POLH对过氧化氢诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的影响

目的　探究DNA聚合酶η（POLH）对过氧化氢（H₂O₂）诱导的晶状体上皮细胞氧化应激和凋亡的防御机制。方法　以年龄相关性白内障患者的晶状体前囊膜组织和H₂O₂处理的晶状体上皮细胞系SRA01/04为研究对象,分别通过RT-PCR和免疫印迹实验验证POLH的表达并筛选H₂O₂最佳作用浓度用于后续实验,将培养的SRA01/04细胞分为H₂O₂组、H₂O₂+HA组和H₂O₂+OV-POLH组,采用RT-PCR和免疫印迹实验检测POLH mRNA和蛋白表达情况,免疫荧光法检测DNA氧化损伤标志物以及TUNEL实验检测细胞凋亡变化,免疫印迹实验检测细胞中BAX、BCL-2、Nrf2和Keap1蛋白表达。结果　RT-PCR结果显示,与透明晶状体前囊膜（1.00±0.22）相比,年龄相关性白内障患者晶状体前囊膜组织中POLH mRNA相对表达量明显下降（0.38±0.62）（P<0.000 1）。RT-PCR和免疫印迹实验均显示,200 μmol·L^-1 H₂O₂处理的SRA01/04细胞中POLH表达量最低;TUNEL实验检测结果显示, 200 μmol·L^-1 H₂O₂处理后细胞的凋亡明显增加。RT-PCR和免疫印迹实验结果显示,与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组SRA01/04细胞中POLH表达量显著升高（P<0.000 1）。免疫荧光染色结果显示,与H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞的γH2A染色明显下降。免疫印迹实验检测结果显示,与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞促凋亡蛋白BAX表达量明显下降,而抑凋亡蛋白BCL-2表达量明显升高（均为P<0.01）;与H₂O₂组和H₂O₂+HA组相比,H₂O₂+OV-POLH组细胞Keap1蛋白水平明显下降,而转录调控蛋白Nrf2表达明显升高（均为P<0.01）。结论　过表达POLH可通过增强DNA损伤修复功能抑制H₂O₂诱导的晶状体上皮细胞凋亡,其抑制氧化应激机制可能与Nrf2-Keap1-ARE通路有关。     

树突状细胞诱导免疫效应细胞对BEL-7402的生长抑制

目的：体内外观察多种细胞因子和（或）肿瘤相关抗原（tumor allogenic antigen,TAA)刺激的正常人树突状细胞（DC）诱导免疫效应细胞对BEL－7402的生长抑制。方法：体外分别用人GM－CSF、IL－4、TNFα、BEL－7402TAA和人IL－2刺激正常人DC和去DC的单个核细胞（免疫效应细胞），5－6d后混合培养DC和免疫效应细胞1－2d。体外实验时效应细胞分无DC刺激组（A0组）、细胞因子培养和DC刺激组（A1组）、细胞因子和TAA培养的DC刺激组（A2组）。体内实验时，裸鼠分为3组：预防组（Ⅱ），于接种BEL－7402前1－2d天给DC激活的免疫效应细胞；治疗组（Ⅲ），待全部裸鼠移植瘤长出时给DC激活的免疫效应细胞；组Ⅱ，Ⅲ于给予DC激活免疫效应细胞后再间断给予DC培养上清液3－6d。对照组（I）给等量的1640培养液。结果：多细胞因子体外可刺激DC发生扩增并高表达B7分子。体外实验中最大杀伤效率：A2组为81％，A1组为68．1％，A0组为3．5％。体内实验中：组I和组Ⅲ第12d时12例全部发生移植瘤；组Ⅱ观察30d时，6例有1例发生移植瘤，观察45d时，仍只有1例发生移植瘤，组I、Ⅱ相差有非常显著意义（P＝0．00466）；在给予DC激活的免疫效应细胞后的第45d处死所有裸鼠并称瘤体的重量，组I、Ⅱ、Ⅲ比较相差有非常显著意义（P＜0．01），组Ⅱ的6只裸鼠仅1只产生移植瘤，瘤重为0．27g。结论：激活的DC在抗恶性肿瘤中有重要作用。     

