基于能量代谢分析益气解毒方对缺氧损伤的PC12细胞线粒体保护作用的机制

目的:采用Seahorse细胞能量代谢分析仪,通过缺氧损伤的高分化大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12细胞)建立一种线粒体能量代谢评价方法并探究益气解毒方的线粒体保护作用.方法:应用缺氧小室体外构建PC12细胞损伤模型,实验设置空白组,模型组(Model),益气解毒方高、中、低剂量组(25,5,1μ.tmol·L-1;YQ高...     

重组人睫状神经营养因子对糖尿病大鼠胃肠功能的影响

 目的评价重组人睫状神经营养因子(rhCNTF)对糖尿病大鼠胃肠道功能的作用。方法采用链脲佐菌素(strepto- zocin,STZ)诱发的糖尿病大鼠胃肠神经功能紊乱模型,肌注rhCNTF 0.1,0.3,0.9mg·kg^-1,测定了rhCNTF对血糖、胃肠慢波电位、小肠壁内神经蛋白含量,观察了rhCNTF对胃肠推进功能的影响以及胃肠对乙酰胆碱(Ach)、阿托品敏感性的影响。结果肌内注射rhCNTF对血糖无明显影响,也未见rhCNTF改善十二指肠对Ach、阿托品的敏感性。肌注RhC- NTF可改善糖尿病大鼠胃肠慢波电位、提高了胃肠推进功能、增加了胃肠壁内神经蛋白含量。结论糖尿病导致的胃肠神经功能紊乱可以通过肌注rhCNTF而改善,其重要机制是rhCNTF对抗糖尿病引起的胃肠神经病变。     

细胞水平的高通量药物筛选技术研究进展

 目的介绍细胞水平的高通量筛选技术研究进展。方法根据近年来文献,综述细胞水平的高通量技术发展趋势和使用技术进展。结果细胞水平筛选是在活细胞自然条件下,接近体内的生化过程,且可以做到多靶点、多指标检测,满足在药物发现早期对药物的综合评价,缩短药物发现周期。结论细胞水平的高通量筛选技术具有广阔前景。     

黄皮酰胺和人参皂苷Rg1通过增加神经可塑性发挥益智作用

张均田（Juntian Zhang）教授，我国著名的药理学家，中国医学科学院药物研究所原所长。从1957年至今，他一直在中国医学科学院药物研究所从事药理学研究工作，先后担任过两届中国药理学会理事长，《中国药理学报》副主编、《中国药理学通讯》副主任等职。张均田教授先后研究成功了7种新药，另有4个创新药物正在研究之中。他在神经药理特别是在学习记忆和老年痴呆的研究方面做出了许多开拓性的创新工作，发现了不少有价值、获得国际知识产权保护的新药，对神经科学领域的基础和新药研究做出了重要的贡献，使我国在该领域达到了国际先进水平。     

NGF与CNTF联合治疗糖尿病大鼠胃肠神经病变的实验研究

 目的 为了研究重组人睫状神经营养因子（rhCNTF）与神经生长因子（NGF）联合给药对糖尿病大鼠胃肠神经功能紊乱的作用。方法 采用链脲佐菌素（streptozocin，STZ）诱发Ⅰ型糖尿病大鼠所致胃肠神经功能紊乱模型，动物随机分为正常组、模型组、NGF(0.02 mg·kg-1，im)组、rhCNTF(0.1 mg·kg-1，im)组、NGF和rhCNTF联合用药组，连续给药85 d。观察各组大鼠血糖、胃肠慢波电位、小肠壁内神经蛋白含量、胃肠推进功能以及胃肠对乙酰胆碱（Ach）、阿托品敏感性。结果 NGF和rhCNTF联合用药和单独用药对糖尿病大鼠血糖均无明显降低作用，十二指肠对Ach、阿托品的敏感性也未见明显改变，但均可改善糖尿病大鼠胃肠慢波电位，提高胃肠推进功能，同时增加了胃肠壁内神经蛋白含量，联合用药效果优于单独给药。 结论 NGF与RhCNTF联合用药具有较好的抗糖尿病导致的胃肠神经功能紊乱作用，其机制可能与他们对内脏植物神经的神经营养和神经保护作用有关，且具有一定的协同作用。     

