重庆地区小鼠诺如病毒的感染及其对免疫功能影响的初步研究

目的：建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,普查重庆市实验小鼠诺如病毒（murine Norovirus,MNV）的感染情况及其对BABL/c-nu小鼠免疫功能影响的初步研究。方法：①根据GenBank中收录的MNV全基因组序列,设计MNV特异性引物,检测其特异性、灵敏度、重复性和稳定性,并和两个实验动物质量检测单位对123份小鼠临床样本开展比对检测,以最终构建荧光定量RT-PCR检测方法。②应用该方法比较小鼠不同肠道排泄物（盲肠内容物、新鲜粪便和排出体外24 h粪便）中MNV的检出情况。③应用该方法普查重庆市实验小鼠感染MNV的情况。④6~8周的BABL/c-nu小鼠被随机分为3组（n=3）：正常对照组、MNV感染30 d组、MNV感染60 d组,收集各组小鼠血清及肝、肺、脾、结肠,HE染色观察各脏器的病理变化;酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测血清、脾和结肠肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）及干扰素-γ（interferon gamma,IFN-γ）的含量。结果：①建立的荧光定量RT-PCR方法特异性强,与同种属其他病毒均不发生交叉反应,方法的灵敏度、重复性和稳定性良好,与另外两个实验动物质检单位的检测结果吻合度高达98%。②新鲜粪便与盲肠内容物中MNV的检出结果完全一致;24 h的陈旧粪便也能准确反映出该笼小鼠MNV的感染情况。③重庆市实验小鼠存在较高的MNV感染率,且封闭群和近交系小鼠MNV感染率无品系特异性（68.3% vs. 70.6%, χ2=0.116,P=0.733）,但基因修饰小鼠比普通小鼠更易感染MNV（78% vs. 64%, χ2=6.434,P=0.011）。④与正常对照组小鼠相比,BABL/c-nu小鼠自然感染MNV后肝、肺、脾和结肠均出现不同程度的炎症细胞浸润和明显的组织病理变化,且结肠组织的TNF-α、IFN-γ水平明显升高（F=21.682,P=0.002;F=77.223,P=0.000）。结论：本研究建立的实时荧光定量PCR方法可靠,且可通过小鼠粪便样本,日常监测MNV的感染情况等;重庆市实验小鼠有较高的MNV感染率,且BABL/c-nu小鼠感染MNV会对动物实验结果造成干扰。因此,各实验动物单位应该重视MNV的传播和防控,加强实验动物的饲养管理,降低实验动物感染MNV的风险。     

人星状病毒的研究进展

人星状病毒(Human Astrovirus,HAstV)是1975年由Appleton和Higgins用电镜检测英国一起腹泻疫情的粪便标本时首次发现,由于病毒颗粒表面呈星形,此后被Madeley和Cosgrove命名为星状病毒.     

南宁市婴幼儿散发性腹泻中诺如病毒基因Ⅱ组4型变异株的流行特征

目的了解南宁市婴幼儿散发性腹泻病例中诺如病毒(Norovirus,NV)基因Ⅱ组(GenogroupⅡ,GⅡ)4型变异株的组成和流行特点。方法采集2010年1月~2011年12月南宁市某医院门诊354例婴幼儿腹泻病例的粪便标本,应用实时荧光逆转录-聚合酶链反应检测NV核酸及其基因组,阳性标本进行核苷酸序列测定和遗传进化分析。结果 354份标本中,NV核酸检测阳性101份,阳性率28.5%,全部属于GⅡ。对测序成功的84株NV的核苷酸序列进行分析,77.4%属于GⅡ.4型(65株),其余为GⅡ.2型(7株)、GⅡ.14型(4株)、GⅡ.7型(3株)、GⅡ.3型(2株)、GⅡ.6型(2株)和GⅡ.12型(1株)。65株GⅡ.4型中,60株(92.3%)为2006b变异株,5株(7.7%)为2010变异株。结论 GⅡ.4型是南宁市婴幼儿中NV所致散发性腹泻的最主要基因型,其中2006b变异株占优势。首次在本地区检测到2010变异株,且该毒株的流行呈上升趋势。有必要加强监测,以及时掌握GⅡ.4型变异株的流行变迁。     

