miRNA-325-3p通过下调细胞角蛋白13 的表达降低鼻咽癌细胞CNE1 的放疗敏感性

目的：探究miRNA-325-3p 及其靶基因细胞角蛋白13（cytokeratin 13，CK13）对鼻咽癌细胞CNE1 的放疗敏感性的影响。方法：通过miRBase、Targetscan 及Microcosm 三大数据库预测miRNA-325-3p 的潜在靶基因，并通过双荧光素酶活性检测实验进行验证，qPCR检测不同放射剂量下鼻咽癌细胞CNE1 中miRNA-325-3p 及其靶基因的表达水平变化，通过克隆形成实验观察不同放射剂量下过表达miRNA-325-3p 及敲低靶基因后CNE1 细胞克隆形成率的变化，流式细胞术验证过表达miRNA-325-3p及敲低靶基因后CNE1 在不同放射剂量下凋亡水平的变化，MTT法检测miRNA-325-3p 过表达和CK13 敲低组鼻咽癌细胞CNE1在不同放射剂量下的细胞存活率以验证其放疗敏感性的变化。结果：CK13 确认为miRNA-325-3p 的潜在靶基因，鼻咽癌细胞CNE1 经放射处理后，miRNA-325-3p 的表达水平显著升高、CK13 的表达水平显著降低（均P<0.05）。miRNA-325-3p 表达量上调和CK13 基因沉默均显著提高CNE1 细胞的存活率[miRNA上调时：（60.14±3.55）% vs（19.23±3.42）%，t=14.37、P<0.01；CK13 沉默时：（76.15±5.13）% vs（28.53±3.68）%，t=13.06、P<0.01]和克隆形成率，降低了凋亡率[miRNA 上调时：（27.95±2.67）% vs（51.68±3.47）%，t=9.39、P<0.01；CK13 沉默时：（20.31±2.62）% vs（38.14±3.83）%，t=6.66、P<0.01]。结论：miRNA-325-3p 能够通过下调靶基因CK13的表达降低鼻咽癌细胞CNE1 对放疗的敏感性。     

间充质干细胞治疗与自然杀伤细胞的相互作用

干细胞治疗是移植医学的新希望。间充质干细胞(MSCs)由于其具有跨胚层多向分化和免疫调节特性,已被用于免疫系统相关疾病治疗。MSCs具有向炎症损伤部位趋化的特性,通过释放各种细胞因子,影响局部免疫环境来调节固有免疫和适应性免疫。自然杀伤细胞(nature killer cell,NK细胞)是天然免疫系统的重要环节,与其他免疫细胞相辅相成,在多种疾病中发挥着作用。MSCs与NK细胞会相互影响、相互作用并促进MSCs治疗,本文对NK与MSCs细胞相互作用的机制以及NK细胞对MSCs治疗影响的研究进展作一综述。     

PD-L1翻译后修饰的研究进展

高表达免疫检查点分子程序性死亡受体-配体1（programmed death ligand-1,PD-L1）是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的重要途径。PD-L1的表达受到转录水平、翻译水平和翻译后修饰水平等的调控。近年来,PD-L1翻译后修饰逐渐成为PD-L1研究领域的热点。PD-L1的翻译后修饰包括糖基化、泛素化、磷酸化、棕榈酰化和乙酰化等,可影响PD-L1的稳定性及生物学功能。本文将对该领域的研究进展进行综述,以期为肿瘤免疫治疗研究提供新思路。      

动作观察疗法对亚急性期脑卒中患者上肢运动功能的影响

目的:探讨动作观察疗法对亚急性期脑卒中患者上肢运动功能的影响。方法:将31例脑卒中患者按随机数字表法分为观察组(16例)和对照组(15例)。对照组采用常规康复治疗,观察组在对照组基础上辅以动作观察疗法,每周6次,每次20min,共治疗4周。分别于治疗前、治疗4周后对两组患者采用上肢Fugl-Meyer运动功能评分法(FMA)并使用量角器对肩关节前屈、肘关节伸展和腕背伸主动活动度进行测量,以评定患者的上肢运动功能;并分别检测治疗前后FMA与肩关节前屈、肘关节伸展和腕背伸主动活动度之间的相关性。结果:治疗前,两组患者的FMA评分及肩关节前屈、肘关节伸展和腕背伸主动活动度评定差异无显著性意义(P0.05);治疗4周后,两组患者上述指标较治疗前均有所改善(P0.05),且与对照组相比,观察组的FMA评分(44.81±8.86)、肩关节前屈(150.88°±21.32°)、肘关节伸展(135.56°±17.22°)主动活动度的改善程度显著(P0.05);两组患者,除治疗后的对照组FMA评分与肩关节主动前屈活动度、FMA评分与肘关节主动伸展活动度不相关(P0.05)外,其余FMA评分均与肩关节主动前屈活动度、肘关节主动伸展活动度及腕主动背伸活动度之间存在正相关性(P0.05)。结论:基于镜像神经元理论的动作观察疗法可改善亚急性期脑卒中患者的上肢运动功能,且FMA与肩关节前屈、肘关节伸展和腕背伸主动活动度存在相关性。     

