新型白蛋白微泡经超声介导破裂促进EGFP基因在Cos-7细胞的表达

目的：根据超声介导白蛋白微泡破裂空化效应可以增加真核细胞膜对大分子(如DNA)通透性的原理，探讨一种新的转基因方法，以便安全有效和定向地转移目的基因。方法：实验中选择绿色荧光蛋白基因EGFP为标记基因，以自制的白蛋白微泡为载体，用超声介导微泡破裂的方法在体外进行Cos—7细胞的基因转化，同时以脂质体为对照，激光共聚焦显微镜和流式细胞计数仪分别定性和定量观察细胞转化效率。锥虫蓝染色观察细胞的活性。结果：体外试验发现0．8MHz、1．0W／cm^2、10％占空比(dutycycle)、60s超声介导10％白蛋白微泡破裂可以有效稳定地转化EGFP基因在Cos—7细胞表达，且对细胞无毒副作用。结论：自制白蛋白微泡是一种安全、有效的新型基因载体，在一定超声条件控制下，能增强基因的转导与表达，有良好的靶向性，提示该技术有应用于临床基因治疗的广阔前景。     

泡沫细胞形成过程中清道夫受体的变化

轻度修饰低密度脂蛋白对小鼠肝、脾中清道夫受体ｍＲＮＡ表达的影响姜传仓，陈兵，范乐明，邵莉君，蔡海江（南京医科大学动脉粥样硬化研究中心，南京２１００２９）小鼠静注轻度氧化修饰ＬＤＬ（ｍｉｌｄｌｙｍｏｄｉｆｉｅｄＬＤＬ，ｍｍ－ＬＤＬ）可使其肝、脾清道夫受...     

三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因多态性R219K与脂代谢及冠心病易感性的相关性

目的　探讨三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因R2 19K单核苷酸多态性位点与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病易感性的关系。方法　采用聚合酶链反应—限制片长多态性方法检测 133名正常人和 4 9名家族性高胆固醇血症患者三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因相应片段的多态性。结果　家族性高胆固醇血症患者组三磷酸腺苷结合盒转运子A12 19K等位基因频率显著低于正常人群 (P =0 .0 0 0 1)。家族性高胆固醇血症患者组中 ,K等位基因携带者组 (RK基因型 +KK基因型组 )与RR基因型组比较 ,甘油三酯水平明显降低 (1.14± 0 .5 5mmol/L比 1.76± 0 .5 8mmol/L ,P =0 .0 0 1) ,高密度脂蛋白胆固醇水平有增高趋势 (1.39± 0 .5 4mmol/L比 1.2 1± 0 .32mmol/L ,P =0 .0 6 1)。结论　三磷酸腺苷结合盒转运子A1基因R2 19K多态性中 ,2 19K等位基因与家族性高胆固醇血症患者甘油三酯水平降低和高密度脂蛋白胆固醇水平增高相关联 ,可能对家族性高胆固醇血症患者不早发冠心病起保护作用     

动脉粥样硬化炎症机制的再认识

虽然1856年就已提出动脉粥样硬化是动脉内膜炎症的观点长期未被普遍接受，炎症反应在许多疾病特别是慢性疾病过程中存在已是不争的事实。炎症反应在动脉粥样硬化从起始发病到出现临床事件都发挥重要作用的认识也已获得广泛认同，因而对动脉粥样硬化炎症机制进行重新审视，特别是对近年来有关研究成果加以梳理，无疑有益于我们对动脉粥样硬化发病机理的更深理解和防治措施的合理制订。本文概要介绍动脉粥样硬化炎症机制的近代观点以及脂蛋白、分子标志和遗传等几个方面在炎症机制中的可能作用。     

载脂蛋白M基因启动子区-855T>C多态性与冠心病的关系

目的研究探讨载脂蛋白M多态性与冠心病的相关性。方法采用聚合酶链反应—限制片长多态性分析方法,对418例冠心病患者和372例健康对照者的载脂蛋白M基因启动子上游-855T>C单核苷酸多态性进行分析。利用PCR的方法获得的目的产物长度为231bp,PCR产物与限制性核酸内切酶Hae III经37     