强磁场联合化疗对S_(180)荷瘤小鼠的影响

目的　观察磁疗结合化疗药物表阿霉素对小鼠S180 肿瘤模型的治疗效果。方法　 6 0只S180 荷瘤小鼠随机分 4组 :磁疗 化疗组 ,单纯化疗组 ,单纯磁疗组和空白对照组 ,每组 15只。于接种后 2 4h分别进行各项处理 ,10d后处死动物分离瘤块 ,称湿重并作病理检查。结果　磁疗 化疗组肿瘤湿重 (0 .32± 0 .13) g ,显著低于各组 ,单纯磁疗组 (0 .95± 0 .42 )g、单纯化疗组 (0 .49± 0 .2 2 ) g亦显著低于空白对照组 (1.5 5± 0 .6 7) g。病理检查可见磁疗 化疗组肿瘤坏死最明显。 结论　磁疗结合化疗组具有显著的抑瘤效果 ,磁疗可作为肿瘤治疗的辅助手段。     

逆行交锁髓内钉（GSHN）和动力髁螺钉（DCS）内固定治疗股骨远端骨折临床效果观察

目的 观察比较分析应用股骨逆行交锁髓内钉（GSHN）与动力髁螺钉（DCS）治疗股骨远端骨折的优缺点。方法将临床上81例股骨远端骨折的患者随机分为2组,分别为GSHN、DCS组,并使用相应治疗方案,观察两组的骨愈合时间和功能恢复方面的差异。结果逆行交锁髓内钉组的骨折平均愈合时间为6．3个月,动力髁螺钉的骨折平均愈合时间为7．8个月,两组骨折愈合时间差异具有统计学意义（P〈0．05）;两组术后膝关节功能按美国特种外科医院膝关节功能评分法（HSS）疗效评定标准评定,股骨逆行交锁髓内钉（GSHN）组的优良率为90．2％,动力髁螺钉（DCS）优良率为72．7％,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论股骨逆行交锁髓内钉治疗股骨远端骨折较动力髁螺钉具有更好的临床优势,值得在临床推广使用。     

辐射促进多药耐药反义寡核苷酸逆转耐药的实验研究

目的探讨辐射促转染的多药耐药基因（mdr1）反义寡核苷酸（ASON）逆转肿瘤细胞KBv200的耐药效果。方法应用MTT法比较脂质体介导的ASON直接转染与联合辐射转染的情况下KBv200细胞对长春新碱（VCR）的半数抑制量（IC50），再利用RT-PCR方法和流式细胞仪检测两种不同的转染方法对KBv200细胞的mdr1-mRNA及其表达产物P-糖蛋白（P-gp）的调控情况。采用耐药细胞株KBv200移植于裸鼠皮下，肿瘤局部2Gy^60Coγ射线照射后1h，瘤内注射脂质体介导的mdr1ASON，经VCR联合化疗。结果联合照射的ASON组明显优于未照射组（P〈0．05）。KBv200细胞的IC50、mdr1-mRNA的表达水平及P-gp的阳性率，均明显低于未照射组（P〈0．05）。联合照射组与未照射组肿瘤体积和肿瘤重量差异有统计学意义（P〈0．01）。结论辐射促转染的mdr1 ASON对肿瘤细胞具有较强的耐药逆转作用。     

