抗独特型抗体在寄生虫病领域的研究进展及应用

独特型及抗独特型抗体源自免疫网络学说,抗独特型抗体具有模拟抗原及免疫调节的作用.基于这一理论基础,抗独特型抗体已被J一泛应用于疾病的免疫诊断、疫苗及免疫治疗等方面的研究中.该义就抗独特型抗体的制备、鉴定方法以及其在寄生虫病领域中的研究进展进行综述.     

EBV编码潜伏膜蛋白2A抗原表位的串联表达及其免疫原性分析

目的:制备具有免疫原性的EB病毒潜伏膜蛋白2A (latent membrane protein 2A,LMP2A)的表位串联蛋白并分析其免疫学特性?方法:用DNAstar软件分析LMP2A的抗原表位,将预测的免疫原性较强的两个表位通过基因合成串联在一起,克隆到原核表达载体pET28a中,经大肠杆菌BL21表达并纯化?制备的含LMP2A表位重组蛋白经SDS-PAGE?Western blot鉴定后,免疫小鼠制备多克隆抗体,以ELISA检测抗体的效价,免疫组织化学法检测该抗体对天然LMP2A的特异性?结果:通过原核表达与纯化,获得高纯度的表位融合蛋白,经小鼠免疫并制备效价高且特异性的小鼠抗LMP2A的多克隆抗体,该抗体可用于ELISA和免疫组织化学分析?结论:本研究制备的表位融合蛋白,具有天然抗原的免疫原性,可制备能特异性识别天然LMP2A分子的多克隆抗体,为利用表位融合蛋白筛选全人源基因工程抗体奠定了基础?     

TK1、Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及预后意义

目的:探讨细胞质胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)和Ki-67在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达水平及其对NSCLC患者预后的意义?方法:将202例NSCLC及63例癌旁肺组织标本制作成组织芯片,采用免疫组织化学EnVision法检测TK1和Ki-67的表达,探讨其表达水平与临床病理特征及预后的关系?结果:NSCLC组织中TK1(60.89%)和Ki-67(55.45%)的阳性表达率均显著高于癌旁肺组织(P < 0.01);Spearman等级相关分析显示二者的表达呈正相关(r = 0.518, P < 0.001);NSCLC中,TK1和Ki-67的表达均与肿瘤分化程度和TNM分期显著相关(P < 0.05);Kaplan-Meier生存分析显示随TK1表达的增强和Ki-67指数的增高,NSCLC患者的总体生存期逐渐降低(P < 0.01);Cox 回归分析提示肿瘤TK1表达和TNM分期是影响NSCLC患者预后的独立危险因素(P < 0.05)?结论:TK1在NSCLC的表达与肿瘤的分化?进展有关,TK1表达有助于对患者预后的评价?     

BRCA2在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

目的:乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)是近几年发现的新的抑癌基因,本研究旨在分析BRCA2在卵巢癌组织中的表达及其临床意义?方法:采用1对引物扩增BRCA2基因第14外显子,应用聚合酶链反应和基因测序技术检测BRCA2基因,并且应用免疫组化和Western blot检测肿瘤组织BRCA2蛋白的表达?结果:卵巢黏液性囊腺瘤和正常组织BRCA2基因未发生突变,浆液性肿瘤和黏液性囊腺癌的BRCA2第14外显子的128位碱基T突变为C?Western blot检测结果显示BRCA2在卵巢囊腺癌上的表达低于正常卵巢组织和卵巢囊腺瘤,免疫组化检测结果发现BRCA2在卵巢黏液性囊腺瘤和黏液性囊腺癌中的阳性率分别为87.50%和53.33%,差异有统计学意义(P < 0.05);而BRCA2在卵巢浆液性囊腺瘤和浆液性囊腺癌中阳性率分别为53.85%和73.17%,差异没有统计学意义(P > 0.05)?BRCA2蛋白在不同年龄?组织学分型?分化程度和临床分期各组间差异均无统计学意义(P > 0.05)?结论:BRCA2在卵巢癌组织中的表达不仅可以用于诊断,也可能为治疗提供一个途径?     

