大肠埃希菌O157:H7分离鉴定过程中赫尔曼埃希菌的鉴别

目的：鉴别大肠埃希菌O157：H7和赫尔曼埃希菌。方法：观察菌株在山梨醇麦康凯，营养琼脂及Chromagar O157培养基上菌落形态。生化试验检测菌株的生化特性，血清凝集试验检测菌株的O157和H7抗原，聚合酶链反应法检测O157和H7特异性基因。结果：在营养琼脂培养基上，5株赫尔曼埃希菌均产黄色色素，2株O157：H7菌不产色素；在Chromagar O157培养基上，2株O157：H7菌株呈紫红色，2株赫尔曼埃希菌株呈蓝色，其余3株赫尔曼埃希菌株呈黄绿色。O157：H7菌株KCN试验均为阴性，而赫尔曼埃希菌阳性。O157和H7抗血清坡片凝集试验，7析均为强凝集。O157：H7菌株与O157单克隆抗血清玻片凝集试验均为强凝集，而赫尔曼埃希菌均不凝集。O157：H7菌株O157和H7特异性基因均为阳性，赫尔曼埃希菌均为阴性。结论：赫尔曼埃希菌与O157多克隆抗血清有交叉反应，但单克隆抗血清能区分O157：H7和赫尔曼埃希菌。KCN试验和特异性基因检测亦能鉴别这两种菌。在营养琼脂和Chromagar O157培养基上的菌落形成也有助于两菌的区分。     

口疮散治疗口疮68例

口疮散治疗口疮６８例李思斌，郭喜玲（河南省孟县中医院４５４７００）主题词口疮散／治疗应用，啖，口疮性／中医药疗法口疮是指口腔粘膜上生黄白色如豆大溃点，具有疼痛进食水加重和常易复发等特点。目前治疗该病的方法颇多，但多存在治疗时间长、复发率高等问题，令医...     

肾综合征出血热ELISA诊断抗原的制备

为研制肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）ＩｇＭ ＥＬＩＳＡ诊断试剂盒，本文改进了ＨＦＲＳ抗原的制备方法，即将感染出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）的全细胞破碎添加以硫柳汞、牛血清、ＥＤＴＡ等配制的防腐保护剂，制备ＥＬＩＳＡ液相抗原。经不同温度、不同时间热稳定性试验，结果表明：抗原加保护剂经３７℃１个月，４℃９个月，－１５℃１２个月存放后，仍满足ＥＬＩＳＡ诊断抗原滴度要求。     

大肠埃希菌O157:H7国内流行株新K抗原的发现

大肠埃希菌抗原主要有O抗原和H抗原,相当部分菌株还存在K抗原。K抗原与大肠埃希菌的致病力存在一定关系。我们研究发现,国内一些O157:H7临床标本分离株存在“O”不凝集现象,有K抗原存在的可能性。经实验证实,在分离自腹泻患者粪便标本的3株O157:H7菌株中发现一种新的K抗原(L型)。 1.材料与方法:①试验菌株共3株,编号分别为1304、M45、2364,分离自江苏省腹泻患者粪便标本,经生化鉴定、血清分型及基因检测证实为大肠埃希菌O157:H7。L型K抗原标准菌株33株,由中国药品生物制品检定所提供。②     

呼吸道感染暴发疫情的实验室诊断及病原分析

近年来,呼吸道感染引起的暴发疫情已成为全球性的公共卫生问题,因此对呼吸道感染暴发疫情的快速准确诊断显得越来越重要。2004年,江苏省镇江市数所小学同时发生了呼吸道感染暴发疫情,患者主要表现为发热、咽痛,部分患者扁桃体肿大,少数病人伴有咳嗽、头昏、头痛全身酸痛等症状,     

