HIV 感染者血浆循环 DNA 定量分析及临床意义

血浆循环DNA是一种游离的细胞外DNA,主要存在于血液、滑膜液等体液中,生理情况下体内循环DNA的含量很少,当机体处于炎性反应、组织细胞损伤或肿瘤时,循环DNA水平会相应的增加［1］,增加的循环DNA主要来自破坏的细胞释放至外周血或者肿瘤细胞主动分泌到外周循环,因而定量检测循环DNA含量的变化有助于疾病的诊断及病情的监测。艾滋病是由HIV感染引起的慢性传染病。 HIV主要侵犯、破坏人体CD4＋T淋巴细胞,导致机体免疫功能受损乃至缺陷,最终并发各种严重机会性感染和肿瘤。因此,早期监测HIV感染者病情变化对于并发症的发生、提高生存质量、延长患者寿命有着重要意义。本研究采用荧光定量PCR技术检测各期HIV感染者外周血循环DNA的含量,探讨循环DNA水平作为HIV感染者病情判断的指标。     

顺铂诱导的人肺腺癌细胞凋亡过程中miR-638的表达水平研究

目的探讨体内外顺铂(DDP)给药后miR-638表达水平及变化,评价miR-638表达在DDP诱导人肺腺癌细胞凋亡中的意义。方法建立荷SPC-A1瘤的BALB/c裸鼠移植瘤模型,经尾静脉注射DDP后,检测各组裸鼠血清miR-638表达水平。体外培养SPC-A1并经DDP作用不同时间后,检测培养上清miR-638表达水平及细胞凋亡率。收集60例肺腺癌患者DDP化疗前后的血清样本,检测miR-638在化疗前后的表达改变情况并分析其与预后的关系。结果体外DDP处理SPC-A1细胞后凋亡率在24、48和72 h时均显著高于同时间点对照组(P均0.01),且随时间延长显著增高(任意两组间P0.01);DDP作用后培养上清中miR-638表达水平呈时间依赖性增高,且在24、48、72 h均显著高于相应对照组(P均0.05);且SPC-A1培养上清中miR-638水平与凋亡率呈正相关(r=0.711,P0.01);DDP治疗组裸鼠血清miR-638表达水平明显高于生理盐水处理组和未治疗对照组(P均0.05),而后两组间差异无统计学意义(P0.05);接受DDP化疗后血清miR-638表达上调的患者总体生存率明显高于表达下调者(P0.05)。结论 miR-638在体内和体外DDP诱导的人肺腺癌细胞凋亡中均出现表达上调,提示miR-638可能对肺癌DDP化疗中判断预后及疗效观察具有一定价值。     

基于管家基因和水平转移基因的菌株亲缘性分析:60株耐药大肠埃希菌研究

目的:了解1组(60株)耐药大肠埃希菌的菌株亲缘性?方法:对该组耐药大肠埃希菌4种与耐药相关的管家基因和45种水平转移获得与β-内酰胺类?氨基糖苷类?喹诺酮类耐药相关基因以及7种整合子?转座子?插入序列?接合性质粒遗传标记进行检测?并对检测结果进行样本聚类分析?结果:60株耐药大肠埃希菌多态性明显,多数菌株已发生演化?只有6?53号株;10?14号株,7?8?26?40号株3组携带相同基因(同一克隆)?结论:耐药基因的样本聚类分析可识别出具有相同耐药特征的菌株,具有一定的流行病学意义,为追溯耐药菌传播途径提供方便?     

案例式教学在临床免疫学检验实验教学中的应用

目前,案例式教学已逐步应用于医学教育。南京医科大学医学检验系近年来在临床免疫学检验实验教学中进行了案例式教学的应用探讨。本文对比了案例式教学与传统教学方法的优缺点,并介绍了我系在临床免疫学检验实验教学中应用案例式教学的具体方法、应用体会,以及案例式教学在实施过程中存在的问题及解决方案。     

胰岛素样生长因子受体表达与肿瘤细胞生长和转移

正常细胞分裂和分化过程受生长因子调控；在肿瘤的生长及转移过程中，一些生长因子及肿瘤细胞表面生长因子受体亦起着决定性作用。目前已发现肿瘤细胞的凋亡、转化、浸润性生长及远处脏器转移与胰岛素样生长因子Ⅰ（ Ｉ Ｇ ＦⅠ） 及其受体（ Ｉ Ｇ ＦⅠ Ｒ） 有关。肿瘤细胞表面的 Ｉ Ｇ ＦⅠ Ｒ 表达的高低、周围微环境中的 Ｉ Ｇ ＦⅠ浓度大小，在一定程度上决定了该肿瘤细胞的致瘤性及转移特性。     