两种方法检测多发性骨髓瘤及微残留病变

目的探讨流式细胞术与毛细管电泳免疫分型在多发性骨髓瘤初诊及微残留病变监测中的意义。方法采用流式细胞术和毛细管电泳免疫分型方法,对多发性骨髓瘤初诊及微残留病变进行检测,并对检测结果进行分析。结果33例多发性骨髓瘤初诊病例流式结果阳性30例,阳性率为90．9％;免疫分型阳性31例,阳性率为93．9％,采用可靠性（信度）分析,两种方法差异无统计学意义。10例追踪病例监测30次微残留病,流式阳性10次,阳性率为33．3％;免疫分型阳性5次,阳性率为16．7％,采用可靠性（信度）分析,两种方法差异有统计学意义。结论流式细胞术与免疫分型都能比较好地检测出初诊患者,两种方法结合能减少患者漏诊,对多发性骨髓瘤的诊断具有重要临床意义。     

广西首次在急性胃肠炎病例中检出GⅠ型诺如病毒

目的研究南宁市某医院门诊急性胃肠炎病例中GⅠ型诺如病毒的感染状况。方法应用荧光定量RT—PCR法对2007年1月-2008年12月南宁市某医院门诊腹泻病例标本进行GⅠ型诺如病毒RNA检测,并对GⅠ型阳性标本进行测序验证。结果在所检测的696份粪便悬液标本中,检出4份GⅠ型阳性,经核酸测序证实为GⅠ型诺如病毒。结论在广西的急性胃肠炎病例中存在GⅠ型诺如病毒感染。     

小鼠SFRP-2基因的克隆及重组腺病毒制备

目的构建小鼠secretedfrizzled-related protein-2(SFRP-2)全基因的重组腺病毒表达系统。方法采用基因工程技术,将SFRP-2基因片段克隆入穿梭质粒pAdTrack-CMV,然后在细菌内与pAdEasy-1进行同源重组,经脂质体转染293细胞包装并扩增腺病毒颗粒。体外原代培养小鼠子宫内膜基质细胞,转染制备的腺病毒颗粒,并用Western blot法检测SFRP-2蛋白的表达。结果构建的小鼠SFRP-2重组腺病毒载体的效价达到5.6×1012pfu/mL,转染原代培养的小鼠子宫内膜基质细胞48h后,有SFRP-2蛋白的明显表达。结论成功构建含小鼠SFRP-2全基因的重组腺病毒载体。     

谈神经外科患者的整体护理与管理

神经外科患者病情复杂多变，病情危重，且并发症多，在临床护理工作中，需要耐心细致的护理，才能及时发现病情的变化并采取相应的护理措施。我们在对神经外科患者的护理中始终以护理程序为指导，贯彻整体护理，对患者进行生理及心理护理，取得了一定的效果，现报道如下。     

中晚期食管癌患者三维适形放疗护理研究

目的:总结三维适形放疗食管癌护理经验。方法:将86例中、晚期食管癌病人随机分为实验组和对照组,分别采用三维适形放疗与常规放疗。观察病人的皮肤反应、末梢血白细胞计数及近期疗效。结果:两组疗效无显著差异,但皮肤反应的发生率和末梢血白细胞下降,实验组较对照组低(P<0.05)。结论:加强患者体位固定及心理护理,严密观察放疗反应是顺利完成三维适形放疗的基础。     

归因训练在中职护理教学中的实践与思考

归因是人们关于行为（包括他人和自己的行为）和事件的原因的知觉和判断。归因理论认为，人们都是根据行为的原因解释行为的，这种解释在决定人们对行为的反应上发挥着重要作用。归因理论的应用研究——归因训练近来日益受到重视。归因训练的基本原则是：归因能够导致某些行为的产生，那么归因上的一个改变就应引起行为上的改变，而这种新的行为又会改变归因。