RhIL-21对NK-92MI细胞生物学活性的影响

目的探讨rhIL-21对NK-92MI细胞免疫功能的影响。方法以不同浓度(25～100ng/ml)的rhIL-21培养NK-92MI细胞24～72h,观察NK-92MI细胞的增殖。以50ng/ml的rhIL-21处理NK-92MI不同时间后,FACS检测NK-92MI细胞的凋亡,NK-92MI细胞表面NKG2D受体及胞内颗粒酶-B蛋白的表达;细胞杀伤试剂盒检测NK-92MI细胞对靶细胞K-562的细胞毒效应;RT-PCR检测NK-92MI受体NKG2D,效应分子颗粒酶-B、穿孔素及细胞因子IFN-γ基因mRNA的表达;ELISA检测其分泌IFN-γ的水平。结果 RhIL-21虽能抑制NK-92 MI细胞的增殖(P<0.05),但不会促进细胞的凋亡(P<0.05)。RhIL-21能促进NK-92MI细胞穿孔素、IFN-γ、颗粒酶-B、NKG2D受体基因及相应蛋白质的表达上调(P<0.05)。rhIL-21预处理组NK-92MI对K-562细胞的细胞毒效应也明显增强(P<0.05)。结论 RhIL-21能增强NK-92 MI细胞的细胞毒效应,IL-21在肿瘤的免疫治疗中有潜在临床应用价值。     

雷帕霉素诱导骨髓增生异常综合征MUTZ-1细胞凋亡及机制研究

为了观察雷帕霉素(RAPA)对骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系MUTZ-1增殖的抑制、凋亡作用并探讨其相关的机制,用MTT法检测RAPA对MUTZ-1细胞增殖的影响;流式细胞术分析MUTZ-1细胞Annexin V/PI、caspase3、细胞周期、PTEN、p-Akt和p-mTOR蛋白的表达。结果表明,RAPA能显著抑制MUTZ-1细胞增殖,呈剂量和时间的量效关系(24、48和72小时的r=0.67,0.61和0.72)。RAPA作用MUTZ-1细胞24-72小时,G0/G1期细胞较对照组明显增高(p0.01),随着药物浓度增加而增多(r=0.94、0.93和0.92),细胞周期阻滞在G0/G1期。Annexin V+PI-细胞较对照组增多(p0.01),且随着浓度的增高而增多(r=0.91、0.94和0.96)。PTEN表达荧光强度与对照组比较显著增高(p0.01),随着药物浓度增高表达增强(r=0.93),p-Akt和p-mTOR表达的荧光强度与对照组比较显著降低(p0.05),随着药物浓度增高而表达减低(r=0.95和0.91)。结论:RAPA与靶分子mTOR作用,抑制PTEN/PI3K-Akt/mTOR信号转导通路,诱导MUTZ-1细胞凋亡。     

高血压颈动脉粥样硬化与P-选择素及C-反应蛋白的关系

目的:通过对高血压患者血小板P-选择素(CD62P)百分率及血清C-反应蛋白(CRP)的检测,探讨CD62P及CRP在高血压颈动脉粥样硬化(CAS)中的意义。方法:采用流式细胞术和免疫比浊法检测高血压组及对照组的CD62P及CRP,结合超声检查颈动脉内膜-中膜厚度(I MT),进行对比研究。结果:高血压组CD62P阳性百分率及血清CRP分别为(24.56±10.63)%和(4.02±1.83)mg/L,明显高于对照组(P<0·01,P<0·05),高血压I MT增高亚组的CD62P阳性百分率、血清CRP亦高于I MT正常亚组(P<0·01,P<0·05),且颈动脉I MT与CD62P、CRP正相关。结论:CD62P、CRP与高血压CAS严重程度相关,可作为评价高血压动脉粥样硬化的良好指标。     

