冬凌草甲素上调人肝癌HepG2细胞 PTEN基因表达与诱导凋亡作用

［摘要］目的研究冬凌草甲素诱导人肝细胞癌HepG2细胞凋亡及与PTEN基因表达的关系。方法四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法测定冬凌草甲素诱导HepG2细胞的增长抑制；流式细胞术分析DNA倍体测定细胞凋亡；琼脂糖凝胶电泳观察DNA碎片；逆转录 聚合酶链式反应（RT PCR）半定量分析冬凌草甲素诱导人肝细胞癌HepG2细胞后PTEN mRNA的表达情况。结果MTT比色法测得冬凌草甲素对HepG2细胞增殖具有明显抑制作用，并随冬凌草甲素浓度的升高及作用时间的延长而增强；流式细胞术分析HepG2细胞经冬凌草甲素诱导后，细胞凋亡率随作用时间延长而增加；DNA电泳呈梯状条带。RT PCR测得PTEN基因mRNA的表达随细胞凋亡增加而逐渐增高。 结论冬凌草甲素能够明显抑制HepG2细胞增殖，并诱导肝癌细胞凋亡， 其作用途径可能与上调PTEN mRNA表达有关。     

阿米福汀诱导K562细胞凋亡及机制研究

阿米福汀(Amifostine,AMI)作为一种细胞保护剂,临床已广泛用于多种肿瘤的治疗.但它对肿瘤细胞的作用研究却不多见,对血液肿瘤细胞的作用研究就更为鲜见.     

白三烯B4对巨噬细胞小凹蛋白-1表达的影响及其与冠状动脉斑块不稳定的关系

目的研究小凹蛋白-1(Cav-1)及白三烯B4(LTB4)与冠状动脉斑块不稳定的关系,观察LTB4及其抑制剂对巨噬细胞Cav-1表达的影响并探讨其意义。方法免疫组化检测41例人尸检冠状动脉粥样斑块中巨噬细胞Cav-1蛋白的表达;以流式细胞技术检测167例入选患者外周血单核细胞Cav-1的表达水平,用ELISA检测血清中LB4的表达水平;分别用浓度为10-8mol/L、10-7mol/L的LTB4及10-7mol/LU75302处理THP-1源性的巨噬细胞,RT-PCR检测细胞内的TNF-αmRNA,Cav-1mRNA水平及Western Blot检测Cav-1蛋白表达的变化。结果与稳定斑块相比,不稳定斑块中巨噬细胞聚集处Cav-1表达下调或表达阴性。急性冠脉综合征(ACS)组中急性心梗(AMI)组及不稳定性心绞痛(UAP)组外周血单核细胞Cav-1表达水平皆显著低于稳定心绞痛(SAP)组、非冠心病组(99.2±40.8MnX比(176.1±90.3)MnX、(246.0±122.8)MnX(t=-4.786、5.112),(104.8±37.4)MnX比(176.1±90.3)MnX、(246.0±122.8)MnX(t=-4.508、-4.942,P0.01);AMI组血清LTB4表达显著高于UAP组、SAP组及非冠心病组(209.8ng/L比40.7ng/L、59.5ng/L、63.8ng/L,Z=-3.771、-3.426、-2.849,P0.01)。LTB4可下调Cav-1mRNA及蛋白表达水平(0.963、0.959比1.186,t=-5.079、-5.148),0.712比0.840(t=-4.050,P0.01),上调肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达(0.637比0.555)(t=5.148,P0.01);U75302预处理组Cav-1mRNA及蛋白水平上调(1.089比0.959、0.963(t=3.018、3.087,0.799比0.712,t=2.849,P0.05),TNF-αmRNA水平下降(0.529比0.637,t=-3.087,P0.01)。结论冠状动脉不稳定斑块中巨噬细胞及ACS患者外周血单核细胞Cav-1表达降低,AMI患者血清中LTB4表达上调,提示高水平LTB4及低表达Cav-1与斑块不稳定有关。LTB4下调THP-1来源的巨噬细胞Cav-1mRNA及蛋白的表达,上调TNF-αmRNA水平,U75302预处理可拮抗上述LTB4的作用,提示使用拮抗LTB4的药物可能有稳定粥样斑块的作用。     

CD56在急性髓系白血病细胞上的表达及微小残留病分析

目的探讨CD56在非M3急性髓系白血病(AML)中的表达及在微小残留病(MRD)检测的意义。方法应用流式细胞术分析145例非AML-M3 AML患者免疫表型,以CD56、CD19、CD117、CD34、CD33为标志,CD45设门MRD分析。结果 145例AML患者中CD56阳性37例,占25.52%,CD19阳性17例,占11.72%,分布在M1、M2、M4、M5。CD56或/和CD19阳性的AML患者共49例,其中CD56和CD19同时阳性5例,均为M2亚型。P170蛋白阳性36例,占24.83%,其表达率与CD56呈显著正相关(P<0.01)。48例AML患者在诱导治疗结束和维持治疗第14、32、56周作MRD检测。单纯CD56+组MRD阳性率93.55%,复发率77.41%,与单纯CD19+组(MRD阳性率25.00%,复发率0)比较,差异有统计学意义(P均<0.01)。CD56+CD19+组MRD阳性率100.00%,复发率80.00%,与单纯CD56+组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与单纯CD19+组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CD56、CD19在非M3 AML有较高的...     

