肺癌中结肠多发性腺瘤样息肉基因启动子1A序列甲基化模式的研究

目的 探寻结肠多发性腺瘤样息肉（APC）基因启动子1A序列中肺癌甲基化位点及其存在模式。方法 用甲基化序列特异性引物，对阳性控制样品（CB＋）、阴性控制样品（CB-）、13份正常肺组织及19份肺癌组织进行APC基因启动子1A序列甲基化特异性扩增（MSP），其扩增产物直接测序和进行克隆测序分析。结果 在19份肺癌组织中，APC基因启动子1A序列的707、714、719和726位点发生高甲基化，甲基化率分别为95％（18／19）、74％（14／19）、74％（14／19）和74％（14／19），与正常肺组织比较，差异均有统计学意义（P〈0．001）。而679和687位点甲基化发生率均为11％（2／19），与正常肺组织甲基化发生率（0／13）接近（P〉0．05）。结论 在APC基因启动子1A序列中存在CpG胞嘧啶二核苷酸特定甲基化模式，其对肺癌早期诊断可能有重要意义。     

肺癌细胞促进单核吞噬细胞MAPK相关通路活化诱导炎性细胞因子表达上调的研究

目的：通过建立人单核吞噬细胞系（THP‐1）和人肺腺癌细胞系（SPC‐A1）共培养体系,检测共培养体系中THP‐1的炎性细胞因子mRNA表达水平和丝裂原活化蛋白激酶通路（MAPK）的表达情况,初步阐明肺癌微环境对THP‐1中炎性细胞因子表达的影响。方法体外培养SPC‐A1细胞系、THP‐1细胞系,并建立二者共培养体系,设置THP‐1单独培养组为对照组。24h后,收集各组THP‐1细胞,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real‐TimePCR）检测白细胞介素（IL）‐1β、‐6、‐8及肿瘤坏死因子‐α（TNF‐α）的mRNA表达水平;Westernblot检测MAPK通路蛋白c‐Jun氨基末端激酶及其磷酸化形式（JNK／p‐JNK）、丝裂原活化蛋白激酶p38亚单位及其磷酸化形式（p38MAPK／p‐p38MAPK）、细胞外调节蛋白激酶及其磷酸化形式（ERK／p‐ERK）的表达。结果共培养24h后,共培养组THP‐1的IL‐1β、IL‐8mRNA表达水平均明显高于对照组（P＜0．05）,分别为对照组的5．81、4．21倍;Westernblot结果显示共培养组p38MAPK、p‐p38MAPK的表达水平均明显高于对照组（P＜0．05）。结论肺癌细胞可引起肺癌环境中单核吞噬细胞中p38MAPK通路的活化,进而诱导IL‐1β、IL‐8mRNA表达上调,有利于肿瘤炎症微环境的维持和促进肿瘤的进展。     

《临床检验免疫学》开展双语教学的思考

双语教学为培养高素质医学检验人才提供了一种有效的教育模式。通过对南京医科大学医学检验系实施《临床检验免疫学》双语教学,结合双语教学的实际情况以及医学检验自身的专业特点,提出目前存在的问题及解决措施,从而探索医学检验双语教学改革的新途径,为培养高素质医学检验人才提供一种有效的教育模式。     

血清CA19-9、CEA水平与胰腺癌预后的关系

目的：探讨胰腺癌患者术前血清中CA19-9与CEA表达情况对预后的影响。方法：回顾分析医院2012年1月～2013年12月128例胰腺癌患者临床病理资料,应用Kaplan．Meier法、Log—rank检验及Cox回归分析CA19-9和CEA水平与患者生存时间的关系。血清中CA19-9〉39U／mL,CEA〉4．7ng／mL被视为表达增高。结果：128例患者平均年龄为62岁,中位生存期为12．2月,其中CA19—9和CEA的表达水平增高的比例分别为78．1％,37．5％。CA19-9、CEA升高组患者的预后明显差于正常组（CA19-9,P=0．027;CEA,P=0．036）。Cox多因素回归分析显示淋巴结转移、CA19—9〉39U／mL、CEA〉4．7ng／mL是影响胰腺癌患者预后的独立因素。结论：术前CA19-9、CEA水平与胰腺患者生存时间密切相关,能有效评估患者的预后。     

