Chelex100法从贮存食管拉网脱落细胞涂片中提取DNA并作PCR分析的应用和意义

目的探讨从贮存20年的食管拉网脱落细胞涂片的微量细胞中抽提DNA的方法和可行性；比较p53基因在正常食管上皮和重度不典型增生上皮中的突变差异。方法利用螯合型离子交换树脂Chelex100作为介质，一步法从食管拉网脱落细胞中提取用作PCR分析的DNA，共提取食管正常上皮与重度不典型增生上皮细胞涂片各24例，采用PCR-SSCP分析法进行p53基因第7外显子的突变检测。结果所有48例标本中微量细胞的DNA抽提均获成功；正常食管组p53基因第7外显子均未发生突变，重度不典型增生组5例发生突变，其中3例在10年、12年、14年后转变为食管癌。结论Chelex100法简便、高效，能从微量细胞中抽提DNA，使对20年前食管拉网细胞涂片进行分子水平的检测成为可能；p53基因第7外显子的突变使食管上皮重度不典型增生细胞具有了癌变趋势。     

从贮存20年的微量细胞中提取DNA并做PCR分析的实验研究

目的:探讨从二十年前贮存的食管拉网微量细胞涂片中提取DNA并进行食管癌基因检测的方法和可行性,比较P53基因的突变在食管癌前期病变和正常食管上皮中的差异.方法:利用螯合型的离子交换树脂Chelex100作为介质,一步法从食管拉网脱落细胞提取DNA,应用PCR-SSCP方法和PCR-RFLP方法进行p53基因第5外显子及第7外显子的突变检测.结果:48例标本P53基因检测均获成功.食管上皮重度不典型增生细胞中发现有5例突变发生,均为p53基因第7外显子,而第5外显子未发现突变;正常食管鳞状上皮拉网脱落细胞中均未发现突变.检测到的5例突变中,其中有3例分别在10年、12年和14年后转变为食管癌.结论:Chelex100法能从微量细胞涂片中提取DNA,使对20年前食管拉网细胞涂片标本进行分子水平的检测成为可能.为食管癌前期病变的研究提供一种新的方法.p53基因的突变使食管上皮癌前期病变细胞具有了癌变趋势.     

胸膜外心包部分切除术治疗急性心包炎3例

1998年 11月至 1999年 11月 ,我院对 3例急性心包炎患者行胸膜外心包部分切除术 ,疗效满意 ,现报告如下。1　临床资料1.1　病历摘要 :例 1,男 ,2 4岁。因高热、心紧、气促 5天 ,于 1998年 11月 2日入院。查体 :T4 0 .1℃ ,P36次 /分 ,BP14/ 9k Pa。心界向两侧扩大 ,心音遥远 ,律齐 ,肝肋下3cm,剑下 4 cm。X线胸片和 B超提示心包腔积液。心包穿刺液培养为金色葡萄球菌生长。临床诊断为金色葡萄菌性心包炎 ,根据药敏试验用苯唑青霉素和洁霉素等抗感染并行心包穿刺抽液 3次。后 2次抽不出脓液 ,体温波动在 38.5℃～ 39℃之间 ,估计心包腔内…     

组织工程肋骨移植修复胸壁巨大缺损

目的　应用组织工程技术构建的肋骨和带蒂皮瓣移位修复 1例 2 5岁女性患者胸壁巨大韧带样纤维瘤切除后 ,合并软组织、肋骨缺损的早期效果。方法　经髂骨穿刺抽取骨髓组织 ,按 Houghton法分离培养骨髓基质干细胞 ,经定向诱导分化为成骨样细胞 ;用同种异体肋骨经去细胞、去抗原、部分脱钙和冻干处理 ,制成保存天然框架的生物衍生骨支架 ,将 5× 10 6 /ml骨髓基质干细胞与骨支架材料联合培养 6天 ;待完整切除肿瘤后 ,用膈肌瓣修复胸膜腔 ,组织工程肋骨修复 3根肋骨 ,同侧带蒂侧腹壁皮瓣移位修复胸壁软组织缺损。结果　手术经过顺利 ,伤口 期愈合。术后 3个月随访 ,植入组织工程肋骨在体内逐渐发育成成熟肋骨 ,心肺功能显著改善。结论　应用自体骨髓基质干细胞构建的组织工程肋骨在个体化治疗中显示了优越性。     

中国人原发性食管癌微卫星DNA序列的不稳定性研究

目的检测微卫星DNA序列的不稳定性在中国人原发性食管癌中的表达并探讨其与食管癌临床病理特征之间的关系。方法应用PCR-聚丙烯酰胺凝胶电泳-硝酸银染色技术,检测63例中国人原发性食管癌组织中做卫星DNA序列的不稳定性。结果食管癌中微卫星DNA序列不稳定性的发生率为41．2％;微卫星DNA的不稳定性与肿瘤的病理类型有关,而与临床分期、病理分级、淋巴结转移、癌组织的侵袭性等无关。结论中国人食管癌组织中存在微卫星DNA序列的不稳定性,可能是食管癌发生过程中的早期事件．并且可能更多的参与了食管小细胞癌的发生。     

