顺铂诱导SPC-A1人肺腺癌细胞凋亡过程中miR-27a的表达及意义

目的:检测miR-27a在顺铂(DDP)体外诱导人肺腺癌细胞株SPC-A1凋亡过程中的表达变化,探讨其与细胞凋亡之间的相关性及其检测的临床意义?方法:体外培养SPC-A1细胞,实验组加入终浓度为2.5 μg/ml DDP,同时设置不加DDP的对照组?观察12?24?48和72 h后显微镜下细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,real-time PCR检测培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a的表达变化?结果:DDP(2.5 μg/ml)组SPC-A1细胞形态呈凋亡改变,在48和72 h凋亡率分别为(59.3 ± 2.5)%和(76.4 ± 3.1)%,均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中和SPC-A1细胞内miR-27a含量在24?48和72 h均显著高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?DDP (2.5 μg/ml)组培养上清液中miR-27a含量在12?24?48和72 h逐渐升高,两两比较差异均有统计学意义(P < 0.05)?结论:miR-27a在DDP诱导的SPC-A1细胞凋亡中表达升高,提示其可能参与细胞凋亡调控;对miR-27a进行定量检测有望用于对肺腺癌化疗疗效的评估?     

抗人非小细胞肺癌单克隆抗体对肺腺癌抑制作用的实验研究

目的:研究抗人非小细胞肺癌单克隆抗体(单抗)NJ488-1对肺腺癌的体内外抑制作用。方法:将人肺腺癌细胞SPC-A1分别与不同浓度(0、200、400、800、1 600、2 000μg/ml)的单抗NJ488-1在双层琼脂中共同培养2周,计算克隆形成率、抑制率;建立人肺癌移植瘤动物模型,腹腔注射不同剂量(200、400、800μg)单抗或生理盐水,作为单抗组和对照组,测量肿瘤体积,3周后处死小鼠,称量肿瘤湿重,计算抑瘤率;400μg/ml单抗与SPC-A1细胞作用24、48 h后,观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:软琼脂克隆形成试验中,200μg/ml单抗作用SPC-A1细胞2周后克隆抑制率为23.4%,400μg/ml达62.5%,800μg/ml及以上浓度抑制率达100%;裸鼠移植瘤实验,400、800μg单抗组平均肿瘤体积显著小于对照组(P=0.004,P=0.003);4组小鼠平均瘤重组间差异有统计学意义(P=0.044),其中400、800μg单抗组平均瘤重显著低于对照组(P=0.032,P=0.015),200μg和800μg单抗组间也存在显著差异(P=0.048),200、400、...     

K-ras基因突变与大肠癌

在中国大肠癌的发病率在消化道肿瘤中占第二位。目前，大肠癌的发生发展机制仍未清楚，从分子水平上揭示基因变化，以阐明大肠癌的发病机制是大肠癌的研究重点。RAS基因是普遍存在的真核基因家族，在哺乳动物、鸟类、软体动物、植物、真菌和酵母中都已被确认。序列分析结果揭示，RAS基因和它们的表达产物高度保守，这就意味着它们在细胞增殖和分化过程中起重要作用。K-ras基因突变是最常见的大肠癌相关基因改变之一，本文着重介绍人类大肠癌中的RAS基因家族的突变。     

胰岛素样生长因子Ⅰ受体与细胞凋亡信号转导

胰岛素样生长因子Ⅰ受体(IGF-ⅠR)是一种跨膜受体,属于酪氨酸激酶受体家族,与胰岛素受体有高度的同源性.在接受其相应的配体刺激后,IGF-ⅠR可以激活包括IRS-1,IRS*2,shc和PI3-激酶等多种胞内亚单位,产生级联信号转导反应,通过启动相关的信号转导通路来发挥抗细胞凋亡的生物学作用.     

卵巢癌细胞通过P38 MAPK通路促进CD8~+调节T细胞的生成

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在卵巢癌细胞(SKOV3)诱导CD8+Treg分化过程中的作用。方法建立SKOV3与健康人CD8+T细胞体外共培养体系,设置CD8+T细胞单独培养组为对照组。共培养5 d后,收集各组CD8+T细胞,荧光定量PCR和流式细胞术检测CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达率;功能抑制试验检测两组CD8+T细胞对nave CD4+T细胞增殖能力的影响;Western blot检测MAPK通路相关蛋白(ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、P38 MAPK/p-P38 MAPK)的表达水平;P38 MAPK特异性抑制剂SB203580预处理CD8+T细胞后,评价CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达变化。结果共培养组CD8+T细胞中CD25及Foxp3表达率均显著高于对照组(P0.05),CD28表达率显著低于对照组(P0.05);共培养组CD8+T细胞相比对照组,抑制nave CD4+T细胞的增殖力增强;Western blot结果显示,共培养组p-P38 MAPK的表达水平显著高于对照组(P0.05),SB203580预处理后CD8+T细胞中Treg相关标志物表达率均下调。结论卵巢癌细胞通过活化CD8+T细胞的P38 MAPK信号通路诱导具有抑制作用的CD8+Treg的生成,促进肿瘤进展。     

