江苏省2008年手足口病病原分析

肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16(CoxA16)为手足口病的主要病原体.江苏与山东、河南、安徽交界的区域是我国两大手足口病高发地区之一,本文对2008年4月上旬至6月中旬江苏12个市城乡63批次355份临床诊断为手足口病病人的咽拭子标本进行了病原分离,并对全部182个分离毒株进行鉴定,以了解江苏手足口病流行的病原特征.     

实验室感染SARS病例的血清学验证

本实验室作为安徽省选定的平行实验室于2004年4月20日接受了安徽省疾病预防控制中心送检的2份血清样品。同日我们对这2份样品进行了抗SAP6-CoV的抗体检测，简要报告如下。来源标示为1，2的2份血清样品收样后编号为2004-4-1、2004-4-2。我们按要求分别采用酶联免疫法和间接免疫荧光法检测了SARS-CoV抗体。     

抗寨卡病毒包膜蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

目的 制备抗寨卡病毒(zika virus,ZIKV)包膜蛋白(envelope protein,E蛋白)单克隆抗体,检测其免疫反应特异性.方法 将ZIKV重组E蛋白免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞用50％聚乙二醇(PEG)融合,经过含有次黄嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶的培养基筛选出阳性克隆,采取有限稀释法获得单克隆细胞株.利用筛选到的单抗作为一抗,行间接免疫荧光实验和免疫转印试验,鉴定单抗的反应特异性.结果 筛选出1株针对寨卡病毒E蛋白的单克隆抗体(命名为13E7-E9),间接免疫荧光实验和免疫转印试验结果表明,该单抗可与寨卡病毒E蛋白结合,且与登革病毒无交叉.结论 成功筛选1株抗寨卡病毒E蛋白的特异性单克隆抗体,可为研发寨卡病毒的免疫诊断试剂奠定基础.     

大肠埃希菌O157：H7特异基因检测与毒力基因分析

目的：对江苏省2000和2001年分离的经血清玻片凝集试验初筛为大肠埃希菌O157：H7（E.coliO157:H7)的菌株进行O157O抗原及H7抗原特异性基因检测，了解2000年监测点宿主动物分离O157菌株毒力基因携带率及毒力基因图谱。方法：用聚合酶链反应法检测O157特异基因，H7特异基因，多重引物聚合酶链反应法检测VT1，VT2，eaeA,hly等毒力基因并进行分析。结果：134株血清玻片凝集试验初筛为E.coliO157:H7的菌株经特异基因检测确定为E.coliO157的占72.4%(97/134),E.coliO157:H7的仅为29.1%(39/134)；非O157菌株占26.9%(36/134)，有44.3%(58/134)的O157菌株鞭毛抗原不是H7。2000年宿主动物分离菌株，经特异基因检测为非O157的不携带毒力基因（0/18）；为E.coliO157:H?的菌株，毒力基因携带率为10.7%(3/28)；确定为E.coliO157:H7的菌株，毒力基因携带率高达93.1%(27/29)。且毒力基因型以VT2 eaeA hly为主。结论：特异性基因检测鉴定E.coliO157:H7，可大大减少血清玻片凝集试验的误判，结合毒力基因检测，可分析E.coliO157:H7菌株毒力基因型的变化，对制定切实有效的防制对策控制E.coliO157:H7流行具有重要意义。     

江苏省发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒的核酸检测及全基因组序列分析

目的 对江苏省2010年发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)进行核酸检测并分析其全基因组序列.方法 用荧光定量PCR的方法对江苏省2010年SFTSV感染病例进行核酸检测,将所有阳性标本进行病毒分离,取8株代表性毒株测定其全基因组序列,序列结果用DNA Star和MEGA4软件进行分析.结果 33例发热伴血小板减少综合征疑似病例中,20例SFTSV核酸检测阳性.1例狗标本SFTSV检测也为阳性.8株SFTSV毒株全基因组序列与国内其他地区流行株的序列高度同源,其中M片段核苷酸序列同源性介于95.8％～98.7％之间,氨基酸序列同源性介于98.7％～99.7％之间;而与汉坦病毒属和白蛉热病毒属的相关序列相比差异较大,M段核苷酸序列同源性最高仅为27.1％,氨基酸序列同源性最高仅为7.3％.与一代病例密切接触后发病的二代病例序列与一代病例序列完全一致;狗携带的SFTSV序列与病人序列高度同源.结论 SFTSV江苏株与国内参考株序列无明显差异,与布尼亚病毒科的其他属序列差异巨大;SFTSV存在人传人的可能性;狗可能是SFTSV的传播宿主之一.     

沪191麻疹疫苗免后不同时间血清学效果观察

沪１９１麻疹疫苗免后不同时间血清学效果观察江苏省卫生防疫站郭喜玲熊小卫沪１９１株麻疹病毒于１９６６年经国家批准正式用于疫苗的生产，其减毒活疫苗的使用在我国已有３０年的历史，对降低麻疹发病率，控制麻疹的暴发流行发挥了重要作用。从血清学角度看，其初免后Ｈ...     