抗人非小细胞肺癌单克隆抗体对肺腺癌抑制作用的实验研究

目的:研究抗人非小细胞肺癌单克隆抗体(单抗)NJ488-1对肺腺癌的体内外抑制作用。方法:将人肺腺癌细胞SPC-A1分别与不同浓度(0、200、400、800、1 600、2 000μg/ml)的单抗NJ488-1在双层琼脂中共同培养2周,计算克隆形成率、抑制率;建立人肺癌移植瘤动物模型,腹腔注射不同剂量(200、400、800μg)单抗或生理盐水,作为单抗组和对照组,测量肿瘤体积,3周后处死小鼠,称量肿瘤湿重,计算抑瘤率;400μg/ml单抗与SPC-A1细胞作用24、48 h后,观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:软琼脂克隆形成试验中,200μg/ml单抗作用SPC-A1细胞2周后克隆抑制率为23.4%,400μg/ml达62.5%,800μg/ml及以上浓度抑制率达100%;裸鼠移植瘤实验,400、800μg单抗组平均肿瘤体积显著小于对照组(P=0.004,P=0.003);4组小鼠平均瘤重组间差异有统计学意义(P=0.044),其中400、800μg单抗组平均瘤重显著低于对照组(P=0.032,P=0.015),200μg和800μg单抗组间也存在显著差异(P=0.048),200、400、...     

卵巢癌细胞通过P38 MAPK通路促进CD8~+调节T细胞的生成

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路在卵巢癌细胞(SKOV3)诱导CD8+Treg分化过程中的作用。方法建立SKOV3与健康人CD8+T细胞体外共培养体系,设置CD8+T细胞单独培养组为对照组。共培养5 d后,收集各组CD8+T细胞,荧光定量PCR和流式细胞术检测CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达率;功能抑制试验检测两组CD8+T细胞对nave CD4+T细胞增殖能力的影响;Western blot检测MAPK通路相关蛋白(ERK/p-ERK、JNK/p-JNK、P38 MAPK/p-P38 MAPK)的表达水平;P38 MAPK特异性抑制剂SB203580预处理CD8+T细胞后,评价CD8+T细胞中Treg相关标志物(CD25、Foxp3、CD28)的表达变化。结果共培养组CD8+T细胞中CD25及Foxp3表达率均显著高于对照组(P0.05),CD28表达率显著低于对照组(P0.05);共培养组CD8+T细胞相比对照组,抑制nave CD4+T细胞的增殖力增强;Western blot结果显示,共培养组p-P38 MAPK的表达水平显著高于对照组(P0.05),SB203580预处理后CD8+T细胞中Treg相关标志物表达率均下调。结论卵巢癌细胞通过活化CD8+T细胞的P38 MAPK信号通路诱导具有抑制作用的CD8+Treg的生成,促进肿瘤进展。     

南京地区社区成年健康人群鼻咽部机会致病菌携带情况调查

目的了解南京地区社区成年健康人群鼻咽部机会致病菌携带情况。方法对南京地区社区1019例成年健康者进行非感染状态下鼻咽拭子菌种鉴定。结果鼻咽部检出率较高的机会致病菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、嗜血杆菌属、肺炎链球菌和肺炎克雷伯杆菌;单一菌群携带率为30.7%,复合致病菌携带率为3.4%,总携带率为34.2%;随年龄增长,金黄色葡萄球菌、嗜血杆菌属的检出率显著降低(P<0.05)。结论南京地区社区健康成年人群鼻咽部普遍存在大量凝固酶阴性葡萄球菌,同时金黄色葡萄球菌、嗜血杆菌属、肺炎链球菌和肺炎克雷伯菌等亦有较高检出率。     

