高胆固醇血症小鼠肝脏的差异表达蛋白

运用以双向电泳为基础的蛋白质组学研究手段,比较分析高胆固醇血症小鼠与正常小鼠肝脏差异表达蛋白。用高脂饲料复制小鼠高胆固醇血症模型,饲喂14周后高脂组小鼠血浆中总胆固醇为9.5±3.9 mmol/L,肝脏中总胆固醇为35.3±3.7 mg/g,均明显高于对照组(P<0.001)。提取两组小鼠肝脏总蛋白,双向凝胶电泳分离蛋白质,所获得的凝胶图谱经软件分析后确定差异点及其等电点与分子质量,利用质谱技术对差异蛋白进行肽质量指纹谱分析鉴定,再与蛋白质数据库中的小鼠肝脏标准图谱匹配验证。双向凝胶电泳分离蛋白质样品的分辨率好、重复性较高,两组间至少有16个点有稳定的差异表达(2倍以上),鉴定其中4个点个为主要尿蛋白系列、2个点为碳酸酐酶Ⅲ、2个点为谷胱甘肽S-转移酶P2。实验结果提示:主要尿蛋白、碳酸酐酶Ⅲ及谷胱甘肽S-转移酶等受雄激素调控的蛋白质表达下调,可能与饮食引起的高胆固醇血症相关。     

新发呼吸道传染病及其应对策略

新发呼吸道传染病因疾病负担重,有可能引发大流行而备受关注。本文简要回顾20世纪以来影响较大的新发呼吸道传染病的流行病学特征,并对我国新发传染病控制中存在的问题及应对策略进行探讨。     

江苏省一起急性胃肠炎爆发的疫情调查

调查和分析一起发生在江苏省常州市某小学急性胃肠炎爆发疫情,明确流行病学特征和基因型特征。方法根据统一设计的流行病学调查表,对病例和对照的饮食、饮水和卫生习惯等情况开展病例对照研究。对病例的排毒情况进行跟踪调查,明确排毒期长短。采集病例和对照的标本,进行荧光定量PCR方法检测,对部分阳性结果标本进行测序以明确基因型。结果11月22日起出现首例病例,11月22日至12月2日为主要发病阶段。此期共发病269例,其中学生发病264例,罹患率17.4%,教师发病5例,罹患率4.4%,两者存在统计学差异(χ2=13,P＜0.01);排毒期调查结果显示,本起暴发疫情最短排毒期为发病后3 d,最长为14 d,中位时间为7 d。共采集172份标本,其中82份检测结果为诺如病毒GII型阳性,未检测到轮状病毒及腺病毒,18份诺如病毒GII型阳性标本测序分析显示均为GII.12基因型。结论结合病例临床特征、流行病学调查及实验室检测结果综合分析,判定本起疫情为诺如病毒GII.12型感染导致的急性胃肠炎爆发疫情,该型别在我省尚为首次发现。爆发原因可能为呕吐物 口引起的大范围传播。     

基于GroEL基因的实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体方法的建立及评价

目的 建立一种敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,用于检测临床标本中的恙虫病东方体。方法 根据恙虫病东方体GroEL蛋白基因序列设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法。并从灵敏度、特异度、重复性及临床标本的检测能力等方面对本方法进行综合评价。结果 建立的实时荧光定量PCR方法具有良好的特异性,可检测出恙虫病东方体Gilliam、Karp、Kato和Kawasaki株。建立的标准曲线循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈现良好的线性关系(r=0.99),灵敏度分析显示样品最低检出浓度为21.8拷贝/μL。批内及批间重复性实验变异系数均小于1.5%,显示本方法具有良好的重复性。对本实验室保存的82份临床标本进行检测,并与常规巢式PCR方法比较,本方法检测出26份阳性标本中的25份,检出率为96.15%。结论 本研究建立的实时荧光定量PCR方法具有较高的敏感性、特异性和稳定性,可用于临床病人及暴发疫情的实验室快速检测。     