江苏省肠出血性大肠杆菌O157:H7监测资料分析

目的 :了解江苏省肠出血性大肠杆菌 O15 7:H7在宿主动物与人群中的分布及其毒力基因携带状况 ,调查不同人群中致泻性大肠杆菌的感染率。方法 :用免疫磁珠分离法 (IMS)对江苏省6个监测点的宿主动物和人粪便标本进行 O15 7:H7的分离培养 ,并用多重引物 PCR方法 (MPCR)检测分离菌株的志贺氏样毒素 (SL T1和 SL T2 )、粘附抹平因子 (eae A)及溶血素 (hly) 4种毒力基因。结果 :监测共采集腹泻病人及健康人群粪便标本 130 8份 ,宿主动物粪便标本 130 7份。其中 ,流行前期腹泻病人粪便标本 70 7份中检出肠道致病菌阳性标本 110份 ,阳性率 15 .5 6 %。菌株有 6种肠道致病菌 ,包含 1株 O15 7:H7。流行后期腹泻病人粪便标本 30 2份和健康人群粪便标本 2 99份 ,均未检出肠道致病菌。宿主动物粪便标本 130 7份 ,检出 O15 7:H710株 ,阳性率 0 .76 %。流行后期阳性率2 .2 7% ,非常显著地高于流行前期 (χ2 =16 .94 ,P<0 .0 1)。不同宿主动物中检出存在差异 ,其中牛检出率最高为 1.77%。 11株 O15 7:H7菌株毒力基因测定 ,携带 SL T2 +eae A+hly10株 ,携带 eae A+hly1株。枯水期与丰水期水源水标本 6 9份 ,未检出 O15 7:H7。结论 :江苏省腹泻病人和宿主动物中均能检出肠出血性大肠杆菌 O15 7:H7,且菌株均携带毒力基因。     

一种肠出血性大肠埃希菌O157∶H7鞭毛抗原检测新方法

目的　评价抗 -H7血清琼脂方法对大肠埃希菌O15 7∶H7鞭毛抗原的检测效果。方法　采用抗 -H7血清琼脂法对来自人、动物、环境水和食品中的 10 9株疑似O15 7∶H7菌株进行H7鞭毛抗原鉴定 ,并设鞭毛抗原阳性和阴性对照菌株 ,同时与试管凝集法和H 7特异性基因聚合酶链反应 (PCR)法进行比较。结果　 3种方法对鞭毛抗原阳性和阴性对照菌株的检测结果均成立 ,抗 -H7血清琼脂法与试管凝集法比较其敏感性、特异性和符合率均为 10 0 % ;而与H7特异性基因PCR法比较其敏感性、特异性和符合率分别为 93 .75 %、95 .3 1%和 97.2 5 %。结论　抗 -H7血清琼脂法是简便快速、稳定可靠的H7鞭毛抗原鉴定方法 ,具有推广使用价值。     

应用插入序列PCR进行大肠杆菌O157:H7基因分型的研究

目的对不同地区、不同宿主大肠杆菌O157：H7分离株进行基因分型。方法应用插入序列PCR方法，对反应体系中dNTPs、引物以及镁离子浓度等反应条件进行优化。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳检测和分析。结果14株不同来源O157：H7分离株根据插入序列PCR图谱可分为A、B、C、D四个基因型。不同地区O157：H7菌株存在不同的基因型；同一地区、毒力基因谱相同的O157：H7菌株基因型也不相同；不同宿主O157：H7菌株也存在相同的基因型。结论插入序列PCR技术用于大肠杆菌O157：H7的基因分型，简便、快速、敏感，对大肠杆菌O157：H7的分子流行病学研究具有重要价值。     

流感及H5N1亚型禽流感病毒液相检测芯片的制备

目的 建立利用液相芯片技术检测甲、乙型流感和H5N1亚型高致病性禽流感病毒的方法,并对该方法进行评价。方法 对GenBank中甲型流感病毒的NP、乙型流感病毒的HA以及高致病性禽流感病毒（H5N1）的H5、N1基因片段序列进行同源性比对,根据保守序列,设计针对各基因的简并引物和寡核苷酸探针,制备探针偶联微球,将样本核酸多重PCR扩增产物与微球进行杂交,以Bio-Plex液相芯片检测系统进行芯片检测。结果 该方法可以对甲型流感病毒的NP基因、乙型流感病毒的HA基因以及高致病性禽流感病毒（H5N1）的H5、N1基因同时进行检测,病毒核酸的最低检出量为1pg,检测特异性高。结论 成功构建了甲、乙型流感病毒和H5N1亚型高致病性禽流感病毒液相芯片检测系统,为流感、禽流感的快速检测、诊断奠定了基础。