医学留学生教学改革的规则与展望

文章参照医学教育国际标准，结合南京医科大学全英文授课临床医学专业留学生教学工作的实践，对医学留学生培养方案、课程体系建设、师资培养、教学管理、留学生管理和国际交流合作方面进行了理论和实践研究，认为全英文授课有助于推动医学留学生教学工作的发展。     

天冬氨酸－谷氨酸共聚物－甲硝唑纳米粒子的制备表征

目的:制备新型天冬氨酸一谷氨酸共聚物一甲硝唑(poly aspartic acid-co-glutamic acid-metronidazole,PAG-MTI)纳米粒子.方法:应用化学法合成PAG-MTI纳米粒子;通过红外光谱仪测定其化学结构、透射电镜及激光粒度分析仪分析微观形貌和粒径、紫外分光光度法测定载药量、透析法进行体外释放试验,对其化学结构和物理性质进行了系列表征.结果:合成的PAGMTI纳米粒为球形,粒径198.9 nm,载药量12%,体外释放试验表明PAG-MTI的释药速率明显延缓,释放1 h与24 h,累积释放百分比分别为12.19%和47.51%.结论:化学合成法制备的新型PAG-MTI具有较好的缓释作用,有望通过进一步优化改进以用于临床滴虫性生殖道炎症的治疗.     

Anti-fecundity immunity in mice immunized with anti-idiotypic monoclonal antibody NP30 of Schistosoma japonicum

Ｉｔｉｓｄｉｆｆｉｃｕｌｔｔｏｂｌｏｃｋｔｈｅｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓｂｙｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ,ｔｈｅｒｅｆｏｒｅｍａｎｙｒｅｓｅａｒｃｈｅｒｓｈａｖｅｂｅｅｎｉｎｔｅｒｅｓｔｅｄｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｖａｃｃｉｎｅｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓ Ｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｖａｃｃｉｎｅｏｆｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍｉａｓｉｓｗａｓｍｏｓｔｌｙｆｏｃｕｓｅｄｏｎａｎｔｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｍｍｕｎｉｔｙ ,ｂｕｔｔｈｅｍｏｓｔｈｏｐｅｆｕｌｃａｎｄｉｄａｔｅｍｏｌｅ…     

丝裂霉素C对鼻咽癌细胞HNE2和HNE2/lmp1抑制作用及其机制

目的探讨丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)对鼻咽癌细胞HNE2和HNE2/lmp1生长抑制作用及其机制。方法以体外培养的鼻咽癌细胞HNE2和HNE2/lmp1为研究对象,以不同浓度的MMC(40、20、10、5、2.5、1.25μg/mL)作用于HNE2和HNE2/lmp1细胞,MTS法检测MMC对人鼻咽癌细胞HNE2和HNE2/lmp1生长的抑制作用;荧光显微镜观察MMC干预24 h前后HNE2细胞的形态变化;流式细胞仪检测MMC对鼻咽癌细胞HNE2和HNE2/lmp1凋亡及细胞周期的影响;比色法检测MMC作用于HNE2和HNE2/lmp1细胞后Caspase-3的活化度变化。结果MMC对HNE2和HNE2/lmp1细胞生长有明显的抑制作用,呈剂量依赖性。40μg/mlMMC作用于HNE2和HNE2/lmp1细胞24 h的抑制率分别为(72.97±4.93)%和(69.42±2.94)%。MMC作用于HNE2细胞后可见悬浮细胞增多,细胞胞体缩小、变圆、碎裂,胞内出现颗粒样物质。流式细胞仪检测表明,MMC对HNE2和HNE2/lmp1肿瘤细胞的抑制主要表现为诱导细胞凋亡,凋亡率分别由4.46%和0.75%增高至18.09%和10.27%,而对细胞周期的影响较小。MMC能明显上调HNE2和HNE2/lmp1细胞Caspase-3活性,MMC浓度越高作用时间越长caspas-3活化度越高,在浓度和时间水平存在差异。统计结果显示HNE2/lmp1细胞较HNE2细胞有较高的对抗丝裂霉素抑制作用的能力。两细胞组caspas-3活化度也相应存在差异。结论MMC可明显抑制鼻咽癌细胞HNE2和HNE2/lmp1的生长,促进细胞凋亡,其机制和Caspase-3有关。EBV-潜伏膜蛋白1(latent membrance protein 1,lmp1)可通过caspase-3途径抑制HNE2细胞的凋亡对抗丝裂霉素的细胞生长抑制作用。     