江苏省传染性非典型肺炎病原学检测研究

目的:建立传染性非典型肺炎(SARS)实验室检测方法,为SARS病例诊断和现场防治提供依据。方法:用逆转录套式PCR、实时荧光定量PCR检测SARS病毒核酸;酶联免疫法检测血清标本SARS病毒IgM抗体;部分PCR检测阳性或SARS病毒IgM抗体阳性病例的标本进行直接电镜观察;简并引物PCR检测冠状病毒属病毒核酸;鉴别诊断IFA检测血清中肺炎支原体等9种常见呼吸道感染病原IgM抗体,PCR检测军团菌以及甲、乙型流感病毒核酸。结果:检测各类临床标本506份。2003年全省报告临床诊断病例7例,5例检测结果阳性;逆转录套式PCR检测各类标本132份,阳性8份;对其中4份PCR扩增产物(108bp)进行了序列分析,与SARS病毒序列100%同源;实时荧光定量PCR检测各类标本30份,阳性3份;酶联免疫法检测血清标本101份,SARS病毒IgM抗体阳性4份;3个诊断病例的各类标本电镜检查发现冠状病毒样颗粒;IFA检测血清标本75份,嗜肺军团菌IgM抗体阳性9份,乙型流感IgM抗体阳性11份,两者同时阳性3份,其他病原体IgM抗体均为阴性。不明发热病例的标本21份简并引物PCR检测冠状病毒,2份咽拭子标本阳性;漱口液、尿液标本各15份PCR检测军团菌、漱口液25份PCR检测甲、乙型流感病毒结果均为阴性。结论:本研究建立的检测方法与临床诊断有比较好的符合性,对于临床诊断和防治工作具有重要的参考价值。PCR检测SARS-CoV特异性较好,而敏感性有待提高。     

江苏省2009—2013年汉坦病毒分离株全基因序列测定及分析

目的:从分子水平分析2009—2013年江苏省分离汉坦病毒(Hantavirus,HV)的型别及变化,为疾病的预防控制提供实验依据?方法:采集2009—2013年江苏省肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)急性期患者血清及监测点鼠肺标本?采用胶体金法检测血清样本中汉坦病毒的IgM?IgG抗体,采用免疫荧光检测鼠肺样本中汉坦病毒抗原,并用VERO E6细胞分离病毒,RT-PCR检测标本培养物中病毒M片段以鉴定HV病毒,采用高通量测序技术对分离株进行全基因组测序,MEGA6.0软件对其进行序列比对和进化分析?结果:分离到的11株病毒与陕西分离株LR1?四川分离株S85-46以及汉坦病毒原型株76-118遗传距离最为接近,属于汉滩(Hantean,HTN)型病毒?分离株与2002年分离的江苏(A9?HTN型)株以及浙江株?安徽株处于不同的进化分支上,表明遗传关系较远?结论:江苏的汉坦病毒优势株发生了变化,而且发生了宿主转换?目前疫苗仍具有保护效力,但需加强监测?     

两种消毒方法对不同介质上细菌芽孢杀灭效果比较

摘要 目的 比较饱和过氧乙酸熏蒸和汽化过氧化氢消毒机消毒对生物安全Ⅲ级实验室内不同种类介质上细菌芽孢的杀灭效果。 方法 采用载体定量杀菌试验和理化分析方法,对两种消毒方法杀灭生物安全Ⅲ级实验室内不同性质载体表面枯草杆菌黑色变种芽孢的效果进行观察。 结果 饱和过氧乙酸熏蒸和汽化过氧化氢消毒机对放置在生物安全Ⅲ级实验室内不同位置的布片、金属片、滤纸片、玻片和蛋壳上污染的枯草杆菌黑色变种芽孢的杀灭对数值均＞5.00。饱和过氧乙酸对铜片和碳钢片有中度腐蚀,对铝片有轻度腐蚀,对不锈钢片基本无腐蚀;汽化过氧化氢消毒对铜片、碳钢片、铝片、不锈钢片均基本无腐蚀。 结论 两种消毒方法对不同物体表面消毒均有良好的消毒效果,饱和过氧乙酸熏蒸法对金属的腐蚀性较汽化过氧化氢强。     

TaqMan荧光定量RT-PCR技术快速检测EV71方法的建立

目的:建立特异、灵敏、快速的TaqMan荧光定量RT-PCR方法,用于快速检测71型肠道病毒(EV).方法:从Genebank下载EV71型VP1基因序列,在其保守区域设计特异性引物与TaqMan探针,并对荧光定量PCR体系与反应条件进行优化,同时验证方法的特异性、敏感性和重复性.结果:该方法对EV71具有高度特异性,与非71型肠道病毒等均无交叉反应,检测灵敏度达2×10-2 TCID50/mL,反应体系具有很高的稳定性,整个操作过程仅需2.5 h.结论:所建立的TaqMan荧光定量PCR方法特异、灵敏、快速,适用于EV71的日常监测和暴发时应急诊断.     

江苏省2008年手足口病病原分析

肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16(CoxA16)为手足口病的主要病原体.江苏与山东、河南、安徽交界的区域是我国两大手足口病高发地区之一,本文对2008年4月上旬至6月中旬江苏12个市城乡63批次355份临床诊断为手足口病病人的咽拭子标本进行了病原分离,并对全部182个分离毒株进行鉴定,以了解江苏手足口病流行的病原特征.