人胃癌裸鼠原位移植和转移模型的建立及两种方法比较

目的：建立人胃癌裸小鼠原位移植和转移模型，并比较两种不同方法的结果。方法：将肿瘤组织块和肿瘤细胞悬液种植于裸小鼠胃壁形成原位移植瘤，观察和比较了两种方法所建立模型肿瘤生长状况、移植成功率和自发转移的发生率。结果：胃癌组织块种植的原位成瘤率达100％，淋巴结广泛转移率90％，肝转移发生率75％。细胞悬液种植的原位成瘤时间较组织块法延迟2周，成瘤率为67％，淋巴结广泛转移率为50％，肝转移发生率仅为30％。结论：两种原位移植和转移模型均具有人胃癌自然生长过程的特点，以肿瘤组织块原位模型为优，该模型的建立可为人胃癌转移机制和抗转移实验治疗的研究提供一种有价值的工具。     

肺癌单克隆抗体制备及研究

以纯化肺癌肿瘤相关抗原免疫BALB/c系小鼠,应用杂交瘤技术,建立了抗人肺癌(腺癌及鳞癌)单克隆抗体CL2B细胞株。用间接免疫荧光技术检测36例肺癌肿瘤组织的冰冻切片,其中32例找到带有强荧光的肿瘤细胞,而另4例经HE染色证明末初到肿瘤细胞。CL2B单克隆抗体除对某些肿瘤(宫颈癌、乳腺癌)有弱阳性反应以外,对正常人的肺及其它脏器和血细胞都没有交叉反应,有很好的选择性。以CL2B单抗作用于肺癌细胞表面相应的抗原后,癌细胞生长受到抑制,且对抗肿瘤药物的敏感性发生变化。     

急性脑梗死患者血浆循环DNA测定的意义

目的探讨循环DNA在急性脑梗死患者中的应用价值。方法采集20例急性脑梗死患者(研究组)发病后24h内静脉血2ml,采用双重荧光定量PCR技术检测血浆DNA水平,同时检测血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)。采集同期20例健康体检者静脉血为对照组。结果治疗前研究组血浆循环DNA水平显著高于对照组(t=5.237,P=0.000),研究组hs-CRP显著高于对照组(t=4.890,P=0.000);治疗后循环DNA显著下降(t=4.461,P=0.000);hs-CRP治疗前后差异有统计学意义(t=3.964,P=0.000)。脑梗死患者血浆循环DNA水平与其血清hs-CRP水平呈正相关(r=0.613,P=0.022)。结论循环DNA可作为反映脑梗死后脑组织细胞出现损伤及严重程度的一项指标。     

2008年南京医科大学第一附属医院细菌及真菌耐药性监测

目的 了解2008年我院临床分离病原菌分布及其对常用抗菌药物的耐药性.方法 细菌及真菌鉴定采用API系统;细菌药物敏感试验测定采用纸片扩散法(K-B法),根据CLSI 2008版判断结果;真菌药物敏感试验测定采用Rosco纸片法,判断标准由Rosco公司提供:WHONET 5.4软件进行统计分析.结果 2008年我院共分离出病原菌4972株,其中,革兰阳性菌1106株,占22.2%,革兰阴性菌2475株,占49.8%,真菌1386株,占27.9%.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的菌株分别占59.2%和52.7%.葡萄球菌属中甲氧西林耐药株对大多数常用抗菌药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感株,未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺的耐药株.肠球菌属中,屎肠球菌和鸟肠球菌对多数抗菌药物的敏感率低于粪肠球菌,3种肠球菌均已出现少数对万古霉素或替考拉宁耐药的菌株.肠杆菌科细菌中大肠埃希菌和克雷伯菌属的ESBLs分离率为59.4%和45.3%,产ESBLs菌株对常用抗菌药物的耐药率高于非产ESBLs菌株.非发酵革兰阴性杆菌对抗菌药物的耐药率均显著高于肠杆菌科细菌.结论 细菌耐药性呈增长趋势,白假丝酵母菌的分离率升至第1位,需加强耐药性监测,并采取有效控制措施.     

关节液中的梅毒螺旋体检测

为了解关节液中梅毒螺旋体感染情况，对两例骨关节置换的患者进行了梅毒血清和关节液检测。采用梅毒血清快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）及梅毒核酸DNA的PCR检测，现报告如下。