日本血吸虫重组线粒体相关蛋白免疫学活性鉴定

分子筛进一步纯化并复性的融合蛋白均能刺激家兔产生特异性抗体 ,粗提包涵体蛋白免疫家兔 ,血清抗体滴度为 1∶2 5 6 0 0 ,复性蛋白及经分子筛纯化的蛋白免疫的家兔血清抗体滴度均为 1∶5 12 0 0 ,Westernblot结果显示 ,粗提包涵体蛋白、复性蛋白及经过分子筛进一步纯化并复性的蛋白均能被重感染兔血清和rSj338/2 6GST特异性免疫兔血清所识别。攻击实验中 ,粗提包涵体蛋白和经分子筛纯化的蛋白分别可诱导小鼠产生 2 7.8% (P <0 .0 1)和 30 .4 % (P <0 .0 1)的减虫率 ,4 0 .4 % (P <0 .0 1)和 4 3.5 % (P <0 .0 1)肝总减卵率。粗提包涵体蛋白中rSj338和经分子筛纯化的蛋白中rSj338分别可诱导小鼠产生 13.9% (P <0 .0 5 )和 2 0 .0 % (P <0 .0 5 )的减虫率 ,30 .0 % (P <0 .0 1)和 4 1.7% (P <0 .0 1)肝总减卵率。结论　获得的日本血吸虫线粒体相关的重组融合蛋白(rSj338/2 6GST)具有良好的免疫学活性 ,重组融合蛋白 (rSj338/2 6GST)及rSj338均可诱导宿主抗血吸虫感染的部分保护力。     

紫外线辐照致弱日本血吸虫尾蚴诱导C57BL/6 小鼠皮肤早期免疫应答动态变化的研究

目的观察紫外线辐照致弱日本血吸虫尾蚴经耳廓免疫C57BL/6小鼠后,小鼠皮肤组织早期免疫应答的动态变化.方法 98只小鼠测定双侧耳廓厚度后,14只作为0 d组不感染/免疫,其余平均分为2组.一组经双侧耳廓分别感染正常尾蚴150 条/耳, 另一组经双侧耳廓分别免疫紫外线辐照致弱尾蚴150条/耳.感染/免疫后第1、2、4、7、14、21天分别剖杀2组小鼠各7只,测定耳廓厚度.取感染处的耳廓组织,左侧进行培养,收集上清检测相应细胞因子.右侧纵切为二,一半进行HE染色观察炎症反应;另一半应用免疫组化技术观察皮肤组织中IL-12和CD11c分子的表达.结果正常尾蚴感染的小鼠皮肤炎症反应在第7天达到高峰后逐渐下降,第21天基本恢复;而辐照尾蚴免疫小鼠耳廓皮肤在第14天炎症反应才达高峰,第21天反应仍然十分强烈.尾蚴穿皮后第4天,组织中有较高水平的CD11c及IL-12分子表达.皮片培养细胞因子定量检测也显示：与Th1细胞应答相关的IL-12、IFN-γ及Th2型因子IL-10早期在正常、辐照尾蚴差异无显著性.结论和正常尾蚴相比,辐照致弱尾蚴诱导的皮肤免疫应答持续时间长、强度高,但两者诱导Th细胞向不同方向极化并不发生于免疫应答启动阶段.     

Sj43B基因编码蛋白的日本血吸虫虫体组织定位

目的确定Sj43B基因编码蛋白在日本血吸虫成虫体内组织及亚细胞水平定位。方法取新鲜日本血吸虫成虫标本,按电镜生物样品制备方法常规固定、包埋,制成超薄切片,与鼠源纯化的抗重组Sj43B基因编码蛋白的IgE抗体(对照组试验为正常鼠血清)反应,再与大鼠抗小鼠IgE的IgG抗体结合,最后与蛋白A-胶体金连接,透射电镜下观察胶体金颗粒的分布。结果用正常鼠血清处理虫体切片,从皮层、肌层到皮层细胞体,未见有明显的电子致密的胶体金颗粒分布。用特异性IgE抗体处理的样品上,胶体金颗粒分布较广泛,见于皮层、肌层、胞质、核膜和核质内。结论Sj43B基因编码蛋白在血吸虫成虫体内的分布无组织和亚细胞结构特异性。     