Bcl-2反义寡核苷酸对放射治疗诱导肺癌细胞凋亡的促进作用

目的通过体外试验,研究Bcl-2反义寡核苷酸对放射治疗诱导肺癌细胞凋亡的促进作用。方法NCI-H446肺癌细胞株分5组,分别为空白对照、单纯照射组、脂质体加照射组、无义序列加照射组、反义寡核苷酸加照射组。培养至6h、12h、24h、48h和72h,分别收集各组细胞,瑞吉染色做细胞形态学分析,应用RT-PCR半定量测定p53、Bcl-2和PTEN基因的mRNA表达,流式细胞仪检测各组细胞DNA倍体,分析细胞凋亡指数。结果Bcl-2反义寡核苷酸联合照射后p53和PTEN表达明显增加,Bcl-2mRNA表达则明显降低。流式细胞仪检测照射后72h空白对照组、照射组、脂质体加照射组、无义序列加照射组、反义寡核苷酸加照射组凋亡率分别为0.14±0.09,13.17±2.47,11.84±1.76,13.72±1.4,21.26±2.97,反义寡核苷酸加照射组与其余4组比较差别有显著性意义(P<0.01)。结论Bcl-2反义寡核苷酸对放射治疗诱导肺癌细胞凋亡有促进作用;细胞凋亡受p53和Bcl-2基因调控,p53基因的表达促进了细胞的凋亡,而Bcl-2基因的高表达抑制细胞的凋亡,PETN的表达与凋亡也有相关性。     

头颈部鳞癌抑癌基因nm23-H1的表达、DNA倍体与淋巴结转移的关系

目的 :研究头颈部鳞状细胞癌 (HNSCC)nm2 3 H1基因的表达、DNA含量与淋巴结转移的关系。方法 :选择 3 0例未经治疗的HNSCC患者术后新鲜肿瘤标本 ,应用免疫组化ABC技术和流式细胞术 (FCM )检测瘤细胞nm 2 3 -H1基因表达、异倍体 (aneuploid)和S期细胞比例 (S phasefraction ,SPF) ,探索这 3个参数与淋巴结转移之间的关系。结果 :nm 2 3 H1的阳性率为 60 % ,异倍体检出率为 66.7%。nm 2 3 H1表达、DNA倍体和SPF与淋巴结转移有关 (均为P <0 .0 1)。nm 2 3 H1表达与DNA倍体无关 (P >0 .0 5 ) ,nm 2 3 H1表达与SPF有关 (P <0 .0 5 )。结论 :对nm2 3 H1表达、DNA倍体和SPF的检测可预测HNSCC淋巴结转移趋势和预后 ,是指导临床治疗有意义的一项生物学指标     

流式细胞术分析舌体鳞癌细胞DNA倍体和细胞周期的意义

目的 探讨舌体鳞癌细胞的DNA倍休、细胞周期特征，并分析其临床意义。方法 采用流式细胞术测定40例舌体鳞癌标本及10例正常舌体组织中的异倍体、DNA指数、增殖指数和S期细胞比例，并研究这些参数与肿瘤组织分期之间的关系。结果 40例舌体鳞癌中，异倍体检出率为70％(28／40)；舌体鳞癌与正常舌组织相比，DI、SPF有显著性差异，相对于低分化组而言，高、中分化组的DI、SPF及PI有显著性差异。结论 流式细胞仪可用来分析舌体鳞癌的DNA；DI可以鉴别细胞的良恶性；DI、SPF、PI可以作为恶性程度及预后的指标。     

白血病患者血脂变化及临床意义

目的探讨白血病患者的血脂变化规律及临床意义.方法采集白血病初治病例95例,治疗缓解后15例,一共110例,并收集健康体检者59例作为正常对照.用日本OLYMPUSAU-2700全自动生化分析仪检测TG、CHO、HDL、LDL、ApoA1、ApoB、ApoA1/ApoB、Lpa.结果白血病患者组较正常对照组,TG升高(P＜0.05),有显著性差异.ApoB均下降,但无显著性差异(P＞0.05),Lpa均升高,但无显著性差异(P＞0.05).CHO、HDL、LDLApoA1、ApoB、ApoA/ApoB均下降,有显著性差异(P＜0.05).白血病患者与治疗缓解后TG、CHO、HDL、LDL、ApoA、Lpa均有显著性差异(P＜0.05),ApoB、ApoA、ANB血性差异(P＞0.05),白血病患者治疗缓解后血脂各项指标与正常对照无明显差异(P＞0.05).结论检测血脂变化可成为白血病患者疗效判断,病情监测,追踪随访一项有重要意义的敏感指标.     