干细胞治疗终末期肝病的临床研究进展

近年来,随着对干细胞和再生医学领域研究的深入,基于干细胞的组织损伤修复以及免疫调节等生物学功能,干细胞在终末期肝病的治疗作用越来越受到关注.目前,临床上开展的不同来源干细胞治疗终末期肝病临床研究取得了重大进展,在终末期肝病治疗方面展现出良好的效果,其中常用的干细胞是间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和骨髓干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs).本文就MSCs和BMSCs在治疗终末期肝病的临床研究中的相关机制、研究进展和存在问题进行简述,以期进一步推进干细胞在重症肝病治疗中的应用.     

乙型肝炎患者外周血病毒特异性CD8阳性细胞毒性T淋巴细胞的数量和功能分析

目的 分析急性乙型肝炎(AHB)和慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中乙型肝炎病毒(HBV)特异性细胞毒性T淋巴细胞( CTL)的数量及功能.方法 36例HLA-A2阳性的乙型肝炎患者,其中AHB 12例,CHB 24例.分别用含HBV抗原C、S和P区的c18-27、s183-191和p575-583三个肽段的四聚体[Tetramer (Tc 18-27、Ts183-191、Tp 575-583)]检测患者外周血单核淋巴细胞(PBMCs)中HBV特异性CD8阳性CTL细胞的数量,同时用酶联免疫斑点法(EHSPOT)检测其分泌IFN-γ的功能.用SPSS 13.0进行统计学分析.结果 AHB和CHB患者外周血中Tc18-27特异性的CTL数量无明显不同;而Ts 183-191特异性CTL的平均值分别为0.24％±0.39％和0.03％±0.02％,阳性率分别为75％和33.3％;Tp575-583特异性CTL平均值分别为0.08％±0.09％和0.02％±0.01％,阳性率分别为50％和16.7％,AHB较CHB显著升高(P＜0.05).此外,AHB患者平均Tetramer阳性的个数为1.58个,而CHB患者平均为0.67个,AHB较CHB显著增多(P＜0.01).在9例AHB患者中,其外周血Ts183-191特异性的CTL细胞的数量为139～21 735个/106 PBMCs,用ELISPOT方法检测相对应的分泌IFN-γ的斑点形成细胞(SFC)为0～252个/106 PBMCs,AHB患者Tetramer细胞数和ELISPOT检测的IFN-γ斑点数有明显相关性(P＜0.01),而CHB患者则无此相关性.结论 AHB与CHB患者外周血中HBV特异性CTL的数量和分泌IFN-γ的差异提示CTL可能在清除病毒方面发挥着至关重要的作用,是今后慢性乙型肝炎免疫治疗的重要研究方向之一.     

人脐带间充质干细胞治疗失代偿性肝硬化患者的初步研究

目的评价人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)治疗失代偿性肝硬化的安全性及临床疗效。方法采用平行对照、单盲法将26例失代偿性肝硬化患者进行分组,其中20例为治疗组,接受UC-MSCs外周静脉回输治疗;6例为对照组,给予0.9%NaCl溶液回输,两组均同时行综合内科治疗。测定回输后不同时间点治疗组与对照组白蛋白(Alb)、下腹腹水及终末期肝病模型(MELD)评分的变化。结果 UC-MSCs回输后,除个别患者体温有自限性升高外,无其他不良反应。接受UC-MSCs回输48周后,Alb较治疗前显著升高、腹水较治疗前显著减少(P<0.05);随访末,两组腹水情况比较,差异有统计学意义(P<0.05),但MELD评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论人UC-MSCs治疗失代偿性肝硬化患者安全性好,能减轻患者的临床症状,减少腹水形成。     

细胞因子诱导的自体杀伤细胞回输治疗慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能的研究

目的了解细胞因子诱导的自体杀伤（CIK）细胞回输治疗是否能恢复慢性乙型肝炎（CHB）患者树突状细胞（DC）的功能。方法12例CHB患者应用CIK细胞回输治疗,入组前6个月至CIK细胞治疗随访期间,患者未接受任何抗病毒及免疫调节治疗。观察24周后患者髓样树突状细胞（mDC）、浆细胞样树突状细胞（pDC）比例和功能变化,并对其变化结果进行分析。结果应用CIK细胞回输治疗24周后,病毒载量下降≥2个log或转阴的患者外周血mDC、pDC功能明显提高。病毒学应答患者（n=6）病毒载量下降水平与外周血DC功能的恢复密切相关。结论CHB患者接受CIK细胞回输治疗可以提高外周血mDC和pDC功能。