人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达及对胰腺癌细胞增殖的抑制作用

目的:以人源抗TROP2抗体Fab基因为模板,构建人源抗TROP2全分子抗体IgG真核表达系统,观察人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞增殖的抑制作用?方法:分别扩增抗TROP2抗体的重链和轻链基因,构建人源抗TROP2全分子抗体IgG的重组表达载体pWS-anti-TROP2,转染CHO dhfr-细胞,加MTX筛选抗体表达量高的单克隆株,Protein G 亲和柱纯化,获得人源抗TROP2全分子抗体IgG?SDS-PAGE?Western blot?ELISA?免疫荧光和流式细胞术等方法鉴定人源抗TROP2全分子抗体IgG并分析其免疫学活性?MTT法分析人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌细胞BxPC-3的增殖抑制作用?结果:成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统,表达并纯化人源抗TROP2全分子抗体IgG?经鉴定,抗体的轻链与重链大小与预期一致,可与TROP2蛋白特异性结合,效价可达1∶6 400?MTT检测结果表明,人源抗TROP2全分子抗体IgG对胰腺癌BxPC3细胞的增殖有明显的抑制作用,且呈时效?量效依赖关系?结论:本研究成功构建了人源抗TROP2全分子抗体IgG的真核表达系统,并证明此抗体可特异性识别胰腺癌细胞表面的TROP2蛋白,且对胰腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用?     

高校数字图书馆建设的思考

文章概要介绍了南京医科大学数字图书馆的建设历程以及目前存在的问题,指出数字图书馆建设是一个系统性工程,需要兼顾好硬件?软件和人员之间的关系,并给出相应的解决方案?     

临床医学专业留学生学历生的教学实践与探索

临床医学专业留学生本科教育（英语授课）应按照医学本科生的培养目标趋同培养,同时也应考虑留学生毕业后需参加本国或第三国职业医生资格认证。南京医科大学的教学实践证明：组建具有先进教育理念、较高专业外语水平的教学团队,改革课程设置和教学模式,建立与国际接轨的医学教育体系,已成为留学生教育的迫切需要。     

加大管理力度 提高留学生生源质量

留学生生源质量作为留学生教育的入口,直接关系到留学生教育的培养质量。如何在数量不断增长的同时保证培养质量,值得我们深思与探索。文章通过分析我校医学类留学生生源质量的现状、目前存在的问题以及我们在控制生源质量方面所作的努力和思考,就如何加大管理力度,提高我校留学生生源质量进行研究和探讨。     

骨桥蛋白与肿瘤细胞辐射敏感性的研究进展

骨桥蛋白（OPN）是一种分泌性磷酸化糖蛋白,在大部分肿瘤中均有表达,且与肿瘤生长、复发、转移相关,已成为多种恶性肿瘤转移复发的血浆标志物。研究表明,细胞对电离辐射的效应强烈地依赖于氧的存在,乏氧肿瘤细胞易对放射治疗产生抗性,肿瘤细胞乏氧可上调OPN的表达,可通过检测血浆OPN的水平来评估肿瘤氧含量,血浆OPN高表达时,提示肿瘤对放射治疗反应较差,肿瘤复发风险增加和病人预后差。     

IgG在CpG DNA诱导巨噬细胞活化与JNK和p38通路中的作用

目的：探究免疫球蛋白G（IgG）在CpG DNA诱导巨噬细胞活化过程中的调节作用及其对信号通路的影响。方法：体外培养小鼠骨髓源巨噬细胞,采用流式细胞仪和免疫荧光技术对巨噬细胞表面标志物和吞噬功能进行鉴定。IgG、CpG DNA以及IgG联合CpG DNA分别处理巨噬细胞后,采用流式细胞技术检测巨噬细胞表面活化分子及胞内细胞因子,免疫蛋白印迹检测核因子（nuclear factor,NF）?κB和MAPK信号通路相关蛋白磷酸化。结果：体外培养巨噬细胞表面标志物CD11b和F4/80的表达率约99.7%,巨噬细胞对FITC?IgG吞噬比例约70%;IgG上调CpG DNA活化巨噬细胞表面CD40、CD80和CD86的表达（P < 0.05）;IgG促进CpG DNA诱导巨噬细胞内JNK和p38磷酸化,但对ERKp44/42和NF?κBp65的磷酸化没有明显作用;IgG联合CpG DNA诱导巨噬细胞分泌大量的细胞因子肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）?α。结论：IgG在CpG DNA诱导巨噬细胞活化与MAPK信号通路JNK和p38磷酸化中起促进作用,通过促使表达上调共刺激分子CD40、CD80和CD86与分泌TNF?α进一步活化巨噬细胞。