单细胞测序技术在妇科恶性肿瘤研究中的应用

妇科恶性肿瘤包括宫颈癌、卵巢癌、子宫内膜癌等,具有高度的异质性,一旦进入晚期,预后往往不良。单细胞测序技术的出现和发展为在单个细胞水平上探究肿瘤发生发展的机制,鉴定稀有细胞,绘制细胞谱系,指导肿瘤靶向精准治疗和预测患者预后等提供了更好的平台。本文就单细胞测序技术的兴起与发展及其在妇科恶性肿瘤研究中的应用进行综述。     

抗独特型抗体NP30诱导虫卵肉芽肿细胞凋亡的分子机制

目的研究抗独特型抗体NP30诱导虫卵肉芽肿细胞凋亡的分子机制.方法 BALB/c 小鼠随机分为两组,实验组腹腔注射NP30 10 μg/次,连续3次,对照组腹腔注射生理盐水,分别在尾蚴攻击感染后第39、49、64、108、112天处死,应用免疫组化S-P法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas、FasL和c-Fos的表达,原位分子杂交检测Bax与Fas mRNA.结果虫卵肉芽肿细胞均表达Bax、Fas、FasL和c-Fos蛋白,其中实验组Bax和FasL蛋白表达均高于对照组(P<0.05);实验组Fas和c-Fos蛋白表达在第64天和第112天低于对照组,其余各时间点均高于对照组(P<0.05);Bcl-2蛋白在实验组和对照组均无表达.实验组Bax和fas mRNA表达均高于对照组.结论死亡受体Fas和FasL途径启动了NP30诱导肉芽肿细胞凋亡的信号,NP30通过凋亡相关基因Bax和c-Fos表达增强来诱导肉芽肿的细胞凋亡.     

上皮间质转化相关蛋白在肝细胞肝癌组织中的表达鉴定及其小分子RNA表达谱的研究

目的 检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)及其相应小分子RNA(miRNA)在原发性肝细胞肝癌(HCC)中的表达.方法 免疫组织化学检测32例HCC组织中E-cadherin和vimentin的表达,分析其与临床病理资料的关系.应用miRNA芯片筛选HCC转移相关差异表达miRNAs.选取部分差异表达miRNAs以实时定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法进行验证,利用在线靶基因预测软件对其靶基因进行预测.结果 E-cadherin在转移、低分化/未分化、大于3 cm组中的阳性表达率分别为25.0%(2/8)、35.7%(5/14)、52.9%(9/17),vimentin在上述三组的阳性表达率分别为87.5%(7/8)、71.4%(10/14)、52.9%(9/17).E-cadherin表达下调、vimentin表达上调与HCC分化(低分化/未分化)和转移明显相关(P＜0.05),而与其大小无关.miRNA芯片筛选获得36个HCC转移相关miRNAs(8个上调,28个下调).在E-cadherin(-)/vimentin(+)转移HCC中,miR-21、miR-221的表达(2.22±1.79、2.36±1.05)明显高于E-cadherin (+)/vimentin(-)无转移HCC(4.35±1.90、3.90±1.23,P＜0.05);miR-199a、miR-126的表达(4.42±0.61、3.62±0.54)明显低于E-cadherin(+)/vimentin(-)无转移HCC(2.43±0.85、2.54±1.10,P＜0.05).结论 E-cadherin(-)/vimentin(+)转移HCC与E-cadherin(+)/vimentin(-)无转移HCC的miRNA明显差异表达,其中部分差异表达miRNAs可能通过调控上皮间质转化相关分子的表达参与HCC的转移.

