基于UPLC对龙血通络胶囊特征图谱及5个成分含量的测定

目的 建立龙血通络胶囊超高效液相色谱法（UPLC）特征图谱,并测定7,4′-二羟基黄酮、4,4′-二羟基-2,6-二甲氧基二氢查耳酮、龙血素A、龙血素B、紫檀芪5个成分的含量。方法 采用Agilent Infinity Lab Poroshell 120 EC-C₁₈色谱柱（150 mm×3.0 mm,2.7 μm）,以乙腈（A）-0.1%磷酸水溶液（B）为流动相梯度洗脱,柱温为35 ℃,流速为0.5 mL·min^–1,进样体积为2 μL,检测波长为280 nm。结果 建立了龙血通络胶囊UPLC特征图谱,标定了13批样品中的11个共有特征峰,相似度均大于0.95。5个成分在相应质量浓度范围内呈良好的线性关系（r>0.999 5）,加样回收率为97.93%~107.33%,RSD均小于3.0%。结论 建立的UPLC操作简便、高效准确,可为龙血通络胶囊的质量控制提供参考。     

大株红景天对心肌细胞缺糖缺氧损伤的作用及机制研究

目的:研究大株红景天对心肌细胞缺糖缺氧(OGD/R)损伤的保护作用及机制,探讨其与Akt/Nrf2信号通路的关系。方法:以大株红景天对氧化损伤心肌细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、丙二醛(MDA)含量、一氧化氮(NO)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响为评价指标,研究大株红景天对OGD/R心肌细胞的保护作用,利用PI3K抑制剂联合药物处理细胞,Western blot法检测细胞中p-Akt、Akt、Nrf-2、HO-1蛋白的表达。结果:与模型组相比,大株红景天100μg/ml组能明显降低OGD/R损伤心肌细胞LDH漏出、MDA含量、NO含量,显著升高SOD活性和细胞存活率,同时上调缺糖缺氧诱导的p-Akt、Nrf-2、HO-1蛋白表达的升高,并能够被PI3K信号通路抑制剂抑制。结论:大株红景天对OGD/R损伤的H9C2细胞损伤具有显著的抑制作用,其作用机制可能与激活Akt/Nrf2信号通路有关。     

正交试验优化银翘败毒片的干法制粒工艺

目的:优化银翘败毒片干法制粒的工艺条件。方法:以制粒难易程度和崩解时限等为考察指标,对银翘败毒片中辅料微晶纤维素和可压性淀粉的配比、用量及喷干粉的含水量进行筛选;以颗粒得率和休止角为指标,采用L9(34)正交试验对干法制粒工艺中压轮压力、转速及送料速度等条件进行优化并进行验证试验。结果:微晶纤维素与可压性淀粉的比例为7∶3(m/m),二者与(喷干粉+包合物)的混合比例为1∶5;控制喷干粉含水量在1%~2%之间。干法制粒最优工艺参数为压轮压力3.5 MPa、压轮转速4 r/min、送料速度10 r/min。验证试验中颗粒平均得率为69.2%,平均休止角为31.5°,绿原酸转移率达92%以上,且各指标RSD均在2.53%以下(n=3)。结论:按优化辅料处方和工艺制备的颗粒各项指标均具有较好的重现性和可行性,且工艺稳定,适合工业生产。     

白芍药材UPLC特征指纹图谱研究

目的:建立白芍药材的UPLC特征指纹图谱分析方法,为快速评价白芍药材的质量,完善白芍的质量控制方法提供依据.方法:采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm × 100 mm,1.8 μm),流动相乙腈-0.05%磷酸水溶液,检测波长230 nm.结果:建立了白芍药材的UPLC特征指纹图谱共有模式,标定了15个共有峰,指认了其中5个共有峰,15批白芍药材的相似度为0.891～0.9960结论:该方法快速,可用于评价白芍药材质量.     

HPLC-PDA-MS/MS法研究热毒宁注射液生产过程中栀子化学成分的变化

目的采用高效液相色谱光电二极管阵列检测器串联质谱技术(HPLC-PDA-MS/MS)定性研究栀子药材、栀子中间体以及热毒宁注射液的化学成分。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×250 mm,5μm),以乙腈体积分数0.3%乙酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1;质谱采用ESI源,正负离子同时检测,在m/z 150～800内进行扫描,并对特征离子进行二次裂解,获得二级质谱数据。结果栀子药材共检测到20种化学成分,与对照品对比,确定了栀子苷等10种化学成分;通过紫外光谱信息、一级和二级质谱数据,推测出去乙酰基车前草酸等8种化学成分。其中京尼平酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C以及一未知成分共10种化学成分在热毒宁注射液生产过程中从栀子药材经栀子中间体转移至热毒宁注射液中。结论利用HPLC-PDA-MS/MS对热毒宁注射液生产过程中药材栀子化学成分变化情况进行了研究,为热毒宁注射液生产过程质量控制与评价提供依据。     