千金子甾醇在Caco-2细胞单层模型中的吸收研究

目的研究千金子甾醇在Caco-2细胞单层模型中的吸收和转运。方法用Caco-2细胞模型研究千金子甾醇在Caco-2细胞模型中的双向转运,考察时间、药物浓度和P-糖蛋白抑制剂对千金子甾醇跨膜转运的影响。采用UPLC-MS/MS法测定药物浓度,计算表观渗透系数(Papp)以及表观渗透率(PDR)。结果在Caco-2细胞中的转运过程中,不同浓度千金子甾醇的Papp值介于1×10-6~1×10-5,其累积转运量随时间和浓度的增加而增加,具有浓度依赖性。10、30、50μmol/L千金子甾醇的PDR分别为1.35、0.83、0.65。盐酸维拉帕米可以促进千金子甾醇由AP侧→BL侧的转运。结论千金子甾醇在肠道中的吸收中等,以被动转运为主,可能存在肠道转运蛋白的外排机制。     

细胞培养稳定同位素标记技术的发展及其在脑病研究中的应用

寻找脑中特异的蛋白标记物,对于脑病临床诊断及药物机制研究至关重要。人脑是一个复杂的有机体,采用单靶点、非动态、局部的方法不适于脑病研究,而以质谱技术为基础的定量蛋白质组学的出现和发展,加快了脑病标志分子的研究进程。细胞培养稳定同位素标记技术(SILAC)作为精确的蛋白定量方法,是系统、动态的研究方法,为脑病机制和治疗脑病中药的研究提供了新的思路。     

Wingless/Wnt信号与缺血性脑中风中神经血管单元相关的研究进展

Wingless(Wnt)信号通路作为一个复杂的蛋白质作用网络,通过自分泌和旁分泌作用调节多种细胞的发生和发育,具有重要的生物学意义。近年来针对神经和血管的整体保护,提出了神经血管单元(neurovascular unit,NVU)的新模型,并发现Wnt信号通路在缺血性脑中风神经血管单元保护中可能发挥重要作用。Wnts家族与卷曲蛋白(Friz-zled)/低密度脂蛋白受体相关蛋白5/6(low-density lipopro-tein related proteins 5/6,LRP5/6)结合,进入细胞内,经过一系列反应,可激活核内缺氧诱导因子-1α(hypoxia induciblefactor-1α,HIF-1α),在基因水平上直接调控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达(Wnt信号可作为HIF-1α和VEGF的上游信号),继而上调β-catenin信号分子,激活其下游信号分子从而调节血脑屏障(blood brain barrier,BBB)及NVU相关基因和蛋白的水平,即从整体上促进缺血性脑中风损伤后修复。     

益气解毒方基于线粒体保护的抗缺血性脑卒中研究

目的:基于线粒体呼吸功能,研究益气解毒方对缺血性脑卒中的保护作用。方法:采取大鼠中脑动脉闭塞模型(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO),造模前15 min给予益气解毒方及相应拆方,造模12 h后,取材,提取脑组织线粒体,检测线粒体三态呼吸速率、四态呼吸速率、磷氧比、呼吸控制率、氧化磷酸化率等指标,评价益气解毒方对缺血性脑卒中的保护效果。此外,通过主成份分析(Principal Component Analysis,PCA)和变量重要性指标(Variable Importance in Projection,VIP),评价益气解毒方各组分在抗缺血性脑卒中的作用效果。结果:益气解毒方能改善缺血性脑卒中病理过程中线粒体呼吸相关的各项指标,益气解毒方各拆方对缺血性脑卒中也有较好的改善作用。PCA结果显示,与各拆方组比较,益气解毒方全方的治疗效果最好;在各拆方组中,人参皂苷和黄连素配伍后的效果最好。VIP分析结果显示,益气解毒方基于保护线粒体呼吸功能来改善缺血性脑卒中的病理过程中,黄连素的贡献度最大。结论:益气解毒方能够显著降低缺血性脑卒中病理过程中所造成机体损伤,其机制可能与保护线粒体功能有关。     

谷胱甘肽转移酶抑制剂的高通量筛选

谷胱甘肽转移酶(glutathione Stransferase,GST)是一组具有多种生理功能的同工酶家族,广泛分布于动植物体内,作为机体的II相解毒酶,参与机体的解毒作用[1].研究表明,GST的酶活性水平与肿瘤的耐药性密切相关[2～4].因此,GST可能是治疗耐药肿瘤的潜在药物作用靶点. 目前已知的GST抑制剂大多因毒性较大,限制了临床应用.研究发现,一些动植物体内含有对GST有抑制剂作用的成分[5～8].为了广泛寻找GST特异性抑制剂,本研究旨在建立一种快速、高效、稳定、经济的高通量筛选方法,以GST为靶点,通过高通量筛选技术,对自然界广泛存在着的抑制GST活性的物质进行筛选,以期为开发安全有效的、提高耐药肿瘤临床化疗敏感性的药物提供新的技术方法.