胸液细胞DNA倍体分析联合癌胚抗原检测的诊断价值

目的应用流式细胞术(FCM)测定胸液细胞DNA倍体,并同时检测胸液癌胚抗原(CEA)水平,以探讨其在恶性胸液诊断中的价值.方法65例胸液分为恶性及结核性2组.用FCM检测胸液中DNA倍体,同时测定CEA.结果胸液DNA倍体诊断恶性胸液的敏感度、特异度及诊断指数分别为0.6786、0.9730和0.6516,而CEA的敏感度、特异度及诊断指数分别为0.4643、0.9189和0.3832.2项指标中其中1项阳性,则诊断的敏感度、特异度及诊断指数分别为0.7857、0.8919和0.6776,2项指标同时阳性,则特异度达1.00.结论FCM进行DNA倍体分析是结核性及恶性胸液鉴别的一项指标,联合检测CEA,可提高诊断的有效性.     

RA患者外周血CD8＋CD28-和CD4＋CD25＋调节性T细胞的表达及疾病活动性指标相关性分析

目的：检测类风湿性关节炎（RA）患者外周血CD8＋CD28-、CD4＋CD25＋调节性T细胞亚群,探讨其与临床活动性指标的关系。方法：采用流式细胞术检测台州医院RA患者外周血CD8＋CD28-、CD4＋CD25＋ T细胞亚群比例,探讨调节性T细胞与RA活动性、类风湿因子（RF）、免疫球蛋白（Ig）、C反应蛋白（CRP）、补体C3、抗CCP抗体、抗核抗体（ANA）、血小板（PLT）及血沉（ESR）的关系。结果：活动期RA患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞亚群比例显著低于正常对照组（P〈0.01）,但稳定期RA患者与正常对照组结果差异无统计学意义（P〉0.05）。活动期和稳定期RA患者CD8＋CD28-与正常对照组相比较,结果无统计学意义（P〉0.05）;CD4＋CD25＋与CRP密切相关（r=-0.593,P〈0.05）,CD8＋CD28-与ESR相关系数呈弱相关。CD4＋CD25＋和CD8＋CD28-细胞与RF、IGG、C3、ANA、anti-CCP和PLT未见明显相关性。结论：活动期RA患者外周血CD4＋CD25＋ T细胞亚群比例减少,CD4＋CD25＋ T细胞可能与类风湿性关节炎疾病进展有关。     

Th17细胞在骨髓增生异常综合征骨髓组织中的表达及意义

目的了解骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓Th17细胞、调节性T细胞(Treg)的表达量,以探讨MDS的免疫学机制。方法流式细胞术检测65例MDS患者和18例健康对照骨髓细胞Th17细胞及Treg细胞表达量。ELISA方法分析骨髓血浆细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平。结果 MDS患者骨髓Th17细胞及Treg细胞数量均高于健康对照组(P均<0.01)。在MDS亚型中Th17细胞及Treg细胞数量从RA/RAS、RAEB-Ⅰ到RAEB-Ⅱ逐渐增高(P均<0.05)。骨髓细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平较对照组显著增高(P均<0.01),在MDS亚型中细胞因子IL-17、IL-10、TGF-β、IL-21、IL-22水平从RA/RAS、RAEB-Ⅰ到RAEB-Ⅱ也逐渐增高(P均<0.05)。结论 MDS骨髓微环境中Th17细胞、Treg细胞表达量均增多,可能促进了MDS病程进展。