Abstract：

Objective To detect the expression of E-cadherin and vimentin, and their corresponding microRNAs (miRNAs) in primary heptocellular carcinoma (HCC). Methods The expression of E-cadherin and vimentin in 32 cases of HCC tissues was examined by using immunohistochemistry, and the relationship between the expression and clinicopathology was analyzed. miRNA array was used to investigate the differentially expressed miRNAs between E-cadherin ( - )/vimentin ( + ) metastasis HCC and E-cadherin ( + )/vimentin ( - ) no-metastasis HCC. Real-time polymerase chain reaction (PCR) was applied to verify the reliability of miRNA array results. We predicted target genes of the four miRNAs by combination anticipated algorithms. Results The positive rate of E-cadherin in the metastasis, poor/no differentiation, ＞3 cm groups was 25.0% (2/8), 35.7% (5/14), 52. 9% (9/17) respectively, and that of vimentin was 87.5% (7/8), 71.4% (10/14), 52.9% (9/17)respectively. The low expression of E-cadherin and high expression of vimentin in HCC was significantly correlated with metastasis and poor differentiation of HCC (P＜0. 05). miRNA array showed that 8 miRNAs were up-regulated and 28 miRNAs were down-regulated in E-cadherin ( - )/vimentin ( + ) metastasis HCC. The expression levels of miR-21 and miR-221 in E-cadherin ( - )/vimentin ( + ) metastasis HCC were 2. 22 ± 1.79 and 2. 36 ±1.05, significantly higher than those in E-cadherin ( + )/vimentin ( - ) no-metastasis HCC (4. 35 ±1.90, 3.90 ± 1.23,P＜0.05). The expression levels of miR-126 and miR-199a in E-cadherin (-)/vimentin ( + ) metastasis HCC were 4. 42 ± 0. 61 and 3.62 ± 0. 54, notably lower than those in E-cadherin ( +)/vimentin (-) no-metastasis HCC (2.43±0.85, 2.54±-1.10,P＜0.05). Conclusion miRNA differential expression profile of E-cadherin ( - )/vimentin ( + ) HCC was obtained, and some of miRNAs may play a role in metastasis of HCC by regulating epithelial to mesenchymal transition.     

非小细胞肺癌VEGFR-2的表达及临床意义

目的:探讨血管内皮生长因子受体-2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)在非小细胞肺癌(non-small-cell lung cancer,NSCLC)中的表达及其与临床病理特征?预后的关系?方法:采用组织芯片技术和免疫组织化学方法检测VEGFR-2在217例非小细胞肺癌中的表达情况,并结合临床病理资料进行单因素生存分析?结果:VEGFR-2在NSCLC中高表达,阳性率为63.1%,且该基因的表达与肿瘤分化程度?TNM分期?淋巴结转移?神经侵袭有显著相关性(P < 0.05)?VEGFR-2的表达与NSCLC的预后相关,阳性表达该基因的患者的平均中位生存期比阴性表达的患者长12个月(P=0.049)?结论:VEGFR-2基因在非小细胞肺癌的发生?发展过程及预后具有重要作用?     

人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1抗体Fab联合丝裂霉素C对鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的:观察联合应用人源抗EB病毒鼻咽癌潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP1)抗体Fab片段与丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)对LMP1阳性鼻咽癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:建立LMP1阳性鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,20只成瘤裸鼠随机分成4组,即Fab组、MMC组、Fab+MMC组和对照组。腹腔注射药物,每3天1次,共5次。观察肿瘤生长、测量肿瘤体积,计算抑瘤率。免疫组化法检测肿瘤组织血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达、流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡情况。结果:Fab组、MMC组和Fab+MMC组抑瘤率分别为18.90%、28.95%、49.12%。Fab组、Fab+MMC组VEGF表达量明显低于对照组(P<0.05)。MMC组VEGF表达量和对照组相比,无统计学意义(P>0.05)。MMC组、Fab+MMC组肿瘤细胞凋亡率分别为(11.84±1.50)%、(17.55±3.21)%,与对照组凋亡率(3.90±0.55)%相比,有显著差异(P<0.01);Fab组凋亡率为(7.34±2.68)%,与...     

人源抗Trop-2抗体Fab的制备及条件优化

目的:探讨人源抗Trop-2抗体片段Fab在大肠杆菌中的诱导表达,优化蛋白表达及纯化的条件?方法:将含有抗Trop-2 Fab 抗体基因的质粒转化宿主菌E.coli TOP10F ′大肠杆菌,比较诱导前培养液更换对抗Trop-2 Fab片段表达量的影响;比较不同诱导温度?诱导时间及诱导前加入葡萄糖对蛋白表达的影响;大量表达的抗Trop-2 Fab经亲和层析纯化后,用免疫荧光和流式细胞术检测其免疫学特性?结果:在培养液中加入5 g/L的葡萄糖,人源抗Trop-2抗体Fab片段的表达产量明显增加;16℃的诱导温度比其它温度能表达更多的Fab分子;加诱导剂12 h,目的蛋白的表达量至峰值?结论:本实验结果为在原核系统中大量制备抗Trop-2抗体片段及后续的肿瘤靶向治疗提供了基础?