比较分析。结果：胰腺癌组介入治疗前sTNFR-1增高，外周血T淋巴细胞rDNA转录活性降低，与对照组比较有显著性差异（p〈0．01）；行化疗栓塞术后，患者血清sTNFR-1降低，外周血T淋巴细胞rDNA转录活性增高，治疗前后有显著性的差异（p〈0．05）；应用精氨酸治疗组较未用组血清sTNFR-1下降和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性升高更显著（p〈0．05）。结论：检测胰腺癌患者血清sTNFR-1和外周血T淋巴细胞rDNA转录活性的水平．有助于了解病人的免疫状况，介入治疗能改善机体免疫功能．辅以合理的免疫营养素能增强这种作用。     

幽门螺杆菌过氧化氢酶预防大鼠溃疡性结肠炎的实验研究

目的研究幽门螺杆菌过氧化氢酶对大鼠溃疡性结肠炎的预防作用。方法应用葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）制备SD大鼠溃疡性结肠炎（UC）模型,将大鼠随机分为正常对照组、模型（DSS）组、幽门螺杆菌过氧化氢酶（Hp-CAT）预防组,观察大鼠一般症状,病理学方法检查大鼠肠黏膜改变,RT-PCR方法检测大鼠肠粘膜内TNF-α、IL-1β、IL-8mRNA的表达。结果DSS组最早出现腹泻及肉眼血便,CAT预防组较晚仅出现不同程度腹泻,正常对照组无改变。大体病理学及组织病理学见CAT预防组病理改变明显轻于DSS组,正常对照组无改变。DSS组和CAT预防组TNF-α、IL-1β、IL-8的表达水平均较正常对照组明显增高（P〈0.01）,CAT预防组的表达较DSS组却明显降低（P〈0.05）。结论幽门螺杆菌过氧化氢酶能够减轻大鼠溃疡性结肠炎的临床症状及肠道病理学改变,其机制与降低肠黏膜炎性因子表达有关。     

Smac/DIABLO和Survivin shRNA联合转染对大肠癌Lovo细胞凋亡的影响

背景与目的:Smac/DIABLO是一种新发现的促凋亡蛋白,通过阻滞凋亡抑制蛋白(包括Survivin),激活caspase-9和caspase-3而发挥作用.本实验研究线粒体促凋亡蛋白Smac/DIABLO和沉默凋亡抑制基因Survivin联合应用对大肠癌细胞凋亡的影响及其促凋亡机制.方法:构建Survivin的shRNA-EGFP质粒和Smac-pcDNA3.1质粒,将其用脂质体单、共转染至大肠癌Lovo细胞;Western blot检测survivin基因和Smac基因的蛋白表达;Ho-chest 33258染色观察凋亡核形态学变化,并粗略计数凋亡率;流式细胞仪PI单染测凋亡周期;caspase-3活性检测试剂盒检测caspase-3活性.结果:转染48 h后单、共转染组的Smac蛋白水平增加而Survivin蛋白水平下降;单、共转染组Hochest 33258染色可见明显的凋亡核形态学变化,凋亡率高于各对照组,且共转染组凋亡率(18.5±1.7)%高于单转染组(9.6±1.8)%、(15.0±0.3)%;Smac组G0/G1期增多为(51.0±6.2)%,而Survivin shRNA组S期细胞增多为(53.3±1.3)%(P＜0.05);caspase-3活性比Smac和Survivin shRNA共转组为(169±3)%,高于Smac组(143±5)%、Survivin shRNA组(152±6)%,且都高于各对照组(P＜0.05).结论:Smac/DIABLO和Sur-vivin shRNA协同作用激活caspase-3途径,抑制大肠癌Lovo细胞生长而促进细胞凋亡,Smac阻滞细胞周期于G0/G1期而RNA干扰Survivin后细胞周期阻滞于S期.