胸廓出口综合征一例报道

胸廓出口综合征一般是指臂丛神经和锁骨下动脉、静脉在胸廓出口和斜角肌止点之间卡压而引起的一系列症状。临床上比较少见。作在工作上遇到1例，现将其影像学表现报道如下。     

脂质体介导的IGF-1R反义寡核苷酸抗胰腺癌的实验研究

目的研究辐射促进脂质体（hpofectin）介导的胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）反义寡核苷酸（ASON）抑制人胰腺癌细胞系PC-3的生长及接种裸鼠后的成瘤性。方法PC-3细胞经不同剂量^60Co照射后，绘制剂量存活曲线，选择照射剂量。用噻唑蓝（MTT）比色法比较脂质体介导的ASON（lipo—ASON）直接转染与联合照射转染对PC-3细胞的抑制效果，用流式细胞术和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测两种转染方法对PC-3细胞凋亡率及IGF-1R mRNA表达的影响。裸鼠种植PC-3细胞，肿瘤直径为5mm时，比较不同条件下（肿瘤局部照射与不照射）瘤内注射IGF-1R lipo—ASON对肿瘤的抑制情况。结果Lipo—ASON联合照射对胰腺癌细胞的抑制率（86．3％）、凋亡率（53．06％）及IGF—1R mRNA水平降低程度（降低79．2％）均明显高于未照射组（51．1％、20．25％和45.6％），差异有显著性。照射后瘤内注射lipo—ASON组的肿瘤体积明显小于其他各组，空白对照组与联合照射的lipo—ASON组、Lipo—ASON组肿瘤体积差异有显著性（P〈0．01）。结论针对IGF-1R的ASON能有效抑制肿瘤生长，当与辐射联合时，可显著提高抗瘤效果。     

一步固化法制作胰岛移植微囊的实验研究

目的　采用一步固化法制作用于胰岛移植的海藻酸钠 -氯化钡微囊 ,研究这种微囊的牢固度及生物相容性。方法　用海藻酸钠和氯化钡为材料 ,采用一步固化法制成微囊 ,观察这种微囊的形态和大小。将其置于生理盐水中 37℃孵育 2个月或置于生理盐水中 37℃、15 0r min水浴振荡1h ,观察微囊的破损率及形态改变。将 5 0 0 0个空微囊分别注射于 12只大鼠腹腔内 ,于 2、6、10周各取 4只大鼠处死后用生理盐水灌洗腹腔 ,将灌洗液离心后计算其中空微囊数并观察微囊的形态改变。结果　一步固化法制作的海藻酸钠 -氯化钡微囊在 37℃培养箱孵育 2个月后破损率为 10 % ;于 37℃、15 0r min水浴振荡 1h后破损率为 18% ;植入空微囊后第 2周每只大鼠可灌洗出空微囊约 30 0 0个 ,微囊均呈圆形 ,完整 ,无纤维化 ;6 - 10周每只大鼠可洗出空微囊约 10 0 0 - 15 0 0个 ,其中 10 % -15 %微囊变形或有裂口 ,部分微囊有明显纤维化。结论　一步固化法制作的海藻酸钠 -氯化钡微囊具有较好的牢固度及生物相容性     

5例特重型胰腺炎治疗分析

目的 探讨5例特重型胰腺炎的特点及治疗方法。方法 我院2001年8月至2003年8月共收治特重型胰腺炎患者5例。其中人院后18h内心跳、呼吸骤停3次的重症急性胰腺炎(SAP)1例，治疗以及时血液滤过和心、肺、脑复苏为重点；SAP并发胰性脑病2例，以大剂量维生素B1的补充，或足量补给浓缩红细胞为治疗重点；并发多个器官功能障碍的暴发性胰腺炎(FAP)2例，治疗重点是血液滤过和防治多器官功能衰竭的级联放大反应，其中1例以高渗性糖昏迷为主要表现，治疗重点是内稳态的纠正，血液滤过，重要器官功能维护。结果 5例特重型胰腺炎患者均治愈，平均住院时间为32．2d。结论 器官功能的复苏和维护、外科ICU监护、短时血液滤过、内稳态的纠正、中西药综合治疗及病因、对症的个体化治疗是特重型胰腺炎的首要治疗措施．     

怎样对待肝炎予后问题

目前由于传染性肝炎的流行,在广大的群众中,对肝炎的预防都很重视。但也有人对该病产生了不正确的认识。认为得了肝炎后会有后遗症,有很大的疑虑,现就谈谈肝炎的预后问题。目前流行的肝炎大多都是无黄疸型的。无黄疸型传染性肝炎,是肝炎中较轻类型。它较黄疸型容易治疗,化验阳性率黄疸型占90.9%以上,而无黄疸型仅占40%左右。国外有的学者研究:对一千名患者在15年中的追综观察明确本病的予后是颇为良好的。在15年中无一例转为肝硬化的。这就说明了这个病的予后是良好的。