促红细胞生成素对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的:检测促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对荷黑色素瘤小鼠免疫功能的影响.方法:将C57BL/6小鼠随机分为3组:正常对照组、盐水处理组和EPO处理组,盐水处理组和EPO处理组小鼠皮下接种黑色素瘤细胞B16.17天后,检测各组小鼠外周血中红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、红细胞压积(Hct)和白细胞(WBC)数量及脾脏脏器指数;应用流式细胞术检测脾细胞CD4+、CD8+T细胞亚群的分布;ELISA检测血清中IL-2和TNF-α细胞因子的水平.结果:盐水处理组荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量明显低于正常对照组小鼠(P＜0.05),应用EPO可明显提高荷瘤小鼠外周血中RBC、Hb和Hct含量及脾脏脏器指数(P＜0.05),三组小鼠外周血中WBC数量无明显差别(P＞0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠脾脏CD4+T细胞百分率及CD4+/CD8+T细胞比值明显低于正常小鼠(P＜0.05).EPO处理组与盐水处理组相比,CD4+T细胞百分率无差别(P＞0.05),而CD8+T细胞百分率下降(P＜0.05),致使EPO处理组小鼠CD4 +/CD8+T细胞比值升高(P＜0.05);盐水处理组及EPO处理组荷瘤小鼠血清中TNF-α、IL-2含量明显低于正常小鼠(P＜0.05),EPO处理组小鼠血清中IL-2水平与盐水处理组相比增高(P＜0.05),但该两组小鼠血清中TNF-α含量无明显差别(P＞0.05).结论:EPO在改善荷瘤小鼠贫血状态的同时,还可通过提高外周血CD4 +/CD8+T细胞比值和IL-2含量而增强小鼠的免疫功能.     

促红细胞生成素对达卡巴嗪抗小鼠黑色素瘤细胞活性的调节作用

目的检测小鼠黑色素瘤细胞株B16促红细胞生成素受体(Erythropoietin receptor,EPOR)的表达,探讨促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对达卡巴嗪抗B16细胞活性的影响及与Bcl-2家族蛋白表达的关系。方法采用RT-PCR、免疫荧光和激光共聚焦显微镜、Western blot等方法检测B16 细胞EPOR mRNA和蛋白的表达。MTT法和克隆形成试验检测EPO与达卡巴嗪联合应用时对B16细胞增殖的影响。Western blot法检测EPO对B16细胞Bcl-2、Bcl-xL、Bax蛋白表达的影响。结果B16细胞表达EPOR mRNA和蛋白。EPO能有效减少达卡巴嗪诱导B16细胞的凋亡（P<0.05）,EPO作用后,B16细胞Bcl-2、Bcl-xL蛋白表达水平明显增加（P<0.05）,Bax蛋白表达水平未见明显变化。结论B16细胞表达EPOR,EPO可调节化疗药对B16细胞的作用,其作用机制可能与其影响Bcl-2家族蛋白表达有关。     

IL-27促进外周血单个核细胞来源树突状细胞分化成熟

目的:研究IL-27体外对人外周血单个核细胞(PBMC)的来源树突状细胞(DC)分化、成熟及其免疫活性的影响。方法:采集健康成人外周血,密度梯度离心法获得PB-MC,给予GM-CSF、IL-4诱导DC,第5天后根据不同处理因素将DC分为3组:IL-27组、TNF-α组和阴性对照组。倒置显微镜和透射电镜下观察DC形态;流式细胞术(FCM)检测DC表面分子CD1a、CD80、CD83和CD86的表达情况;MTT法检测DC刺激T细胞增殖的能力。结果:IL-27刺激后PB-MC来源DC呈现典型的成熟DC形态学特征。IL-27组DC表面CD1a、CD80、CD83和CD86表达水平较对阴性对照组均明显上调(P<0.05),与TNF-α组DC相比无显著差异。IL-27组DC诱导T细胞增殖的能力较对照组DC明显增高(P<0.05)。结论:IL-27可刺激PBMC来源DC的成熟。     

促红细胞生成素对达卡巴嗪和顺铂抗小鼠黑色素瘤活性的调节作用

目的：研究促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）对荷黑色素瘤小鼠肿瘤生长的影响及其对达卡巴嗪（dacarbazine,DTIC）和顺铂（cisplatin,DDP）抗肿瘤活性的调节作用。方法：将荷黑色素瘤B16细胞的C57BL/6小鼠,分别用EPO、DTIC和DDP以及EPO分别联合DTIC、DDP药物处理,以盐水处理组为对照。观察肿瘤在小鼠体内的生长情况。部分小鼠于停药次日摘除眼球取血,分析血液中红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（Hct）和白细胞（WBC）水平。并颈椎脱臼处死小鼠,剥离瘤体,分别称量瘤质量。其余小鼠用于生存期观察。结果：EPO处理组小鼠的肿瘤体积和质量与盐水处理组相比差异无统计学意义（P〉0.05）;DTIC联合EPO处理组小鼠的肿瘤体积和质量与DTIC处理组相比差异无统计学意义（P〉0.05）;DDP联合EPO处理组小鼠的肿瘤体积与DDP处理组相比明显缩小（P〈0.05）。应用EPO处理组的小鼠外周血RBC、Hb和Hct水平明显高于未应用EPO组（P〈0.05）。结论：EPO对黑色素瘤细胞在小鼠体内的生长没有明显影响;但EPO能调节黑色素瘤细胞对DTIC、DDP的敏感性,且该调节作用与化疗药的类型有关。     