组织工程肋骨修复胸壁巨大缺损1例

胸壁常因肿瘤、感染和创伤等原因发生大面积缺损 ,迄今尚无理想的硬性胸廓修复材料。 2 0 0 0年 5月 ,我们对 1例巨大复发性左前胸壁瘤样纤维组织增殖症 (韧带状瘤 )施行全层胸壁切除后 ,用组织工程肋骨修复获得成功。病人　女 ,2 5岁。发现左乳下缘固定包块 3年。先后 2次手术切除 ,但均在术后短期内复发且进行性增大。本次入院时包块已增至 18ｃｍ× 18ｃｍ× 18ｃｍ大小 ,坚硬 ,固定于前胸壁 ,侵及左乳房和皮肤。ＣＴ显示包块向深层侵及肋骨、胸膜并突向胸腔内紧贴左上肺和心包。手术切除胸壁全层和第 5～ 9肋骨前段 ,全层胸壁缺损直径约…     

食管癌外科治疗的国内现状

我国是世界食管癌高发区．外科治疗是首选和主要的治疗方法。从6O年代开始，食管癌手术已逐步向基层医院普及，经过3O多年不间断的发展，我国在食管癌外科的研究水平和临床水平均处于世界领先地位。近十多年来，随着国家经济的快速增长，食管癌的科研工作日渐普及，新技术和新设备不断应用于临床。从事食管外科的队伍也不断状大，我国的食管癌外科取得了长足的进展。1995年9月，中国抗癌协会在南京召开了全国第四届食管癌学术会议（下称本次会议）。大会报告了许多食管外科同行共同关心的议题以及新观点．新方法。作者在阅读文献的基础上，…     

自发性食管破裂的治疗

自发性食管破裂（spontaneous esophagus rupture,SER）是指呕吐所致食管管腔内压力骤增,致使邻近横膈上的食管侧壁全层纵行撕裂,消化液进入纵隔和胸腔导致的一系列病理生理学改变。 SER发病率不高,症状常不典型,有时会被误诊为急腹症。此类患者病情发展迅速,病死率高,是胸外科高危病种之一。现通过总结四川大学华西医院10年来收治的自发性食管破裂病例的治疗情况及临床转归,探讨食管自发性破裂的最佳治疗方法。     

螺旋形引流管在胸腔闭式引流术中的应用

胸部术后常规在左胸或右胸置放带侧孔的胸腔闭式引流管 ,但由于其孔道少易堵塞 ,常致引流不畅 ,拔管后胸腔有积液存留。从 2 0 0 0年 6月～ 2 0 0 1年 6月我们对胸部术后采用前端为螺旋形侧表 1 .两组术后拔管时间比较 (% )时间 (天 ) 2 3 4 5 6 7螺旋管组 2 (1 81 ) 35 (31 82 ) 4 0 (36 36) 2 7(2 4 55) 4 (3 64) 2 (1 81 )侧孔管组 30 (43 48) 31 (44 93) 5 (7 2 5) 2 (2 90 ) 1 (1 45) 0 (0 0 0 )Ｐ <0 0 5　 1　　胸部术后常规在左胸或右胸置放带侧孔的胸腔闭式引流管 ,但由于其孔道少易堵塞 ,常致引流不畅 ,拔管后胸腔有积液…     

食管癌手术对游离脂肪酸和维生素A、E代谢的影响

目的 探讨食管癌手术对脂肪和脂溶性维生素代谢产生的影响。方法 将52例食管癌患者和36例胸部良性疾病患者分成两部分,游离脂肪酸谱分析部分实验组：29例食管癌患者;对照组：19例胸部良性疾病患者。血清维生素A、维生素E（VitA、VitE）测定部分实验组：23例食管癌患者;对照组：17例胸部良性疾病患者。所有病例均分别在术前1天,术后7天和30天进行5种游离脂肪酸（FFA）分析和VitA、VitE测定。结果 术前1天实验组和对照组亚油酸、油酸、硬脂酸、VitA、VitE差别均无显著性意义（P＞0．05）;实验组软脂酸、花生四烯酸明显升高（P＜0．05）。术后7天实验组患者禁食输入脂肪乳剂后,花生四烯酸和Vit A、VitE明显低于对照组（P＜0．05）,其余4种FFA差别无显著性意义（P＞0．05）。术后30天,两组间5天FFA差别无显著性意义（P＞0．05）,而实验组患者仍停留在术后7天的低水平,显著低于对照组（P＜0．05）。结论 食管癌患者术前已存在脂肪员,术后7天在禁食期间输入脂肪乳剂是必要的,但仍不能满足患者对花生四烯酸和VitA、VitE的需求。手术30天后能正常进食的食管癌患者仍存在VitA、VitE的严重不 足,有从静脉补充的指征;而5种FFA可达到正常水平。低脂肪、高糖和高蛋白质才是合理的膳食结构。