母乳及婴儿尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿人巨细胞病毒感染中的应用

目的:定量检测疑似人巨细胞病毒(HCMV)感染婴儿尿液及对应母亲乳汁中HCMV DNA,评估两者在诊断HCMV感染中的价值,并比较两者浓度之间的关系。方法:选取51例疑似HCMV感染的婴儿,收集其新鲜尿液及对应的母亲乳汁,分别用荧光定量聚合酶链式反应法(FQ-PCR)检测HCMV DNA。结果:51例疑似HCMV感染婴儿尿液中,有49例检测出HCMV DNA,阳性率为96.0%(49/51)。51份婴儿母亲乳汁中,有37份检测出HCMV DNA阳性,阳性率为72.5%(37/51)。对37例尿液与乳汁HCMV DNA均为阳性的患儿,分别对尿液与乳汁HCMV DNA浓度取对数,将两者进行相关性分析,结果显示两者之间存在一定的相关性,相关系数为0.332(P<0.05)。结论:婴儿尿液中HCMV DNA检测对于婴儿HCMV的感染具有重要的价值,同时对其母乳HCMV DNA检测,可以发现婴儿尿液和母乳HCMV DNA具有一定的相关性。     

头孢哌酮和哌拉西林与β内酰胺酶抑制剂对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的后效应研究

目的测定头孢哌酮和哌拉西林与克拉维酸、舒巴坦、三唑巴坦3种β内酰胺酶抑制剂的不同复方的最低抑菌浓度（MIC）、抗生素后效应（PAE）、β内酰胺酶抑制剂后效应（PLIE）和亚抑菌浓度后效应（PASME）。方法以肉汤稀释法测定MIC；以菌落计数法测定菌落形成单位（CFU），根据CFU做生长曲线，计算PAE、PLIE、PASME。结果不同比例复方对产β内酰胺酶菌株的MIC较单方呈2—256倍的降低。无论单方还是复方均无长PAE。3种β酰胺酶抑制剂的PLIE对于大肠埃希菌有正有负（－2．25h～〉5h），而对于肺炎克雷伯菌均为正值（0．34h～5．37h）。对于肺炎克雷伯菌，0．2MIC的头孢哌酮／舒巴坦（1／1）的PASME为0．32h，0．1MIC、0．2MIC的哌拉西林／克拉维酸（8／1）的PASME分别为2．96h、4．41h。结论同时具有长PLIE及PASME的复方，PLIE、PASME较其半衰期在给药方案的设计中更为重要；PAE、PLIE、PASME作为重要的药效动力学参数，可应用于评价新抗菌药物的药效学和优化给药方案。     

社区成年健康人群鼻咽部主要机会致病菌耐药性分析

目的分析南京部分社区成年健康人群鼻咽部5种主要机会致病菌(凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌)的耐药情况。方法将2009年7月至2010年7月分离自社区成年健康人群鼻咽部的5种主要机会致病菌分别进行纸片扩散法药敏试验和琼脂稀释法。按CLSI 2010年标准判定结果,用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 1019例社区成年健康受检者鼻咽部标本中分离出凝固酶阴性葡萄球菌404株,其中甲氧西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)162株(占40.10%);金黄色葡萄球菌109株中甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)19株(17.43%);两种葡萄球菌对青霉素均表现出高度耐药,对万古霉素100%敏感,MRSA和MRCNS对多种临床常用抗菌药物均显示高度耐药。肺炎克雷伯菌32株,除对阿莫西林/克拉维酸耐药率稍偏高(39.20%),对其他常用抗菌药物敏感性皆较高,ESBLs阳性率为25.00%。49株肺炎链球菌中大部分对红霉素、克林霉素和青霉素表现出较高的耐药率,分别为71.20%、76.90%和74.40%。流感嗜血杆菌74株,对复方新诺明耐药率最高,为44.4%,但对其他常用的抗菌药物敏感性均较高。结论南京部分社区健康成年人鼻咽部所携带的主要机会致病菌中,MRSA和MRCNS对多种临床常用抗菌药物均显示高度耐药,未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌。肺炎链球菌对常用的红霉素、克林霉素和青霉素显示了高耐药。甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(MSCNS)、流感嗜血杆菌和肺炎克雷伯菌对多数常用的抗菌药物敏感性均较高。加强细菌耐药监测,防止耐药菌在社区的扩散尤为重要。