DVD系列教学片在护理学基础教学中的应用体会

目的通过分析DVD系列教学片在护理学基础教学中的作用,论述了DVD系列教学片在教学的必要性。方法注重传统护理教学模式与DVD系列教学模式的区别,并对其中的问题进行深入思考。结果通过有效的备课,结合DVD教学片,补充临床实践,提高护理学基础教学效果。结论DVD系列教学片是一种教学的先进工具,真正的教育者仍然是我们护理学教师,要充分利用DVD教学片发挥学生的积极主动性与创造性,激发学生的学习兴趣,以促进教学的发展,已成为一个重要的课题。     

浅析妊高征病人的健康教育

目的浅析妊高征的健康教育。方法将82例已确诊的病人作为健康教育对象,利用个体教育、群体教育、电话咨询等途径进行教育。结果33例轻度妊高征孕妇未发展为重症,49例中、重度妊高征孕妇未发现子痫及并发症。结论妊高征健康教育在妊高征病人综合治疗中起着良好效果。对控制病情发展和并发症发生,提高患者的母儿健康有重大意义。     

促红细胞生成素对小鼠黑色素瘤细胞增殖的影响

目的研究小鼠黑色素瘤细胞株B16促红细胞生成素受体(erythropoietin receptor,EPOR)的表达,探讨促红细胞生成素(erythropoietin,EPO)对B16细胞增殖作用的影响及与Bcl-2家族蛋白表达的关系。方法采用RT-PCR及Western blot方法检测B16细胞EPOR mRNA和蛋白的表达。B16细胞经不同浓度EPO(0、5、10、100 U/mL)处理后,应用MTT法检测EPO对B16细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期变化;实时荧光定量RT-PCR和Western blot法检测EPO对B16细胞Bcl-2、Bcl-xL和Bax mRNA和蛋白表达的影响。结果B16细胞表达EPOR mRNA和蛋白。EPO可明显促进B16细胞的增殖(P<0.05);EPO可增加B16细胞S期的比例,减少G0/G1期细胞比例(P<0.05)。EPO作用后,B16细胞Bcl-2、Bcl-xL mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达水平未见明显变化。结论 B16细胞表达EPOR,EPO可明显促进该细胞增殖,影响细胞周期发展。其作用机制可能与其影响Bcl-2家族蛋白表达有关。     

促红细胞生成素及其受体在肿瘤发生发展中的作用

研究发现,促红细胞生成素(EPO)及EPO受体(EPOR)在多种恶性肿瘤组织中表达,且EPO能促进肿瘤微血管形成,刺激肿瘤细胞增殖,抑制凋亡,还调节肿瘤细胞对放化疔治疗的敏感性.另有研究表明,EPO的应用不利于肿瘤的控制和预后.EPO对肿瘤患者的疾病进展和生存期的影响仍需进一步研究.     

小鼠乳腺癌4T1细胞中肿瘤干细胞样细胞的富集和鉴定

目的：无血清培养基(serum-free medium, SFM)悬浮培养小鼠乳腺癌细胞株4T1,富集并鉴定4T1细胞株中肿瘤干细胞样细胞。方法：通过含EGF、bFGF和B27等细胞因子的SFM培养富集4T1细胞中肿瘤干细胞样细胞,将其接种于含血清培养基（serum-supplemented medium, SSM),观察4T1肿瘤干细胞样细胞分化情况。应用细胞表面标志CD44+CD24-/low和Hoechst 33342染色法检测4T1细胞中肿瘤干细胞样细胞的比例,小鼠致瘤实验验证不同培养条件下4T1肿瘤干细胞样细胞的致瘤能力。结果：4T1细胞在SFM中能够存活、增殖,并形成细胞球,细胞球可连续传代,若重新接种于SSM中可贴壁分化。4T1细胞球中CD44+CD24-/low细胞比例为6.4%~68.9%,侧群 (side population,SP) 细胞比例为7.3%~61.2%,均显著高于SSM中培养的4T1细胞（P<0.05）;随着SFM中细胞球传代次数增加,CD44+CD24-/low细胞和SP细胞的比例逐渐升高。小鼠致瘤实验结果显示,富集了肿瘤干细胞的细胞球比常规培养4T1细胞的致瘤性更强。结论：乳腺癌4T1细胞可在含多种生长因子的SFM中悬浮生长并形成细胞球,4T1细胞中含有的乳腺癌干细胞样细胞可通过SFM培养法富集。