冠心病患者19项生化指标调查分析

目的探讨常规生化项目检测对冠心病患者诊治的意义。方法应用日本OLYMPUS AU-2700全自动生化分析仪检测100例冠心病患者和60例健康对照者肝功能、肾功能、血糖、血脂系列的含量。结果冠心病患者血尿酸（UA）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL—C）、载脂蛋白B（ApoB）、脂蛋白a（Lpa）显著高于健康对照组（P〈0．05），总胆红素（TB）、高密度脂蛋白（HDL—C）显著低于健康对照组（P〈0．05）。其他生化项目差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论联合检测血总胆红素、尿酸与血脂对冠心病诊断及病情的监测有一定价值。     

金荞麦Fr4诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响

目的研究金荞麦有效部位Fr4能否诱导HL-60细胞凋亡及对端粒酶活性的影响。方法用MTT法检测Fr4对细胞增殖的影响;光学显微镜和透射电镜观察细胞形态改变;Annexin-V/PI双染法检测细胞膜介导的凋亡;琼脂糖凝胶电泳观察DNA碎片;TRAP-PCR-ELISA检测端粒酶活性。结果金荞麦Fr4 60~240 mg.L-1能诱导HL-60细胞凋亡,电镜观察到典型的凋亡细胞,电泳呈现出阶梯状条带,流式细胞仪检测到早期凋亡细胞数随剂量的增加而升高。MTT法示金荞麦Fr4抑制HL-60细胞增殖,并且呈剂量依赖性趋势,药物作用24 h的IC50为115 mg.L-1,Fr4诱导HL-60细胞凋亡过程中,端粒酶活性下降。结论金荞麦Fr4可诱导HL-60细胞凋亡,其机制可能与端粒酶活力下降有关。     

流式细胞术分析舌体鳞癌细胞DNA倍体和细胞周期的意义

目的探讨舌体鳞癌细胞的DNA倍体、细胞周期特征,并分析其临床意义.方法采用流式细胞术测定40例舌体鳞癌标本及10例正常舌体组织中的异倍体、DNA指数、增殖指数和S期细胞比例,并研究这些参数与肿瘤组织分期之间的关系.结果 40例舌体鳞癌中,异倍体检出率为70%(28/40);舌体鳞癌与正常舌组织相比,DI、SPF有显著性差异,相对于低分化组而言,高、中分化组的DI、SPF及PI有显著性差异.结论流式细胞仪可用来分析舌休鳞癌的DNA;DI可以鉴别细胞的良恶性;DI、SPF、PI可以作为恶性程度及预后的指标.     

原因不明复发性流产患者CD4^＋CD25高表达调节性T细胞表达研究

妊娠是极其复杂的生理过程，正常妊娠的维持有赖于母胎免疫耐受的形成。一旦母胎免疫失衡，可能发生原因不明的复发性流产（unexplained recurrent spontaneous abortion，URSA），CD4^＋CD25^＋调节性T（Treg）细胞在母胎耐受的形成中起重要作用。本研究探讨CD4^＋CD25高表达Treg比例变化与URSA发生的关系。     

沙利度胺治疗初治多发性骨髓瘤的疗效及对血浆IL 6的影响

目的 观察沙利度胺治疗多发性骨髓瘤（MM）的疗效，探讨其作用机制。方法将39例初治MM患者分成治疗组A和治疗组B。两组均给予常规化疗，治疗组A在化疗的基础上给予沙利度胺口服，开始时每次50 mg，bid，2周内逐渐增加至每次100～200 mg，bid，维持治疗6个月流式细胞术检测治疗前后血浆IL 6水平。结果治疗组B和治疗A有效率分别为68.42%和95.00%，平均疾病无进展期分别为6.11个月和9.35个月；治疗组A疗效明显高于治疗组B(P＜0.05)；两组治疗后血浆IL 6水平均显著降低(均P＜0.01)，治疗后治疗组A较治疗组B低(P＜0.01)。结论沙利度胺治疗MM有较好的效，可延长疾病无进展时间，其机制可能是通过下调IL 6水平起作用。