免疫印染分析慢性血吸虫病人血清识别日本血吸虫的抗原谱

业已证明,感染血吸虫的人或动物均能建立部分抗感染的抵抗力。分析和确定与建立这种抵抗力有关的血吸虫抗原成分,对筛选血吸虫候选疫苗分子和了解血吸虫抗原与宿主免疫系统的相互作用都是非常重要的。有关这方面的研究以曼氏血吸虫居多。在曼氏血吸虫保护性抗原的研究中,已从童虫、成虫和虫卵的抗原成分中确定了数个具有保护性功能的抗原分子,此提示血吸     

日本血吸虫虫卵核糖核酸的提取及鉴定

本文采用异硫氰酸胍－酚－氯仿一步法成功地提取了日本血吸虫虫卵总RNA，琼脂糖电泳结果呈现18S一条主带，与日本血吸虫成虫RNA的电泳结果一致。日本血吸虫虫卵RNA的抽提成功为虫卵cDNA库的构建以及虫卵有效抗原的筛选奠定了基础。     

日本血吸虫病血清流行病学研究——Ⅰ.三个不同流行区人群抗体反应的年龄分布调查

本文报道了应用日本血吸虫肠相关抗原的间接血凝试验(IHA),对一个现存的和两个已经基本控制传播的血吸虫病流行区人群进行血清流行病学的调查结果。发现现存的流行区的人群抗体水平较其他两个地区明显为高。而且三个地区人群抗体阳性者的抗体滴度平均水平(GMRT)的年龄分布曲线也具不同的特征,现存流行区的低年龄组GMRT较高年龄组为高,而已经控制传播的地区低年龄组抗体水平则为0。认为分析当地低年龄组人群抗体水平,似可作为评价传播是否阻断的依据,并可作为监测流行趋势的工具。     

日本血吸虫病肝脾肿的临床流行病学调查

根据在一重疫区,以血吸虫性肝脾肿的临床流行病学调查为重点的社区研究资料,描述了该社区在持续若干年间断和不规则化疗后肝脾肿的临床流行病学状态,并阐述了该社区日本血吸虫感染的流行率,感染度和患病率之间的关系。作者发现,在该社区特定条件下,血吸虫感染是高流行率伴低感染度状态,同时显示相当高程度的肝脾肿患病率。研究资料分析结果提示,肝脾肿的发生与感染的积累和持续时间,并在一定程度上与感染度有关。作者还指出应用便携式超声诊断仪作超声影像诊断调查是衡量日本血吸虫病患病或病情的敏感工具。     

酶标记免疫吸附试验的微量平板法在疟疾中的应用

酶标记免疫吸附试验(ELISA)是运用双抗体法的原理,以酶反应为指标,用酶标记的抗免疫球蛋白定量检测特异性抗体的一种较敏感的技术。Voller等已将此法用于疟疾抗体的检查。由于原先这一试验要在塑料试管内进行,不便于在现场大规模的使用,且耗费试剂较多,因此本文作者又设计了在微量     

间接血球凝集试验在疟疾中的应用:恶性疟原虫(抗原)致敏红细胞的复演性

为了评价疟疾间接血球凝集试验的可靠性以及估价其在连续的血清流行病学调查中的应用价值,需要提供有关该试验的复演性的资料。本文作者用不同批的恶性疟原虫抗原致敏同一批绵羊红细胞,以及用同一批抗原致敏不同批的绵羊红细胞,共制备成5种试验细胞。以这5种试验细胞分别检测73份标准阳性血清的结果对疟疾间接血球凝集试验的复演性进行了评价。     

日本血吸虫病常用诊断方法应用价值的评估IIHA筛查法对血吸虫病疫区人群感染率的评价

目的分析IHA筛查法评估血吸虫病疫区人群感染率的可靠性。方法在江西省鄱阳湖血吸虫病疫区选取一个村的居民为研究对象，对每位对象收集2次新鲜粪便标本各制作6张Kato片（2粪12片）进行病原学检测，同时采用IHA法进行血清学定量检测，分析常规1粪3张Kato片的阳性检出率与漏检率、IHA的诊断效率及IHA与Kato-Katz法结果的相关性。结果3张Kato片漏检率达19．7％～66．1％，1粪较2粪漏检率为23．0％。IHA的敏感度和特异度分别为69．6％、89．4％，与Kato-Katz法的总符合率为86．7％。IHA的阴性预测值为96．8％，但阳性预测值较低（36．8％），阳性漏检率高达30．4％；IHA筛查法对试点区人群感染率估算的漏检率达35．8％。结论IHA筛查法对疫区人群实际感染率估算有较大的偏差，IHA作为筛查工具仍需提高其敏感性和特异性，IHA阳性阈值有待进一步探讨。