江苏省1999—2005年霍乱弧菌的脉冲场凝胶电泳分析

目的了解江苏省1999-2005年间分离的霍乱弧菌核酸特征,及O139群与O1群霍乱弧菌在基因组水平上的关联。方法 NotⅠ酶切霍乱弧菌基因组,脉冲场凝胶电泳(PFGE)得到指纹图谱,并进行比较分析。结果 PFGE指纹图谱将全部136株霍乱弧菌分为6类,PFGE-A型由1株临床来源El Tor、120株临床来源和9株环境来源的O139组成,PFGE-B型由1株临床来源的El Tor组成,PFGE-C型由1株临床来源的El Tor和1株临床来源的O139组成,PFGE-D型由1株环境来源的El Tor组成,PFGE-E型由1株环境来源的O139组成,PFGE-F型由1株临床来源的O139组成。结论PFGE指纹图谱提示O139起源于不同克隆的El Tor霍乱弧菌,为了解O139的进化路线和流行规律提供了有效证据。作为高分辨率的基因分型工具,PFGE可用于追踪霍乱弧菌的暴发流行传染源,并在其分子流行病学研究中发挥重要作用。     

乙肝病毒表面抗原阳性孕妇产前病毒感染状态分析

目的了解乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性孕妇中乙肝病毒(HBV)感染相关指标分布特征,以评价HBV母婴阻断失败高危因素的分布强度及影响因素。方法采用现况调查方法,对2009年8月-2010年12月期间入选的895名HBsAg阳性孕妇进行人口学信息、与HBV感染相关的信息调查,采集血液样品检测HBsAg、HBeAg、抗-HBe及HBV DNA滴度等指标,并对结果进行统计分析。结果 HBsAg阳性孕妇产前HBeAg阳性率为33.4%,HBV DNA载量>107IU/ml者占25.2%,HBsAg滴度≥10 000IU/mL者占29.61%;HBeAg阳性者中,HBsAg滴度与HBV DNA载量间存在密切正相关关系(r=0.53,P<0.01);随孕妇年龄的增加,孕妇产前HBeAg阳性率和HBV DNA载量均有明显降低趋势。结论 HB-sAg阳性孕妇中存在母婴阻断失败高危险因素的比例较高。适当推迟怀孕年龄,可降低HBsAg阳性人群HBV母婴阻断失败的风险。     

江苏省一般人群乙型肝炎表面抗原阳性率与乙肝疫苗免疫的关系

目的:调查分析江苏省3个县一般人群乙型肝炎表面抗原阳性率和乙型肝炎疫苗免疫接种史的关系,为采取针对性干预措施,提高乙型肝炎综合防治水平提供依据。方法:采用分地区整群随机抽样方法确定调查对象,开展问卷调查,采集静脉血,检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)。结果:张家港、丹阳和泰兴的HBsAg阳性率按全国人口构成标化后分别为4.61%、6.88%和10.06%,18岁以上计划免疫前出生人群HBsAg阳性率均显著高于18岁以下计划免疫后出生人群。张家港、丹阳和泰兴3个县中18岁以上年龄组接种乙型肝炎疫苗人群的HBsAg阳性率均明显低于未接种乙肝疫苗人群。结论:张家港、丹阳和泰兴的乙型肝炎疫苗纳入儿童计划免疫已显成效,儿童组HBsAg阳性率明显降低,成人乙型肝炎疫苗接种也可获得明显效果,应提高成人疫苗接种率,以期降低该人群HBsAg阳性率。     

江苏省环境来源的O139群霍乱弧菌的核酸特征分析

目的 分析江苏省2003-2005年之间从环境样本中分离到的霍乱弧菌的核酸特征,及其差异的程度.方法 将11株目的菌株的表型特征(包括血清型,耐药谱,生化特征以及El Tor霍乱弧菌的噬菌体分型)和核酸特征(包括霍乱毒素基因ctx-A、zot、ace、tcp-A的分布情况和脉冲场凝胶电泳指纹图谱)结合起来进行比较和分析.结果 11株菌株中有10株O139群霍乱弧菌,1株El Tor小川;其中6株O139同时对5种以上抗生素耐受,2株O139对4种抗生素耐受,1株0139对2种抗生素耐受,另外1株O139(属于PFGE-C型)和1株小川分别只对一种抗生素耐受;11株霍乱弧菌的生化特征没有明显差异;8株O139同时携带4种毒力相关基因,1株0139只携带zot和ace,另外1株O139(05052)和1株小川未携带这4种基因;9株O139的脉冲场凝胶电泳指纹图谱聚为一类,另外1株O139和小川各自聚为一类.结论 10株O139中有1株(属于PFGE-C型)的耐药谱、毒力相关基因分布及PFGE指纹图谱与其他9株不同,而与分离地点相同的小川相似,提示自然环境中的O139群霍乱弧菌存在着差异.