血培养阳性病原菌的科室分布与抗菌药物敏感性

目的分析血培养阳性病原菌的科室分布及抗菌药物敏感性特征。方法以WHONET5.4软件分析2006～2008年医院血培养阳性结果。结果2006～2008年医院血培养阳性分离株1065例,阳性率为11.2%;主要包括凝固酶阴性葡萄球菌379株(35.6%)、大肠埃希菌167株(15.7%)、金黄色葡萄球菌118株(11.1%)、肺炎克雷伯菌43株(4.9%)、铜绿假单胞菌28株(2.6%);主要发生在血液科(18.0%)、感染科(7.2%)、肾内科(7.1%)、急诊科(6.9%)和ICU(6.9%)等科室;其中,血液科、感染科、肾内科、泌尿外科和消化科以大肠埃希菌占绝对优势(23.7%～50.6%),外科、呼吸科、急诊科、ICU、老年医学科以葡萄球菌属为主,血培养真菌阳性常见于感染病科、血液科和ICU(8.2%～39.0%);血培养阳性病原菌对常用抗菌药物的敏感性明显高于同时期其他标本分离的病原菌。结论血培养阳性病原菌在不同科室间的分布和抗菌药物敏感性不同。     

免疫磁珠对肺腺癌小鼠模型micro-CT的增强作用

  目的  研究偶联单抗NJ001的免疫磁珠对肺腺癌裸鼠模型micro-CT扫描的增强作用。  方法  经尾静脉注射SPC-A1-luc细胞建立肺腺癌裸鼠模型,生物发光成像定量监测肿瘤的大小。裸鼠分为:生理盐水组、裸磁珠组和免疫磁珠组,每周分别注射生理盐水、750 nm裸磁珠溶液和偶联NJ001的750 nm免疫磁珠溶液,于注射前和注射后4 h进行micro-CT扫描。利用免疫组织化学验证肿瘤组织中NJ001特异性抗原SP70的表达。  结果  免疫磁珠组在第4周即可检测到肿瘤,而生理盐水组和裸磁珠组均到第6周才能检测到。第6周生理盐水组、裸磁珠组和免疫磁珠组micro-CT扫描肿瘤的灰度值分别为注射前的59.05±0.66、60.69±0.55和58.25±0.32,注射后的60.30±1.83、61.05±0.68和67.41±3.82。与注射前相比,免疫磁珠组注射后的灰度值显著增加,差异具有统计学意义（P=0.007 9）。生理盐水组和裸磁珠组注射后的灰度值与注射前相比差异均无统计学意义（均P＞0.05）。  结论  偶联单抗NJ001的免疫磁珠对肺腺癌裸鼠模型micro-CT扫描有增强作用,并且有望用于肺癌的早期诊断。      

熔解曲线法用于肺癌APC基因甲基化模式的研究

目的 以熔解曲线法测定4株肺癌细胞株和肺癌病人APC基因启动子区的甲基化模式.方法 以脐血淋巴细胞DNA及其转甲基后的DNA经化学修饰、克隆测序的质粒,作为完全非甲基化和完全甲基化标准品.设计通用引物,采用加入荧光染料SYBR Green I的荧光定量PCR法扩增包含21个CpG位点的APC基因启动子区的目的序列,以熔解曲线法通过与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值比较,确定四株肺癌细胞株(NCI-H446,NCI-H460,SPCA1,NCI-H520)在该区段的甲基化模式,并通过克隆测序验证.同时测定两例肺癌患者癌组织中APC基因启动子区甲基化模式.结果 四株肺癌细胞株中,NCI-H446,SPCA1和NCI-H520的Tm值与完全非甲基化标准品的Tm值相同,而NCI-H460的Tm值有两个,分别与完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值吻合,并经克隆测序验证.两例肺癌患者癌组织的Tm值位于完全非甲基化和完全甲基化标准品的Tm值之间.结论 小细胞肺癌细胞株NCI-H446,肺腺癌细胞株SPCA1和肺鳞癌细胞株NCI-H520的APC基因启动子区为完全未甲基化型,而大细胞肺癌细胞株NCI-H460APC基因启动子区甲基化模式为等位基因杂合型.两例肺癌患者癌组织中的APC基因启动子均为部分甲基化型.熔解曲线法是简单、经济和实用的甲基化模式检测方法.     

L H750血液分析仪白细胞分类结果异常的分析

目的解决LH‐750血液分析仪白细胞分类中单核细胞和嗜碱性粒细胞假性增高的干扰.方法对32例存在白细胞分类散点图异常以及血涂片手工分类证实存在单核细胞、嗜碱性粒细胞假性增高的EDTA‐K2抗凝全血标本,在不同的放置时间用LH‐750血液分析仪分别检测.结果适当延长标本放置时间,单核细胞和嗜碱性粒细胞百分比显著下降,接近手工分类值.结论合理的EDTA抗凝剂浓度以及适当的标本放置时间可以减少LH‐750血液分析仪白细胞分类错误.