桂枝茯苓胶囊化学成分研究（IV）

目的 对桂枝茯苓胶囊内容物石油醚和醋酸乙酯萃取部分的化学成分进行研究。方法 采用硅胶柱色谱葡聚糖凝胶及制备型高效液相色谱进行分离纯化,利用NMR及MS等谱学方法鉴定化合物的结构。结果 从石油醚萃取部分得到8个化合物,分别鉴定为香豆素（1）、7-羟基香豆素（2）、肉桂醇（3）、麦角甾醇（4）、麦角甾-4, 6, 8(14), 22-四烯-3-酮（5）、β-香树脂醇乙酸酯（6）、菜油甾醇（7）、α-香树脂醇乙酸酯（8）;从醋酸乙酯萃取部分得到13个化合物,分别鉴定为芹菜素（9）、山柰酚（10）、槲皮素（11）、山柰酚3-O-葡萄糖苷（12）、儿茶素（13）、表儿茶素（14）、丁香酸（15）、金丝桃苷（16）、正二十碳酸（17）、丁香脂素（18）、牡丹皮苷A（19）、牡丹皮苷C（20）、没食子酰芍药苷（21）。结论 所有化合物均为首次从该复方中分离得到。     

HPLC法测定金银花中新绿原酸等8种成分的量

目的 建立测定金银花药材中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、断氧化马钱子苷8种成分的HPLC方法。方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Luna 5 μm C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇（A）-0.1%磷酸水（B）溶液,梯度洗脱：0～20 min,12%～30% A;20～60 min,30%～50% A,体积流量1.0 mL/min;检测波长237、324 nm,柱温30 ℃。结果 8种成分均达到基线分离,各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系（r＞0.999 9）;回收率在98.72%～102.50%。结论 建立的测定方法准确灵敏、重复性好,能较全面地评价金银花药材的质量。     

油菜花粉化学残渣的化学成分

采用柱色谱技术及制备型液相色谱技术,从油菜花粉经超临界CO2提取后残渣的乙醇提取物中提取分离出1 1个化合物.经MS和NMR鉴定为尿嘧啶核苷(1)、异鼠李素(2)、槲皮素(3)、柚皮素(4)、山柰酚(5)、山柰酚3-O-β-D-葡萄糖昔(6)、山柰酚3-O-β-D-葡萄糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷(7)、异鼠李素-3-O-α-L-鼠李糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷(8),山柰酚-3-O-(2”-O-α-L-鼠李糖-3”-O-β-D-葡萄糖)-β-D-葡萄糖苷(9)、N1,N5-二-(反式-对香豆酸酰)亚精胺(10)、N1,N5,N10-三-咖啡酰-亚精胺(11).其中化合物8～11为首次从油菜花粉中分离得到.     

UPLC测定黄蒲通窍胶囊中β-细辛醚含量

目的建立快速测定黄蒲通窍胶囊中β-细辛醚含量的方法。方法采用超高效液相色谱法。色谱柱为Waters Acquity BEH C18（2.1 mm×50 mm,1.7μm）,流动相为水-乙腈（63∶37）,流速0.35 mL/min,检测波长257 nm,柱温30℃。结果β-细辛醚在0.0343～0.1715μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999,平均加样回收率为98.53%,RSD=2.10%（n=6）。结论所建立的方法快速、简便、易行,结果准确可靠,可作为黄蒲通窍胶囊的质量控制方法。     

人参多糖的分级及其免疫活性初探

目的:采用柱分离对人参多糖进行分级,并考察各级分对脾淋巴细胞增殖的刺激作用,找出活性部位.方法:用快流速Q-琼脂糖凝胶( Q-Sepharose FF)色谱将人参多糖进行分级,先用水和0.4 mol·L - 1 NaCl溶液洗脱,将人参多糖分成中性多糖和酸性多糖,再将酸性糖依次用0 ～0.4 mol·L-1NaCl溶液洗脱,得到不同的级分.取小鼠脾脏制备脾淋巴细胞,调整小鼠脾淋巴细胞密度至3.0×106/mL,加样品混合均匀,孵育48 h,考察每个级分不同浓度(25,50,100,200,400 mg·L -1)对脾淋巴细胞增殖的刺激作用.结果:从GP中分级得到GPN和GPA,GPA分级后得到GPA-1,GPA-2,GPA-3和GPA-4.GP,GPA,GPN,GPA-2,GPA-3和GPA-4对脾淋巴细胞增殖都具有促进作用,其最大刺激指数分别为1.073,1.082,1.119,1.101,1.102和1.296.GPA,GPA-2,GPA-3和GPA-4的刺激作用均随着浓度的增加而增强;GPN随着浓度的增加促进作用减弱,在大于100 mg·L-1时呈现抑制作用,且浓度越大抑制作用越强.GPA-1对脾淋巴细胞的增殖具有抑制作用,且浓度越大抑制作用越强.结论:Q-Sepharose FF色谱可将酸性不同的人参多糖逐级分离.人参多糖各级分对脾淋巴细胞增殖有不同程度的促进作用,以GPA-4的刺激作用最强.