中国人内源性高甘油三酯血症与载脂蛋白A5基因-1131T>C多态性、S19W多态性的相关性

目的探讨中国人内源性高甘油三酯血症患者载脂蛋白A5基因的-1131T〉C多态性及S19W多态性与血脂水平的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析，对182名内源性高甘油三酯血症患者和200名血脂正常者的载脂蛋白A5基因启动子上游-1131T〉C单核苷酸多态性、编码区的S19W（c．56C〉G）多态性、空腹血脂及载脂蛋白水平进行分析。结果患者的体质指数、血清总甘油三酯和总胆固醇水平较对照组显著升高，高密度脂蛋白胆固醇水平则显著降低。-1131T／C单核苷酸多态性位点T和C等位基因频率在病例组和对照组分别为52．7％、47．3％和67.0％、33．0％。等位基因频率和基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。T/C基因多态性等位基因T和C频率在两组问的差异有显著性（P〈0．05）；S19W多态性与内源性高甘油三酯血症发病风险未见明显相关性。结论载脂蛋白A5基因-1131C等位基因与血清甘油三酯的升高相关。     

一个新的家兔高脂血症相关基因的筛选、克隆和序列分析

目的 寻找新的高脂血症相关基因，探讨其分子机理。方法用高脂饲料复制家兔高胆固醇血症模型，采用抑制性消减杂交技术克隆高脂血症相关基因，快速扩增cDNA末端技术扩增全长，用基因芯片和荧光半定量聚合酶链反应技术检测其表达，并用逆转录一聚合酶链反应法观察该基因的组织分布。结果获得一个新的家兔高脂血症相关基因，GenBank登录号为AY24719，长1386bp，编码321个氨基酸，与人类G蛋白α亚基同源性达92％。该基因在家兔心、肝、骨骼肌等组织中广泛表达，其中以胰腺的表达最强。结论对AY248719基因的研究有助于进一步揭示高脂血症的分子机理。     

激素敏感脂酶基因高度表达对泡沫细胞形成的作用

中国仓鼠卵细胞在给予β－ＶＬＤＬ后，细胞内蓄积胆固醇酯，形成泡沫样细胞。以腺病毒基因转移方法书激素敏感脂酶基因转染到中国仓鼠卵细胞中，得到了来自激素敏感脂酶的胆固醇酯水解活性高度表达，此时，β－ＶＬＤＬ导致的胆固醇酯蓄积作用被阻断，提示增加胆固醇酯水解可以防止泡沫细胞形成。     

家兔新基因Gnas的鉴定及其在高脂血症中的功能

目的探讨家兔新基因Gnas在高脂血症中的功能。方法用高脂饲料复制家兔高胆固醇血症模型,分别用胆固醇、25羟胆固醇、低密度脂蛋白刺激HepG2细胞,采用荧光半定量逆转录聚合酶链反应技术检测GenBank中登录号为AY248719的家兔新基因表达情况。结果高胆固醇兔动物模型复制成功,该组血浆和肝脏的总胆固醇及肝脏甘油三酯水平增加均超过10倍,血浆甘油三酯也显著增高。高脂组Gnas基因表达水平明显高于对照组。胆固醇、25羟胆固醇刺激HepG2细胞后Gnas表达无明显改变,400 mg/L低密度脂蛋白刺激HepG2细胞后Gnas表达增强2.15倍。结论对家兔新基因Gnas的研究有助于进一步揭示高脂血症的分子机理。     

泡沫细胞形成过程中清道夫受体的变化

泡沫细胞形成过程中清道夫受体的变化朱宇，蔡海江，范乐明，王南（南京医科大学动脉粥样硬化研究中心，南京２１００２９）动脉粥样硬化早期病变是以动脉内膜下出现泡沫细胞为特征。多数研究表明这些泡沫细胞主要来源于血循环中单核细胞衍生的单核－巨噬细胞，其形成泡沫...